Elaeagnus umbellata leaves have been reported to suppress inflammation, allergic responses, lung cancer proliferation and oral bacterial growth. Cadmium (Cd) is a heavy metal that has been found to cause many toxicities, including liver toxicity. The aim of this study was to evaluate the capacity of 70% ethanol extract of E. umbellata leaves (EUL) to protect human hepatocytes from Cd toxicity. After exposure of HepG2 cells to Cd at 10 𝜇M for 24 h, cell viability, expression levels of apoptosis- and antioxidant-related proteins, reactive oxygen species (ROS) accumulation and Cd uptake were assessed. EUL protected HepG2 cells from Cd-induced apoptosis as determined by MTT assay. A decrease in caspase-3 and p-p53 protein levels was observed in cells pretreated with EUL prior to Cd exposure. Furthermore, the Cd-induced increase in intracellular DCF fluorescence was attenuated by EUL, indicating that the Cd-induced apoptosis preventing effect was associated with the suppression of ROS accumulation. Moreover, EUL's effects on the inhibition of p38, JNK, and AKT phosphorylation also appear to be associated with protection against Cd toxicity. Moreover, EUL upregulated Cd-depressed expression of Nrf2, HO-1, catalase, and MT-1,2 proteins, suggesting that Cd uptake-induced apoptosis in HepG2 cells may be inhibited by EUL's antioxidative potential.
Background: Overexpression of survivin, a known inhibitor of apoptosis, is associated with tumor progression and drug resistance in numerous malignancies, including leukemias. The aim of this study was to investigate the effect of a specific survivin small interference RNA (siRNA) on proliferation and the sensitivity of HL-60 acute myeloid leukemia (AML) cells to the chemotherapeutic drug etoposide. Materials and Methods: The cells were transfected with siRNAs using Lipofectamine $^{TM}2000$ transfection reagent. Relative survivin mRNA and protein levels were measured by quantitative real-time PCR and Western blotting, respectively. Trypan blue exclusion assays were performed to monitor tumor cell proliferation after siRNA transfection. The cytotoxic effects of etoposide and survivin siRNA, alone and in combination, on leukemic cells were determined using MTT assay. Apoptosis was assessed by ELISA cell death assay. Results: Survivin siRNA markedly reduced both mRNA and protein expression levels in a time-dependent manner, leading to distinct inhibition of cell proliferation and increased spontaneous apoptosis. Surprisingly, survivin siRNA synergistically increased the cell toxic effects of etoposide. Moreover, survivin down-regulation significantly enhanced its induction of apoptosis. Conclusions: Our study suggests that down-regulation of survivin by siRNA can trigger apoptosis and overcome drug resistance of leukemia cells. Therefore, survivin siRNA may be an effective adjuvant in AML chemotherapy.
연구 방법 : Nonsteroidal anti -inflammatory drugs (NSAIDs)는 대장앙의 항암 예방약제로 사용되고 었다 지속적으로 NSAIDs를 복용하면 대장암에 걸릴 위험도가 40-50% 감소되는 것으로 알려져 있다. NSAIDs가 대장암에서 종양의 크기를 감소시키는 것에 대한 정확한 기전은 알려져 있지 않으나, 일부 연구자들은 NSAIDs를 고농도로 투여하였을 때 세포 주기를 조절하는 유전자 발현의 변형과 세포고사의 유도로 설명하고 있다. 그러나 폐암에서 NSAIDs의 암 예방효과에 대해 확립 된 바 없어, 저자들은 NCI-H1299 세포주에서 NSAIDs가 세포고사를 유도하는지 알아보고자 하였다. 방 법 : 세포 독성은 MTT 방법으로 측정하였고, 세포고사를 알아보기 위해 유세포 분석과 핵산 염색을 시행하였다. 세포고사의 기전을 알아보기 위해 caspase family의 활성을 측정하였고, 세포고사의 마지막 단계인 PARP와 ICAD의 분절을 westem blot으로 확인하였다. 결 과 : NCI-H1299 세포에서 NaSaL 처리 시 생존율이 농도와 시간에 의존적으로 유의하게 감소하였고, 생존율의 감소는 세포주기에서 $subG_0/G_1$의 증가와 핵산 염색시 핵의 분절의 관찰로서 세포고사가 일어남을 관찰하였다. 10 mM NaSaL 처리 후 caspase-3 protease의 활성은 24시간에 증가하여 30시간에 최고에 이르고 감소하였으나 caspase-6, 8, 9 proteases의 활성은 의미 있는 증가가 없었다. PARP와 ICAD의 분절은 농도와 시간 의존적으로 증가하였다. 결 론 : NCI-H1299 폐암 세포주에서 NaSaL은 caspase-3 protease의 활성을 통하여 유도되었다.
본 실험에서는 꽃송이버섯 (Sparassis crispa, formerly S. crispa) 에탄올 추출물의 소수성 분획을 분리하고 각 분획의 DPPH 항산화 활성과 위암 (AGS), 폐암 (A529), 간암 (HepG2) 세포주를 이용한 항암 활성을 MTT assay를 통해 확인 하였다. SOCC를 사용하여 총 18개의 fraction으로 분획하였고 TLC와 세포주를 이용한 항암 활성 확인을 통하여 5개의 fraction으로 압축하였다. 항암활성이 높은 5개의 fraction은 HPLC-MS를 통해 각 분획물을 분석한 결과 항산화 활성을 보이지 않았으며 약 181.0의 분자량을 가진 물질이 지표물질로 확인되었으므로 이 물질의 화학식 동정을 위하여 추가실험이 필요하다. 세포주를 이용한 항암실험 결과 꽃송이버섯 추출물은 위암 (AGS), 폐암 (A529), 간암 (HepG2) 세포주 모두에서 양성대조군인 paclitaxel보다 낮은 세포 생존율을 보여 주었으며($IC_{50}$ value), 이것은 추후 꽃송이버섯 추출물에 포함된 항암 물질 분리 연구를 위한 기초연구 결과로서 무척 의미가 크다고 할 수 있다.
연구배경: TGF-$\alpha$는 세포증식을 자극하는 기능을 갖는 순기능 조절인자들 중 하나이며 autocrine 또는 paracrine기전에 의하여 그성장을 조절하며, 발암과정 및 종양세포의 성장에 중요한 역할을 한다. 반면 TGF-$\beta$는 세포의 증식을 억제하는 역기능 성장인자로 작용하며, G1기에서 S기로의 이행을 억제하여 성장의 정지에 관여하는 것으로 보고되고 있다. 방법: 저자들은 10예의 정상대조군 및 소세포암종 및 비소세포암종을 포함한 인체 폐암종 총 47예에서 TGF-$\alpha$와 TGF-$\beta$의 발현상태를 알고자 이들의 항체를 이용한 면역조직화학적 염색을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 결과 TGF-$\alpha$는 정상 대조군 10예중 2예(20%)의 기관지 상피에서, 인체 폐암종 47예중 35예(74.5%)의 암세포질에서 산발적으로 발현이 되었다. TGF-$\beta$는 정상대조군 10예중 8예의 기관지 상피에서, 인체 폐암종 47예중 8예(17.0%)의 암세포질에서 산발적인 발현을 보였다. 결론: 이와 같은 성적은 인체 폐암종에 있어서 TGF-$\alpha$의 발현과다는 autocrine loop에 의한 수용체를 통하여 그 성장을 자극함으로써 폐암종의 발생 및 성장에 중요한 인자로 관여 한 것으로 생각되며, TGF-$\beta$의 발현감소는 세포성장의 역조절 기능의 억제로 인해 폐암종의 발생과 성장을 조장하는 것으로 생각된다.
본 연구는 모시잎의 건조방법에 따른 항산화 및 암세포 증식억제효과를 비교 분석하였다. 80% 에탄올로 추출한 열풍건조 및 동결건조 모시잎의 총 폴리페놀 함량은 건조방법에 따른 유의적 차이를 보이지 않았다. 반면 총 플라보노이드 함량은 열풍건조 모시잎이 동결건조 모시잎에 비하여 유의하게 높게 나타났다. 1,000 ppm에서 열풍건조 및 동결건조 모시잎의 DPPH 라디칼 소거능은 각각 77.74%와 77.29%의 비슷한 라디칼 소거능을 보였으며, Rancimat으로 측정한 열풍건조 및 동결건조 모시잎의 항산화지수는 각각 1.38과 1.32로 BHT, BHA 및 비타민 C에 비해서는 낮았으나 시료를 미첨가한 음성대조군보다는 높은 항산화력을 보였다. 위암(AGS), 간암(Hep G2) 및 폐암(A549) 세포에 대한 모시잎 에탄올 추출물의 암세포 증식 억제효과를 알아본 결과, 열풍건조 및 동결건조 모시잎 에탄올 추출물의 농도가 증가할수록 암세포의 증식 억제 활성은 농도 의존적으로 증가되었다. 건조방법에 따른 항암활성은 비슷한 경향이었으며 가장 높은 농도인 $800{\mu}g/mL$에서 80% 이상의 간암 및 폐암세포의 증식 억제 활성을 보였고, 위암세포에서는 75%이상의 증식 억제 활성을 보였다. 이상의 결과 열풍건조 및 동결건조 모시잎 에탄올 추출물은 in vitro에서 항산화효과와 암세포의 증식 억제효과를 보였고, 건조방법에 따른 모시잎 에탄올 추출물의 항산화 활성 및 암세포 증식 억제 활성은 비슷한 경향으로 나타났다.
Objective: To observe the effects of metastasis-associated tumor gene family 2 (MTA2) depletion on human breast cancer cell proliferation and metastasis. Methods: A short-hairpin RNA targeting MTA2 was chemically synthesized and transfected into a lentivirus to construct Lv-shMTA2 for infection into the MDA-MB231 human breast cancer cell line. At 48 hours after infection cells were harvested and mRNA and protein levels of MTA2 were determined by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) and Western blotting, respectively. Cell viability and metastasis were assessed by CCK-8, wound-healing assay and Transwell assay, respectively. In addition, a xenograft model of human breast cancer was constructed to investigate cancerous cell growth and capacity for metastasis. Results: After infection with Lv-shMTA2, mRNA and protein levels of MTA2 was significantly reduced (p<0.05) and MDA-MB231 cell proliferation and metastasis were inhibited (p<0.05). In addition, mean tumor size was smaller than that in control group nude mice (p<0.05) and numbers of metastatic deposits in lung were lower than in control group mice (p<0.05). Depletion of MTA2 affected MMP-2 and apoptosis-related protein expression. Conclusions: For the first time to our knowledge we showed that MTA2 depletion could significantly inhibit human breast cancer cell growth and metastasis, implying that MTA2 might be involved in the progression of breast cancer. The role of MTA2 in breast cancer growth and metastasis might be linked with regulation of matrix metalloproteinase and apoptosis.
Methanol extracts of 94 Korean plants were screened for angiogenesis inhibitors using the tube-like formation assay of HUVEC (Human Umbilical Vein Endothelial Cell) and evaluated for growth inhibitory activity on A549 cells, human lung cancer cells. Extracts of Euphorbia sieboldiana, Adonis amurensis, and Anthriscus sylvestris showed antiangiogenic and growth inhibitory activity at $50\;{mu}g/ml$. Aristolochia manshuriens and Styrax obassia expressed antiangiogenic activity without growth inhibitory action.
Celastrus orbiculatus has been widely used as a traditional medicine for the treatment of many diseases including rheumatoid arthritis and odontalgia. In the present study, anti-metastatic activity of a methanolic extract from C. orbiculatus (MCO) was studied. A gelatin zymographic assay revealed that MCO has potent inhibitory effects on MMP-2 and MMP-9 activities in B16F10 melanoma cells. Moreover, MCO attenuated MMP expression via down-regulation of NF-${\kappa}$B translocation to the nucleus. Melanoma cell migration and invasion were also down-regulated by MCO. In addition, MCO significantly suppressed lung metastasis in an in vivo model. These results strongly suggest that MCO may possibly be used as a valuable anti-metastatic agent for cancer treatment.
This study was aimed to find out the comparative effects between non-irradiated, and 5kGy-10kGy of gamma-irradiated Panax Ginseng Radix powder on the genotoxicity for identification of possibility of DNA damage causing cancer. Four different short-term mutagenicity tests were used: (1) Salmonella typhimurium reversion assay (Ames test) (2) Chromosome aberration test in cultured Chinese hamster lung (CHL) fibroblast cells. (3) Micronucleus test in ddY mouse (4) Somatic mutation and recombination test in the wing cells of Drosophila melanogaster.Gamma-irradiated Panax Ginseng Radix powder revealed negative results in these four mutagenicity tests. This means gamma-irradiated ginseng could be safe on the genotoxic point of view.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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