• 제목/요약/키워드: MBP-E2

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Production and Purification of Single Chain Human Insulin Precursors with Various Fusion Peptides

  • Cho, Chung-Woo;Park, Sun-Ho;Nam, Doo-Hyun
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제6권2호
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    • pp.144-149
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    • 2001
  • For the production and purification of a single chain human insulin precursor, four types of fusion peptides $\beta$-galactosidase (LacZ), maltose binding protein (MBP), glutathione-S-transferase (GST), and (His)(sub)6-tagged sequence (HTS) were investigated. Recombinant E. coli harboring hybrid genes was cultivated at 37$\^{C}$ for 1h, and gene induction occurred when 0.2mM of isopropyl-D-thiogalactoside (IPTG) was added to the culture broth, except for E. coli BL21 (DE3) pLysS harboring a pET-BA cultivation with 1.0mM IPTG, followed by a longer than 4h batch fermentation respectively. DEAE-Sphacel and Sephadex G-200 gel filtration chromatography, amylose affinity chromatography, glutathione-sepharose 4B affinity chromatography, and a nickel chelating affinity chromatography system as a kind of immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC) were all employed for the purification of a single chain human insulin precursor. The recovery yields of the HTS-fused, GST-fused, MBP-fused, and LacZ-fused single chain human insulin precursors resulted in 47%, 20%, 20%, and 18% as the total protein amounts respectively. These results show that a higher recovery yield of the finally purified recombinant peptides was achieved when affinity column chromatography was employed and when the fused peptide had a smaller molecular weight. In addition the pET expression system gave the highest productivity of a fused insulin precursor due to a two-step regulation of the gene expression, and the HTS-fused system provided the highest recovery of a fused insulin precursor based on a simple and specific separation using the IMAC technique.

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초고속네트워크를 이용한 e-VLBI 설계 및 구현 (The Design of e-VLBI using High-Speed Network)

  • 송민규;김현구;민영철;김광동;노덕규;오세진
    • 한국정보통신설비학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신설비학회 2003년도 하계학술대회
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    • pp.165-171
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    • 2003
  • e-VLBI(electronic VLBI)는 각 관측 사이트에서 얻은 대용량의 VLBI 데이터를 영상합성처리 센터로 전송하기 위하여 초고속정보통신망을 이용하는 기술이다. 이는 전세계의 관측소에서 얻어낸 막대한 용량의 데이터를 실시간, 준-실시간 형태로서 데이터센터에 전송할 수 있는 유일한 방법으로서 전세계에 걸쳐 구축된 초고속정보통신망을 적극적으로 활용하는 애플리케이션이라 할 수 있다. 한국천문연구원에서는 연세대, 울산대, 탐라대에 건설되는 20m 전파망원경과 대덕전파천문대의 14m 안테나를 네트워크로 연결하는 e-KVN(Korean VLBI Network) 계획을 추진 중에 있으며 이는 각 관측소에서 얻은 VLBI 데이터를 네트워크를 통하여 1024Mbps로 데이터센터까지 실시간으로 전송하는 것을 그 궁극적 목표로 하고 있다. 본 논문은 크게 5장으로 이루어져 있는데 먼저 1장 서론과 2장에서는 각각 VLBI와 e-VLBI에 대한 간략한 소개와 원리에 대해 알아보도록 한다. 3장에서는 e-VLBI의 작동 메커니즘, 4장에서는 e-KVN의 명세 및 현재 구상하고 있는 e-KVN의 네트워크 토폴로지에 대해 기술하고 5장에서 e-KVN의 전망 및 구축에 있어서 예상되는 문제점 및 향후 보완해야 네트워크 기술에 대해 간략히 언급하는 것으로 결론을 맺도록 한다.

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Expression and Characterization of Uropathogenic Escherichia coli Adhesin Protein Linked to Cholera Toxin A2B Subunits in Escherichia coli TB1

  • Lee, Yong-Hwa;Ryu, Dong-Kyun;Kim, Byung-Oh;Pyo, Suhk-Neung
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제13권4호
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    • pp.552-559
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    • 2003
  • The FimH subunit of type 1-fimbriated Escherichiu coli (E. coli) has been determined as a major cause for urinary tract infections. Thus, to produce a possible vaccine antigen against urinary tract infections, the fimIH gene was genetically coupled to the ctxa2b gene and cloned into a pMAL-p2E expression vector. The chimeric construction of pMALfimH/ctxa2b was then transformed into E. coli K-12 TB1 and its nucleotide sequence was verified. A fusion protein, based on fusing adhesin to the cholera toxin subunit A2B (CTXA2B), was induced with 0.01 mM isopropyl-${\beta}-D-thiogalactoside$ (IPTG) for 4 h at $37^{\circ}C$ to yield a soluble fusion protein. The fusion protein was then purified by affinity chromatography. The expressed fusion protein was confirmed by SDS-PAGE and Western blotting using antibodies to the maltose binding protein (MBP) or the cholera toxin subunit B (CTXB), plus the N-terminal amino acid sequence was also analyzed. The orderly-assembled fusion protein was confirmed by a modified $G_{Ml}-ganglioside$ ELISA, using antibodies to adhesin. The results indicated that the purified fusion protein was an adhesin/CTXA2B protein containing E. coli adhesin and the $G_{Ml}-ganglioside$ binding activity of CTXB. Accordingly, this adhesin/CTXA2B protein may be a potential antigen for oral immunization against uropathogenic E. coli.

Immunization with a Genetically Engineered Uropathogenic Escherichia coli Adhesin-Escherichia coli Enterotoxin Subunit A2B Chimeric Protein

  • Lee, Yong-Hwa;Kim, Byung-O;Pyo, Suhk-Neung
    • Biomolecules & Therapeutics
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    • 제13권2호
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    • pp.101-106
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    • 2005
  • The generation of secretory IgA antibodies (Abs) for specific immune protection of mucosal surfaces depends on stimulation of the mucosal immune system, but this is not effectively achieved by parenteral or even oral administration of most soluble antigens. Thus, to produce a possible vaccine antigen against urinary tract infections, the uropathogenic E. coli (UPEC) adhesin was genetically coupled to the heat-labile Escherichia coli enterotoxin A2B (ltxa2b) gene and cloned into a pMAL-p2E expression vector. The chimeric construction of pMALfimH/ltxa2b was then transformed into E. coli K-12 TB1 and its nucleotide sequence was verified. The chimeric protein was then purified by applying the affinity chromatography. The purified chimeric protein was confirmed by SDS-PAGE and westem blotting using antibodies to the maltose binding protein (MBP) or the heat labile E. coli subunit B (LTXB), plus the N-terminal amino acid sequence was analyzedd. The orderly-assembled chimeric protein was confirmed by a modified $G_{M1}$-ganglioside ELISA using antibodies to adhesin. The results indicate that the purified chimeric protein was an Adhesin/LTXA2B protein containing UPEC adhesin and the $G_{M1}$-ganglioside binding activity of LTXB. thisstudy also demonstrate that peroral administration of this chimeric immunogen in mice elicited high level of secretory IgA (sIgA) and serum IgG Abs to the UPEC adhesin. The results suggest that the genetically linked LTXA2B acts as a useful mucosal adjuvant, and that adhesin/LTXA2A chimeric protein might be a potential antigen for oral immunization against UPEC.

벼의 칼슘-의존적 단백질 카이네즈인 재조합 OsCPK11의 인산화 특성 (Phosphorylation Properties of Recombinant OsCPK11, a Calcium-dependent Protein Kinase from Rice)

  • 조일상;이수희;박충모;김성하
    • 생명과학회지
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    • 제27권12호
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    • pp.1393-1402
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    • 2017
  • 식물에서, 칼슘-의존적 단백질 카이네즈(CDPKs)는 $Ca^{2+}$ 신호전달에서 중요한 $Ca^{2+}$ 수용체이다. 벼(Oryza sativa L.)의 CDPKs인 3개의 OsCPKs는 생물정보에 대한 분석이 이루어졌으나, OsCPK11 유전자는 연구가 완전히 수행되지 않았다. 다양한 조직에서 OsCPK11 유전자가 전사수준에서 발현한다는 것은 알려져 있으나, 단백질 수준에서 발현과 생화학적인 특징은 잘 알려져 있지 않다. 이 연구는 OsCPK11의 몇 가지 생화학적 특징을 알아보기 위해 이루어졌다. 먼저 in vitro에서 E. coli를 이용하여 GST-OsCPK11를 발현시키고, 카이네즈 활성 측정과 칼슘-의존적 단백질 카이네즈로서 OsCPK11의 생화학적 분석도 수행하였다. OsCPK11은 스스로 자가인산화하며, $Ca^{2+}$의 존재 하에서 기질로서 histone III-s와 MBP로 인산기 전달 작용을 수행한다. 재조합 OsCPK11의 활성은 $Mg^{2+}$에 의해 영향을 받으며, pH 7.0-7.5에서 최적의 활성을 보인다. 또한 OsCPK11의 활성은 높은 수준의 $Ca^{2+}$가 존재하는 조건에서는 $Mg^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Na^+$의 영향을 받지 않는다. 또한 OsCPK11의 자가인산화는 OsCPK11의 $Ca^{2+}$ 민감도를 감소시키는 것으로 밝혀졌다. 마지막으로, OsCPK11의 N-말단 다양화 지역으로 토끼 항체를 만들었고, immunoblot을 기초로 polyclonal antibody는 95.5 kD의 GST-OsCPK11를 인식하는 것으로 나타났다. 이 결과는 벼의 $Ca^{2+}$ 매개 신호전달에서 OsCPK11의 기능을 더 잘 이해하는데 도움을 줄 것이며, 심화 연구를 위해 다양한 OsCPKs의 단백질 정보를 결정하는 것이 필요할 것이다.

부호분할 다중화 기법을 이용한 음성 회선 확대 방안연구 (The Study on The Voice Channel Expansion Using Code Division Multiplexing)

  • 권기형;진용옥
    • 한국통신학회논문지
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    • 제25권8A호
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    • pp.1206-1212
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    • 2000
  • 국내 유선 전화망은 가입자 구간은 한회선씩을 사용하며 전송망 구간은 TDM을 사용하며 음성 한 채널에 64Kbps를 할당하고 있으며 특히 E1의 경우 회선 당 음성 30채널에 2.048Mbps로 구성되어있다 반면에 이동 전화망은 가입자 구간은 수용용량을 늘리고 효율화시키기 위해 CDMA방식을 이용하고 있지만 전송망 구간은 유선망과 마찬가지로 TDM방식을 이용하고 있다 본논문에서는 유선의 가입자 구간에 대해서도 CDM 기법을 이용하여 채널을 증가시켜 회선의 효율성을 증가시키고 비용을 저렴하게 할 수 있음을 보이고 있다.

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Generation of Demyelination through Use of M. leprae-specific phenolic glycolipid-1 (PGL-1)

  • Kim, Ji-Young;Choi, Chang-Shik;Hong, Seong-Karp
    • Rapid Communication in Photoscience
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    • 제4권2호
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    • pp.48-49
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    • 2015
  • For myelination, Schwann cells and neuron cells from dorsal root ganglion (DRG) of rat embryos (E16) were cultured in vitro system. The purified DRG cells with anti-mitotic agents and purified Schwann cells were cocultured and then accomplished myelination processing. Treatment of M. leprae-specific phenolic glycolipid-1 (PGL-1) into this coculture system was performed and then accomplished demyelination. Therefore, we identified demyelination processing using antibody of myelin basic protein (MBP).

Induction of a systemic IgG and secretory IgA responses in mice by peroral immunization with uropathogenic Escherichia coli adhesin protein coupled to cholera toxin A2B subunits

  • Lee, Yong-Hwa;Kim, Byung-Oh;Rhee, Dong-Kwon;Pyo, Suh-Kneung
    • Biomolecules & Therapeutics
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    • 제11권3호
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    • pp.157-162
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    • 2003
  • The generation of secretory IgA antibodies(Abs) for specific immune protection of mucosal surfaces depends on stimulation of the mucosal immune system, but this is not effectively achieved by parenteral or even oral administration of most soluble antigens. Thus, to produce a possible vaccine antigen against urinary tract infections, the uropathogenic E. coli (UPEC) adhesin was genetically coupled to the ctxa2b gene and cloned into a pMAL-p2E expression vector. The chimeric construction of pMALfimHIctxa2b was then transformed into E. coli K-12 TB1 and its nucleotide sequence was verified. The chimeric protein was then purified by applying the affinity chromatography. The purified chimeric protein was confirmed by SDS-PAGE and western blotting using antibodies to the maltose binding protein (MBP) or the cholera toxin subunit B (CTXB), plus the N-terminal amino acid sequence was analyzed. The orderly-assembled chimeric protein was confirmed by a modified $G_{M1}$-ganglioside ELISA using antibodies to adhesin. The results indicate that the purified chimeric protein was an Adhesin/CTXA2B protein containing UPEC adhesin and the $G_{M1}$-ganglioside binding activity of CTXB. This study also demonstrate that peroral administration of this chimeric immunogen in mice elicited high level of secretory IgA and serum IgG Abs to the UPEC adhesin. The results suggest that the genetically linked CTXA2B acts as a useful mucosal adjuvant, and that the adhesin/CTXA2B chimeric protein might be a potential antigen for oral immunization against UPEC.

IEEE 802.11e 무선 LAN 시스템에서 서비스 처리율 증대를 위한 패킷 스케줄링 기법 (Packet Scheduling Scheme to Enhance Throughput at IEEE 802.11e WLAN System)

  • 장재신;전형익
    • 한국통신학회논문지
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    • 제31권4A호
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    • pp.412-420
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    • 2006
  • 다양한 형태의 트래픽이 등장하면서 각 트래픽이 요구하는 서비스 품질을 모두 만족시키기 위한 패킷 스케줄링 연구에 대한 중요성이 커지고 있다. IEEE 802.11 위원회에서는 이러한 요구에 부응하기 위해 IEEE 802.11e 규격을 제정하여 모든 트래픽을 4가지로 분류한 뒤 각 트래픽 별로 차등화된 서비스를 제공하고 있다. 그리고 IEEE 802.11a/g규격에서는 물리계층에서의 전송속도를 무선 단말기 당 최대 54 Mbps까지 지원하고 있다. 하지만 무선 채널환경에서는 전체 대역폭이 제한되어 있기 때문에 주어진 대역폭 내에서 전송효율을 최대화시키는 문제는 항상 풀어야 하는 과제이다. 따라서 본 연구에서는 전송오류가 발생하는 무선통신 환경 하에서 동작하는 무선 LAN 단말기가 패킷 전송을 위해 CSMA-CA 기반으로 동작함에 있어서 CW(Contention Window) 값을 현재 무선채널 상태에 따라 달리 설정함으로써 서비스 처리량(Throughput)을 더욱 극대화할 수 있는 패킷 스케줄링 기법을 제안하였다. 제안된 알고리즘을 NS-2 네트워크 시뮬레이터를 이용하여 성능평가를 수행하였고, 수치 결과를 통해 제안한 알고리즘이 기존 IEEE 802.11e의 성능을 더욱 향상시킬 수 있음을 보였다.

IEEE 802.16e WiMAX용 부호율 1/2, 2304-비트 LDPC 복호기 (Code Rate 1/2, 2304-b LDPC Decoder for IEEE 802.16e WiMAX)

  • 김해주;신경욱
    • 한국통신학회논문지
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    • 제36권4A호
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    • pp.414-422
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    • 2011
  • 모바일 WiMAX 표준 IEEE 802.16e의 블록길이 2,304 비트, 부호율 1/2을 지원하는 LDPC(low-density parity-check) 복호기를 설계하였다. 설계된 LDPC 복호기는 최소-합(min-sum) 알고리듬과 layered 복호를 기반으로 $96{\times}96$ 크기의 부행렬을 병렬로 처리하는 부분병렬 구조를 갖는다. 최소-합 알고리듬의 특징을 이용하여 메모리 용량을 감소시킬 수 있는 새로운 방법을 고안하여 적용함으로써 검사노드 메모리 용량을 기존의 방법보다 46% 감소시켰다. Verilog HDL로 설계된 LDPC 복호기를 $0.18{\mu}m$ CMOS 셀 라이브러리로 합성한 결과 174,181개의 게이트와 52,992 비프의 메모리로 구현되었으며, Eb/No=2.1dB의 AWGN 채널에 대해 평균 비트 오율 (BER)는 $4.34{\times}10^{-5}$이고, 100 MHz@1.8-V로 동작하여 약 417 Mbps의 성능을 갖는다.