ATM PON은 국사 내에서 하나의 OLT가 수동 (passive) 광 분기 방식을 통해 가입자 지역의 최대 64 ONU를 제어함으로써, FTTs 형태의 가입자를 하나의 플랫폼에서 경제적으로 수용할 수 있는 장점이 있다. 이 시스템이 동작하기 위해서는 효율적인 MAC 프로토콜이 구현되어야 하는데, ITU-T 0.983.1에서 MAC 분야는 아직 추후 연구 과제로 남아있다. 본 논문은 G.983.1의 ATM PON이 동작하기 위한 MAC 프로토콜에서 ONU가 상향으로 셀을 전송하는데 필요한 승인요청 방법을 제안한다. G.983.1 기반이 아닌 MAC 프로토콜의 장단점을 살펴본 후, 승인요청에 필요한 미니슬롯의 주기와 길이를 계산하고 구현에 적합한 최적 값을 결정한다. 또한, 물리계층 OAM 셀을 코딩하는 방법과 결정된 파라메터들을 할당하는 절차를 제안한다.
5-Hydroxytryptamine (5-HT), a monoamine, as a local regulator in the mammary gland is a chemical signal produced by the mammary epithelium cell. In cows, studies have shown that 5-HT is associated with epithelial cell apoptosis during the degenerative phase of the mammary gland. However, studies in other tissues have shown that 5-HT can effectively promote cell viability. Whether 5-HT could have an effect on mammary cell viability in dairy cows is still unknown. The purpose of this study was to determine: (1) effect of 5-HT on the viability of bovine mammary epithelial cells and its related signaling pathways, (2) interaction between prolactin (PRL) and 5-HT on the cell viability. The bovine mammary alveolar cell-T (MAC-T) were cultured with different concentrations of 5-HT for 12, 24, 48 or 72 hours, and then were assayed using cell counting kit-8, polymerase chain reaction (PCR) and immunobloting. The results suggested that 20 μM 5-HT treatment for 12 or 24 h promote cell viability, which was mainly induced by the activation of 5-HT receptor (5-HTR) 1B and 4, because the increase caused by 5-HT vanished when 5-HTR 1B and 4 was blocked by SB224289 and SB204070. And protein expression of mammalian target of rapamycin (mTOR), eukaryotic translation elongation factor 2 (eEF2), janus kinase 2 (JAK2) and signal transducer and activator of transcription 5 (STAT5) were decreased after blocking 5-HT 1B and 4 receptors. When MAC-T cells were treated with 5-HT and PRL simultaneously for 24 h, both the cell viability and the level of mTOR protein were significantly higher than that cultured with 5-HT or PRL alone. In conclusion, our study suggested that 5-HT promotes the viability of MAC-T cells by 5-HTR 1B and/or 4. Furthermore, there is a reciprocal relationship between PRL and 5-HT.
Seung-Woo, Jeon;Jay Ronel V., Conejos;Jae-Sung, Lee;Sang-Hoon, Keum;Hong-Gu, Lee
Journal of Animal Science and Technology
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제64권3호
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pp.481-499
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2022
This study aims to determine the effects of D-methionine (D-Met) isomer and the methionine precursor 2-hydroxy-4-methylthiobutanoic acid i (HMBi) supplementation on milk protein synthesis on immortalized bovine mammary epithelial cell (MAC-T). MAC-T cells were seeded using 10-cm dishes and cultured in Dulbecco's modified Eagle's medium/F12 (DMEM/F12) basic medium. The basic medium of DMEM/F12 was replaced with the lactogenic DMEM/ F12 differentiation medium when 90% of MAC-T cells reached confluency. The best dosage at 0.6 mM of D-Met and HMBi and incubation time at 72 h were used uniformly for all treatments. Each treatment was replicated six times wherein treatments were randomly assigned in a 6-well plate. Cell, medium, and total protein were determined using a bicinchoninic acid protein assay kit. Genes, proteomics and metabolomics analyses were also done to determine the mechanism of the milk protein synthesis pathway. Data were analyzed by two-way analysis of variance (ANOVA) with supplement type and plate as fixed effects. The least significant difference test was used to evaluate the differences among treatments. The HMBi treatment group had the highest beta-casein and S6 kinase beta-1 (S6K1) mRNA gene expression levels. HMBi and D-Met treatments have higher gene expressions compared to the control group. In terms of medium protein content, HMBi had a higher medium protein quantity than the control although not significantly different from the D-Met group. HMBi supplementation stimulated the production of eukaryotic translation initiation factor 3 subunit protein essential for protein translation initiation resulting in higher medium protein synthesis in the HMBi group than in the control group. The protein pathway analysis results showed that the D-Met group stimulated fructose-galactose metabolism, glycolysis pathway, phosphoinositide 3 kinase, and pyruvate metabolism. The HMBi group stimulated the pentose phosphate and glycolysis pathways. Metabolite analysis revealed that the D-Met treatment group increased seven metabolites and decreased uridine monophosphate (UMP) production. HMBi supplementation increased the production of three metabolites and decreased UMP and N-acetyl-L-glutamate production. Taken together, D-Met and HMBi supplementation are effective in stimulating milk protein synthesis in MAC-T cells by genes, proteins, and metabolites stimulation linked to milk protein synthesis.
Kang, Sukyung;Lee, Jae Sung;Lee, Hai Chon;Petriello, Michael C.;Kim, Bae Yong;Do, Jeong Tae;Lim, Dae-Seog;Lee, Hong Gu;Han, Sung Gu
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권3호
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pp.579-587
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2016
Mastitis is a prevalent inflammatory disease that remains one of the main causes of poor quality of milk. Phytoncides are naturally occurring anti-inflammatory compounds derived from plants and trees. To determine if treatment with phytoncide could decrease the severity of lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory responses, mammary alveolar epithelial cells (MAC-T) were pretreated with phytoncide (0.02% and 0.04% (v/v)) followed by LPS treatment (1 and 25 μg/ml). The results demonstrated that phytoncide downregulated LPS-induced pro-inflammatory cyclooxygenase-2 (COX-2) expression. Additionally, LPS-induced activation of ERK1/2, p38, and Akt was attenuated by phytoncide. Treatment of cells with known pharmacological inhibitors of ERK1/2 (PD98059), p38 (SB203580), and Akt (LY294002) confirmed the association of these signaling pathways with the observed alterations in COX-2 expression. Moreover, phytoncide attenuated LPS-induced NF-κB activation and superoxide production, and, finally, treatment with phytoncide increased Nrf2 activation. Results suggest that phytoncide can decrease LPS-induced inflammation in MAC-T cells.
Kim, Seung-Yeon;Kim, Ga-Yeon;You, Hyeong-Ju;Kang, Man-Jong
Animal Bioscience
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제35권1호
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pp.126-137
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2022
Objective: Efficient gene editing technology is critical for successful knock-in in domestic animals. RAD51 recombinase (RAD51) gene plays an important role in strand invasion during homologous recombination (HR) in mammals, and is regulated by checkpoint kinase 1 (CHK1) and CHK2 genes, which are upstream elements of RAD51 recombinase (RAD51). In addition, mismatch repair (MMR) system is inextricably linked to HR-related pathways and regulates HR via heteroduplex rejection. Thus, the aim of this study was to investigate whether clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated 9 (CRISPR/Cas9)-mediated knock-in efficiency of human lactoferrin (hLF) knock-in vector in the bovine β-casein gene locus can be increased by suppressing DNA MMR-related genes (MSH2, MSH3, MSH6, MLH1, and PMS2) and overexpressing DNA double-strand break (DSB) repair-related genes (RAD51, CHK1, CHK2). Methods: Bovine mammary epithelial (MAC-T) cells were transfected with a knock-in vector, RAD51, CHK1, or CHK2 overexpression vector and CRISPR/sgRNA expression vector to target the bovine β-casein gene locus, followed by treatment of the cells with CdCl2 for 24 hours. After 3 days of CdCl2 treatment, the knock-in efficiency was confirmed by polymerase chain reaction (PCR). The mRNA expression levels of DNA MMR-related and DNA DSB repair-related genes were assessed by quantitative real-time PCR (RT-qPCR). Results: Treatment with CdCl2 decreased the mRNA expression of RAD51 and MMRrelated genes but did not increase the knock-in efficiency in MAC-T cells. Also, the overexpression of DNA DSB repair-related genes in MAC-T cells did not significantly affect the mRNA expression of MMR-related genes and failed to increase the knock-in efficiency. Conclusion: Treatment with CdCl2 inhibited the mRNA levels of RAD51 and DNA MMR-related genes in MAC-T cells. However, the function of MMR pathway in relation to HR may differ in various cell types or species.
Oligomeric proanthocyanidins (OPCs), classified as condensed tannins, have significant antioxidation, anti-inflammation and anti-cancer effects. This study was performed to investigate the anti-inflammatory effects of OPCs and the mechanism underlying these effects in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated bovine mammary epithelial cells (MAC-T). Real-time PCR and ELISA assays indicated that OPC treatment at 1, 3 and 5 ㎍/ml significantly reduced the mRNA and protein, respectively, of oxidant indicators cyclooxygenase-2 (COX-2) (p < 0.05) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) (p < 0.01) as well as inflammation cytokines interleukin (IL)-6 (p < 0.01), IL-1β (p < 0.01) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) (p < 0.05) in LPS-induced MAC-T cells. Moreover, OPCs downregulated LPS-induced phosphorylation of p65 and inhibitor of nuclear factor kappa B (NF-κB) (IκB) in the NF-κB signaling pathway (p < 0.01), and they inhibited p65 translocation from the cytoplasm to the nucleus as revealed by immunofluorescence test and western blot. Additionally, OPCs decreased phosphorylation of p38, extracellular signal regulated kinase and c-jun NH2-terminal kinase in the MAPK signaling pathway (p < 0.01). In conclusion, the anti-inflammatory and antioxidant activities of OPCs involve NF-κB and MAPK signaling pathways, thus inhibiting expression of pro-inflammatory factors and oxidation indicators. These findings provide novel experimental evidence for the further practical application of OPCs in prevention and treatment of bovine mastitis.
In fascioliasis, T-helper 2 (Th2) responses predominate, while little is known regarding early immune phenomenon. We herein analyzed early immunophenotype changes of BALB/c, C57BL/6, and C3H/He mice experimentally infected with 5 Fasciola hepatica metacercariae. A remarkable expansion of $CD19^+$ B cells was observed as early as week 1 post-infection while $CD4^+/CD8^+$ T cells were down-regulated. Accumulation of $Mac1^+$ cells with time after infection correlated well with splenomegaly of all mice strains tested. The expression of tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ mRNA in splenocytes significantly decreased while that of IL-4 up-regulated. IL-$1{\beta}$ expression was down-modulated in BALB/c and C57BL/6 mice, but not in C3H/He. Serum levels of transforming growth factor (TGF)-${\beta}$ were considerably elevated in all mice during 3 weeks of infection period. These collective results suggest that experimental murine fascioliasis might derive immune suppression with elevated levels of TGF-${\beta}$ and IL-4 during the early stages of infection.
무선 센서네트워크 환경에서 발생하는 다양한 정보는 각 노드들에 의해 수집되어 분석된 후 정보를 필요로 하는 원거리의 노드에게 보내어진다. 정보 교환을 통해 소모되는 전력량을 감안하여 최소한의 전력을 유지하지 못하면 노드와 네트워크 수명이 단축되고 협력 행동을 완수하지 못한다. 네트워크 수명을 최대화하기 위해 각 노드들이 태양전지를 이용해 전력을 공급받아 유지하는 연구가 진행되어왔다. 그에따라 전력을 고려한 적합한 전지가 모델화되어야 한다. 본 논문에서는 무선 센서네트워크 환경에서 전력 충전, 방전을 고려하여 적합한 태양전지 모델을 제시한다.
본 논문은 기존의 이더넷 인터페이스를 통하여 ATM 셀을 전송하는 CIF(Cells in Frames)에서 네트워크 성능을 향상시키기 위한 충돌 회피(collision avoidance) 방안과 실시간 ATM 응용을 지원하기 위한 우선 제어 방안을 제안한다. 제안된 방안은 전형적인 CIF 네트워크인 두개 노드를 가진 이더넷에 적합하며, 기존 이더넷 인터페이스 카드에 대한 어떠한 하드웨어적인 수정을 필요로 하지 않는다. 충돌 회피 방안은 CIF 각 요소에 서로 다른 프레임간 간격(inter-frame gap)을 할당함으로써 출동을 최소화하면서 그 노드들로 공평한 액세스 기회를 제공한다. 우선 제어 방안은 두 노드간 큐잉 상태 정보를 교환하므로 써 매체로 실시간 프레임을 우선적으로 전송하는 것을 보장해준다. 그러므로 본 논문에서는 MAC 계층의 충돌 회피 방안과 CIF 계층의 우선 제어 방안을 모두 갖춘 CIF 네트워크가 향상된 네트워크 성능을 가지며 실 시간 ATM 응용을 효율적으로 지원한다는 것을 보여준다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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