Myostatin (MSTN)은 TGF (transforming growth factor)-beta family에 속하며, 골격근 성장의 억제 조절인자로서 여러 포유류에서 MSTN 유전자 돌연변이는 골격근 증가를 유도한다. MSTN prodomain은 MSTN의 생물학적 활성을 저해하는데, MSTN prodomain이 과 발현된 쥐에서 과도한 근육축적이 확인되었다. 로티퍼(rotifer; Brachionus rotundiformis)는 치어기 어류의 양식산업에 있어 주요한 일차적 먹이생물이다. 그러나 로티퍼에서 MSTN 및 MSTN prodomain의 기능과 발현 유무는 알려져 있지 않다. 따라서 본 연구는 재조합 MSTN prodomains이로티퍼에 미치는 영향에 관하여 조사하고자 하였다. 로티퍼 개체배양 실험을 통하여 재조합 MSTN prodomains(pMALc2x-poMSTNpro, pAMLc2x-sMSTNpro)에 의한 로티퍼의 생식 전 단계, 순 생식단계, 생식 후 단계, 산란, 수명, 포란, 수컷 발생률을 확인하였으며, 또한 pMALc2x-poMSTNpro와 pAMLc2x-sMSTNpro이 밀집배양에서 로티퍼의 개체성장에 영향을 미치는지에 대하여 확인하였다. 그 결과 농도가 1, 2, 4 ${\mu}g/ml$에서 pMALc2x-poMSTNpro를 처리한 실험군과 0.25 ${\mu}g/ml$에서 4 ${\mu}g/ml$ 농도까지 pMALc2x-sMSTNpro를 처리한 실험군에서 로티퍼의 생식 전 단계가 아무처리하지 않은 대조군에 비하여 짧아졌다. 밀집배양 실험에 있어 pMALc2x-poMSTNpro와 pMALc2x-sMSTNpro 모두 로티퍼의 개체 수를 증가를 유도하여, 재조합 MSTN prodomains에 의해서 로티퍼의 reprodution에 영향을 주는 것으로 나타났다. 하지만, 재조합 MSTN prodomains이 어떠한 수용체를 이용하여 신호를 전달하는지에 대한 연구는 앞으로 더 진행되어야 하며, 본 연구의 결과는 재조합 MSTN prodomains이 미세조류에서의 기능 및 메커니즘연구에 중요한 기초자료가 될 것으로 사료된다.
In this study, the production of transgenic goats using sperm to integrate exogenous DNA and artificial insemination (AI) was carried out and the technical protocols for sperm-mediated gene transfer (SMGT) in the goat were optimized. The standard sperm parameters and the ability to bind foreign genes were assessed to select suitable sperm donor bucks. A total of 134 oestrous does were divided into 4 groups and inseminated using different methods and sperm numbers. The does of Groups I to III were inseminated with fresh semen ($1-2\times10^{7}$ and $10^{6}$ sperm) or frozen-thawed semen ($10^{6}$ sperm), respectively, through conventional intra-cervical AI, and the does of Group IV with frozen-thawed semen ($10^{6}$ sperm) through intrauterine AI. Total genomic DNAs were extracted from ear biopsies of the offspring. The presence of $pEGFP-N_{1}$ DNA was screened by PCR and then by Southern blotting analysis. A total of 76 live kids were produced and 8 kids were tested transgene positive on the basis of agarose gel electrophoresis of the PCR-amplified fragment. Southern blotting analysis of the samples showed 5 positive kids. A transgenic ratio of 10.53% was detected using PCR and 6.58% using Southern blotting. The positive kid rate assayed by PCR and Southern blotting of frozen-thawed goat semen was 3.61% and 9.27% higher than that of untreated semen. The results show that transgenic goats can be produced efficiently by the method of artificial insemination using sperm cells to integrate the exogenous DNA and intrauterine insemination allowed low numbers of DNA-transfected spermatozoa to be used, with satisfactory fertility.
Somatic cell nuclear transfer in cattle has limited efficiency in terms of production of live offspring due to high incidence of fetal failure after embryo transfer to recipients. Such low efficiency of cloning could possibly arise from abnormal and poorly developed placenta. In the present study the placental proteome in late pregnancy established from in vitro fertilization (IVF) and nuclear transfer (NT) was analysed. Proteome alternation was tested using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2-DE) and matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI- TOF). Comparing placenta from NT embryos to those from IVF counterparts, significant changes in expression level were found in 18 proteins. Of these proteins 12 were not expressed in NT placenta but expressed in IVF counterpart, whereas the expression of the other 6 proteins was limited only in NT placenta. Among these proteins, cytokeratin 8 and vimentin are considered to be involved in regulation of post-implantation development. In particular, cytokeratin 8 and vimentin may be used as makers for placental development during pregnancy because their expression levels changed considerably in NT placental tissue compared with its IVF counterpart. Data from 2-DE suggest that protein expression was disorientated in late pregnancy from NT, but this distortion was eliminated with progression of pregnancy. These findings demonstrate abnormal placental development during late pregnancy from NT and suggest that alterations of specific placental protein expression may be involved in abnormal function of placenta.
Ortega-Jimenez, E.;Alexandre, G.;Arquet, R.;Coppry, O.;Mahieu, M.;Xande, A.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제16권8호
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pp.1108-1117
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2003
In Guadeloupe small ruminants (SR) are reared for meat production under pasture conditions. Intensive rotational grazing systems (irrigated, fertilised and high stocked) allow reasonable levels of production but generate high post-grazing residues. Experiments were designed to control them. A system in which residuals were mown (RM) was tested in comparison to the control system (Residuals Remained, RR). The same design was carried out for two years with Creole goat (G) and Martinik sheep (S). An accelerated reproductive rate (3 parturitions over 2 years) was carried out. Systems were compared at three parturition seasons per year(dry, intermediate and rainy seasons). Each group was composed of 20 goats ($36.0{\pm}2.5kg$) or 20 ewes ($46.8{\pm}2.4kg$). The female body traits did not vary according to pasture management and seasons. The stocking rate averaged 1,400 kg LW/ha. The mean fertility rate for does varied significantly (p<0.05) within the kidding season, from $80.4{\pm}0.5%$ to $93.7{\pm}2.9%$ while the mean litter size was $2.30{\pm}0.07$ total kids born. No effect of pasture system was observed. Corresponding values for ewes were $83.2{\pm}12.8%$ vs. $75.6{\pm}12.5%$ (p<0.05) and $2.43{\pm}0.24$ vs. $2.03{\pm}0.29$ (p<0.01) total lambs born for SRM and SRR ewes, respectively. A seasonal effect was observed upon ewe performances. The preweaning mortality of kids and lambs averaged 16.3% and 14.4%, respectively. It was 7 and 9 percentage points more (p<0.01) for RR than for RM kids and lambs, respectively. For both species, weaning took place at an average age of $81.4{\pm}3.6days$. In Creole kids, live weight at birth and at weaning were $1.9{\pm}0.2kg$ and $8.9{\pm}0.8kg$, respectively. In the Martinik sheep, the traits averaged $2.9{\pm}0.2kg$ and $18.9{\pm}0.9kg$. For both traits in both species, significant (p<0.05) group${\times}$season interactions were recorded. The consequences of elimination of post-grazing residues varied according to the SR species, the environmental conditions and the animal physiological status. The forage characteristics were not limiting factors since forage availability in the RM systems (2,300 and 2,600 kg DM/ha, respectively) and chemical composition were at satisfactory levels (CP content averaged 12 and 10%). It is recommended to develop new grazing system which would allow the use of post-grazing residues instead of mowing the refusals.
본 연구는 비침습 샘플인 털을 이용하여 영월 한반도습지 내 서식하는 멧돼지(Sus scrofa)의 유전분석을 통하여 그들의 서식 생태를 유추하였다. 털 시료는 2018년 11월부터 2019년 5월까지 한반도습지(2.772㎢) 내에서 비빔목 및 헤어트랩을 이용하여 수집하였다. 털 시료로부터 DNA를 추출하여 개체의 종과 성을 PCR을 통해 파악하였으며 6개의 마이크로새틀라이트 마커를 이용하여 개체 구분과 개체 간 유전적 근연관계를 유추하였다. 수집된 털 시료 중 총 16개의 털이 멧돼지의 시료였으며, 이는 암컷 7마리, 수컷 3마리의 10개체로부터 수집된 것임이 판명되었다. 이 10개체의 유전적 관계를 추정해 본 결과, 이들이 만들어내는 45쌍 중에 9쌍의 개체가 친족관계일 가능성이 높게 나타났다. 개체 쌍의 친족관계와 털 시료가 채집된 위치를 함께 고려하여 본 결과, 한반도습지 일대에서 서식하는 멧돼지는 암컷과 그 자손으로써 모계 가족단위로 생활하는 것으로 추정되며, 이는 기존에 알려진 멧돼지의 습성과도 일치하는 결과이다. 그러나 본 연구에 사용된 샘플과 마이크로새틀라이트 마커의 수가 제한적이므로 향후 추가적인 분석이 필요하다.
포유동물의 초기 발생단계에서 핵의 분화와 전능성(totipotency) 을 규명하고, 수정란의 cloning technique를 개발하여 우량유전자로 조성된 개체를 복제함으로써 효과적인 종축개량 기법으로 응용하기 위하여 생쥐 수정란을 모델로 하여 미세조작기법과 Sendai virus를 이용한 핵융합기술을 이용하여 인위적으로 동일한 유전자를 가진 복제 수정란을 작출하고 이들의 작출효과, 체외발달능력 및 체내 이식후 개체발생여부 등을 조사하였다. 2-세포기, 4-세포기 및 8-세포기의 수정란으로부터 핵을 채취하여 이들을 탈핵된 2-세포기의 수정란에 이식하였을 때, 이들의 핵융합 성공율은 각각 88.6%, 87.1% 및 84.7%이었다. 나아가서 이들 핵융합된 수정란을 체외에서 96시간 배양한 결과, 2-세포기, 4-세포기 및 8-세포기의 핵이 이식된 수정란은 각각 76.5%, 68.4% 및 48.3%가 배반포로 발달하였다. 핵이식 후 체외에서 배반포로 발달된 수정란을 골라 수란생쥐에 이식하였던 바, 2-세포기의 핵이 이식된 수정란 156개 중 58개(37.1%) 가 발달하여 신생자로 생산되었으며, 4-세포기의 핵아 이식된 수정란 135개 중 40개(29.6%)가, 그리고 8-세포기의 핵이 이식된 92개의 수정란 중 15개(16.3%)가 신생자로 생산되었다.
본 연구의 목적은 45세 이상의 중 장년층 및 노년층 인구 449명을 대상으로 실버타운 입주의도에 영향을 미치는 예측요인들을 실증적으로 분석한 결과, 인구사회학적 변인 중에서는 거주지, 직업, 주택소유 변인, 동기변인 중에서는 자녀의 부담해소, 편리한 노후생활, 노후생활의 자유 향유 요인들이 실버타운 입주의도 여부를 예측하는 데 유의한 영향력을 행사하는 것으로 나타났다. 또한 입주선택 결정요인 중에서는 보건의료시설, 휴양시설 및 여가 문화서비스시설 변인, 제주도의 입지장점 중에서는 온화한 기후, 쾌적한 환경, 저렴한 비용 변인들이 실버타운 입주의도 여부를 유의하게 예측하는 변인이었으며, 자녀부양의존도가 낮을수록 입주가능성이 높게 나타났다. 종합적으로 실버타운 입주의도에 가장 높은 예측력을 갖는 변인은 저렴한 비용요인이었으며, 휴양시설, 실버타운의 필요성 인지정도, 노후생활의 자유 향유 동기변인, 여가 문화시설, 보건의료시설 등의 변인 순으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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