Urea는 혈액의 hemoglobin을 변성시켜 효소 활성 자리를 노출시킴으로써 혈액-luminol 반응의 화학발광 세기를 향상시킨다는 가설을 검증하고자 하였다. 이를 위해 혈액을 urea로 전처리한 경우 urea의 농도가 더 높아지거나 전처리 시간이 늘어날수록 혈액-luminol 반응의 화학발광 세기가 증가하였고 이는 기존의 가설과 부합되는 결과였다. 하지만 8 M urea용액을 미리 혼합하여 제조한 luminol로 혈액을 처리하면 혈액을 urea로 미리 전처리한 경우에 비해 urea가 hemoglobin을 변성시키는 시간이 짧아짐에도 화학발광 세기가 오히려 증가하는 현상이 나타났다. 또한 hemoglobin이 없는 전이금속을 urea가 포함된 luminol과 반응시켰을 때 화학발광이 강해지는 현상이 관찰되었다. 이러한 점으로 미루어 볼 때 urea는 hemoglobin을 변성시킬 뿐만 아니라 luminol-hydrogen peroxide 반응에도 관여하는 것으로 예상된다.
Luminol 혹은 Bluestar가 혈액 및 표백제와 반응할 때 ethylenediamine (EDA)이 미치는 영향에 대해 연구하였다. 이를 위해 거름종이에 혈액, 염소계 표백제, 산소계 표백제를 묻힌 후 EDA를 첨가한 luminol 혹은 Bluestar로 처리한 후 화학발광의 세기 변화를 관찰하였다. 그 결과 EDA의 농도를 증가시켜도 luminol (혹은 Bluestar)-혈액 반응의 화학발광 세기는 변하지 않는다는 것을 알 수 있었다. 그러나 EDA의 농도가 증가할수록 luminol (혹은 Bluestar)-염소계 표백제 반응의 화학발광 세기는 감소하였고, luminol (혹은 Bluestar)-산소계 표백제 반응의 화학발광 세기는 증가하는 현상이 관찰되었다. 이를 통해 luminol (혹은 Bluestar)로 혈액 검출 시약을 제조할 때 EDA를 첨가할 경우, EDA는 염소계 표백제에 의해 유발되는 위양성 반응을 억제하고 산소계 표백제의 위양성 반응을 유발한다는 것을 알 수 있었다. 이런 점을 종합해서 판단할때 luminol이나 Bluestar로 혈액을증강할 때 EDA를 첨가하는것은 적절하지 않다.
본 논문에서는 실리콘을 기초로 한 포토다이오드를 제작하여 현재 바이오센서에서 이용되고 있는 luminol 화학 발광을 전기적으로 검출하였다. 우선, 실리콘 웨이퍼에 이온주입을 통해 p-n 접합을 형성하고 Al 전극을 형성시켜 포토다이오드를 제작하였다. PDMS을 passivation 막으로 사용하여 horseradish peroxidase(HRP) 농도 변화에 따른 발광의 최적조건과 luminol, HRP가 섞인 용액에 서로 다른 양의 과산화수소를 넣어 발광이 최대로 발생하는 혼합비를 측정하였다. 최종적으로 2mM luminol, 25U HRP 조건 하에서 과산화수소 농도에 따른 화학 발광을 측정하였으며, $10{\mu}M$부터 $500{\mu}M$ 범위의 과산화수소 농도 변화에 따른 포토다이오드의 감도는 단위 면적당 23.429pA/ ${\mu}M$이다.
사건 현장에 남겨진 혈흔을 찾는 것은 사건을 재구성하거나 해결하기 위해서 매우 중요하다. 사건현장에서 사용할 수 있는 수많은 시약들이 개발되었지만, 루미놀이 가장 대표적인 시약이라고 할 수 있다. 최근에는 블루스타라는 시약이 주로 사용되고 있지만, 가격이 비싸고 시약을 제조한 후 보관이 불가능하다는 단점이 있다. 본 연구에서는 블루스타 수준의 발광강도를 유지하면서 제조 후 장시간 보관할 수 있는 새로운 루미놀 시약을 개발하고자 했다. 루미놀은 알칼리 수용액에서 잘 녹기 때문에, 시약을 제조할 때 수산화나트륨의 사용은 과산화수소의 분해를 촉진시킬 수 있다. 루미놀 시약을 제조할 때 과산화수소 안정화제로 황산마그네슘, 규산나트륨, 삼인산칼륨을 농도별로 첨가한 후, 혈흔과 반응할 때 시약의 발광강도 및 보관기간에 미치는 영향을 확인했다. 과산화수소 안정화제 첨가는 발광강도에 별다른 영향을 주지 않았고, 보관 중 루미놀 시약의 pH를 일정하게 유지시켜 줌으로서 시약의 보관기간을 크게 늘려줬다. 과산화수소 안정화제로 황산마그네슘이 가장 적절하였다. 과산화수소 대신 과붕산나트륨을 산화제로 사용했을 경우, 희석 혈흔에 대한 민감도와 발광강도에 큰 변화는 없었지만 제조 후 보관기간이 단축되었다. 그렇지만, 혈흔과 반응한 후 혼합액의 pH 상승 폭이 과산화수소로 제조한 시약보다 줄어들었다.
We constructed and tested an airborne peroxyacetyl nitrate (PAN) monitoring system based on luminol chemiluminescence detection with fast gas chromatography. This system allowed for simultaneous measurement of PAN and nitrogen dioxide ($NO_2$) with a time resolution of <2 min. Actual sample masses within the fixed volume sample loop at various altitudes and temperatures were adjusted to standard atmosphere, using measured pressures and temperatures. The airborne PAN measurement system was evaluated during two field studies above the southern Korean Peninsula in August and October 2009. The detection limit based on the ISO approach was 0.035 ppbv PAN, well below the observed concentrations of 0.185-1.49 ppbv during these studies. Under these conditions, the PAN mixing ratios were positively correlated with $O_x$ ($O_x=O_3+NO_2$), with slopes varying between 0.014 and 0.033 and intercepts between 22.6 and 55.1 ppbv $O_x$. The intercepts corresponded roughly to background $O_x$ mixing ratios in central Europe; however, the slopes were above the range of slopes reported in other studies. We also enhanced the durability, safety, and ease of maintenance of the PAN monitoring system by redesigning the structure of the conventional luminol cell.
본 연구는 분변 잠혈 검출 키트 (one-step FOB(Fecal Occult Blood) kit)가 법생물학적으로 매우 중요한 혈흔 검출 및 사람 혈흔 판정에 적용 가능한지 알아보고자 하였다. 먼저 FOB 키트의 민감도를 결정하고 기존의 혈흔 검사법인 LMG 검사와 비교한 결과 1,000,000배 희석된 혈액까지도 검출 되었는데 이는 LMG 검사에 비해 약100배 정도 예민한 것이었다. 다른 동물 혈액에 대한 교차 반응 여부를 실험한 결과 FOB 키트는 사람의 혈액과만 반응하여 높은 특이성을 보여주었다. 또한 혈액의 보관 온도 및 경과 시간의 영향, 고온 처리의 영향을 알아보았으며, LMG 및 Luminol 시약의 영향에 대해서도 실험하였다. 사람 혈액 특이 항원은 매우 높은 안정성을 보여주었으며, 전통적인 혈흔 검사 시약인 LMG 및 Luminol에 대해서도 영향을 받지 않았다. 따라서 FOB 키트는 LMG 검사 및 Luminol 검사와 병행하여 사용하면 보다 신속하고 정확하게 사람 혈흔 여부를 판정할 수 있어 법과학 실험실에서는 물론 사건 현장에서의 혈흔 검사에 크게 기여할 수 있을 것으로 사료된다.
루미놀 화학발광 시스템(luminol-$H_2O_2$)을 이용하여 수용액 중의 수은(II) 이온을 선택적으로 정량분석 하였다. 루미놀과 과산화수소의 반응에서 촉매작용을 하는 구리(II), 철(III), 크롬(III) 이온 등 다양한 금속이온의 농도를 정량분석한 연구결과가 보고되어 있다. 본 연구에서는 수은(II) 이온이 루미놀과 과산화수소의 반응에서 다른 금속이온과 같이 촉매작용을 하는 것을 관찰하였으며, 수용액 중 수은(II) 이온의 정량분석 조건을 최적화하기 위하여 반응시간, pH등에 따른 영향을 조사하였다. 또한 수은이온이 갖는 1가와 2가 산화수 중에서 수은(I) 이온은 루미놀과 과산화수소의 반응에 있어서 촉매작용을 하지 않았을 뿐만 아니라 반응에 어떠한 영향도 미치지 않았다. 또한 수은(I)과 수은(II) 이온이 공존하는 수용액 중의 수은(II) 이온의 분석과정에서 수은(I) 이온의 방해 효과는 관찰되지 않았다. 이를 바탕으로 하여 루미놀 화학발광 시스템을 이용하여 수용액 중의 수은(II) 이온만 선택적으로 분석하는 것이 가능하다는 결과와 함께 화학발광분석법과 ICP분석법으로부터 얻은 실험결과를 비교하여 수용액 내에 존재하는 수은 이온의 산화수별 농도를 확인할 수 있다. 루미놀 화학발광 시스템의 최적 분석조건 하에서, 수용액 중의 선택적 수은(II) 이온의 정량분석을 위해 얻은 검정곡선에서 직선성이 성립하는 농도범위는 $1.25{\times}10^{-5}{\sim}2.50{\times}10^{-3}M$이며, 이때 상관계수는 0.991이고, 검출한계는 $1.25{\times}10^{-7}M$이었다.
PAN (Peroxyacetyl Nitrate)은 오존과 함께 대도시 광화학오염의 주요 원인물질로 알려져 있고 대기 중 NOx와 VOCs가 PAN의 생성에 복잡한 반응 경로를 통해 영향을 줄 뿐 만 아니라 원거리 이동을 통하여 비교적 청정지역에 주요한 NOx 공급원으로 알려져 있다. 하지만 PAN은 대기 중 농도가 작고 비교적 낮은 온도에서도 쉽게 열분해 되기 때문에 관측이 어려운 물질이다. (중략)
PAN은 1950년 중반 스모그 챔버연구원에서 'Compound X'라고 규정된 광화학 2차 오염물질로 강한 햇빛, NMHCs과 NOx의 존재하에서 이들 반응에 의해 형성된 물질이다 (Stephen, 1969) PAN은 눈을 자극하고, 식물에 대해 독성을 나타내며, 변이성과 발암을 유발할 가능성도 가지고 있다. 또한 PAN은 열적으로 불안정하여 상온에서 쉽게 NO2와 Peroxyaceyl radical로 분해 되며, 저온에서는 안정되게 존재하여 특히 상층 대류권을 통한NO2의 장거리 수송과 NO2의 reservoir역할을 한다. (중략)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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