1, 2-Dithiolane 기를 갖는 lipid를 합성하여 vesicle 을 형성시킨 다음 이것을 ring opening polymerization 하여 고분자화된 vesicle을 합성하였다. 중합반응의 반응속도를 UV를 이용하여 측정한 결과, 반응속도가 1차반응 속도식을 만족하였으며 반응속도 상수값은 $3.84{\times}10^{-2}min^{-1}$이었다. 또한 sucrose를 이용한 투과도 실험에서 고분자화된 vesicle의 투과도는 $4.7{\times}10^{-8}cm\;hr^{-1}$이었으며 이 값은 고분자화되지 않은 경우보다 1.5배 낮은 것이다.
포스파티딜콜린이 다량 함유된 수첨레시틴을 이용한 실험에서 액정구조가 잘 형성됨을 알 수 있었다. 액정구조를 형성하는 물질로는 포스포리피드, 에탄올, 물로 이루어짐을 알 수 있었고 로즈마린산을 지표물질로 캡슐화하였다. 액정의 평균입자크기는 480 nm ~ $3{\mu}m$로 이는 액의 구성물질과 물리적인 힘에 따라 다양한 크기의 형태로 존재하였다. 리포좀과 비교했을 때 액정구조는 매우 높은 캡슐화 효율을 보였다. 수첨레시틴의 함량이 증가하면 많은 액정을 형성하였고, 수첨레시틴의 함량이 적으면 액정의 양도 적게 나타났다. 로즈마린산을 함유한 액정구조의 방출실험결과 리포좀으로 형성된 베지클보다 훨씬 적은 양이 방출됨을 알 수 있었다.
The thermodynamic functions for the binding of the peptide Substance P (SP) on the surface of lipid vesicles made of various types of lipids were obtained by using isothermal titration calorimetry. The reaction enthalpies measured from the experiments were -0.11 to $-4.5kcal\;mol^{-1}$. The sizes of the lipid vesicles were measured with dynamic light scattering instrument in order to get the correlation between the reaction enthalpies and the vesicle sizes. The bindings of SP on the lipid vesicles with diameter of 37 to 108 nm were classified into the enthalpy-driven reaction or the entropy-driven reaction according to the size of the lipid vesicles. For the enthalpy-driven binding reaction, the significance of the electrostatic interactions between SP and lipid molecules was affirmed from the experimental results of the DMPC/DMPG/DMPH and DMPC/DMPS/DMPH vesicles as well as the importance of the hydrophobic interactions between hydrophobic groups of SP and lipid molecules.
한국고분자학회 2006년도 IUPAC International Symposium on Advanced Polymers for Emerging Technologies
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pp.261-261
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2006
Membranes are a central feature of all biological systems and their ability to control many cellular processes is critically important. As a result, a better understanding of how molecules bind to biological membranes is an active area of research. In this report, the interaction between our biomimetic structures and different biological membranes is reported using both model vesicle and in vitro bacterial cell experiments. These results show that lipid composition is more important for selectivity than overall net charge. An effort is made to connect model vesicle studies with in vitro data and naturally occurring lipid compositions.
L-${\alpha}$-lecithin vesicle, bacteriorhodopsin(BR) 그리고 인지질로 재구성된 BR vesicle(InBR vesicle)의 각각의 수용액에서 methylene blue(MB)의 흡수성질을 $20^{\circ}C$에서 $60^{\circ}C$까지 흡수분광법으로 측정하였다. 인지질 vesicle에서 묽은 농도의 MB는 단위체와 이합체 사이에 평형을 이루었고, 고농도의 MB는 oligomer를 형성하였다. 대부분의 경우에 지질(vesicle)의 농도가 매우 높아지면 점점 단위체로 재분배 되었다. 일정한 MB 농도에 BR를 첨가할 때 흡광도비(${\alpha}/{\beta}$)는 감소되며 oligomer가 형성되었다. MB는 InBR vesicle의 상전이 온도 부근에서 흡광도비(${\alpha}/{\beta}$)가 증가했으나 인지질 vesicle에서는 상전이에 무관했다. 이것은 InBR vesicle 표면 위에서 회합하는 MB 분자들은 지질의 상전이에 영향을 받아 단위체로 재분배되는 것으로 사료된다.
With continuing progress of nanotechnologies and various applications of nanoparticles, one needs to develop a quick and fairly standard assessment tool to evaluate cytotoxicity of nanoparticles. However, much cytotoxicity studies on the interpretation of the interaction between nanoparticles and cells are non-mechanistic and time-consuming. Here, we propose a simple screening method for the analysis of the interaction between several AgNPs (5.3 to 64 nm) and fluorescence-dye containing vesicles ($12{\mu}m$) acting as a biomimetic cell-membrane. Fluorescence-dye containing vesicle was prepared using a fluorescence probe (1,6-diphenyl-1,3,5-hexatryene), which was intercalated into the lipid bilayer due to their hydrophobicity. Zeta potential of all materials except for bare-AgNPs (+32.8 mV) was negative (-26 to -54 mV). The morphological change (i.e., rupture and fusion of vesicle, and release of dye) after mixing of the vesicle and AgNPs was observed by fluorescence microscopy, and fluorescence image were different with coating materials and surface charge of x-AgNPs. In the results, we found that the surface charge of nanoparticles is the key factor for vesicle rupture and fusion. This proposed method might be useful for analyzing the cytotoxicity of nanoparticles with cell-membranes instead of in vitro or in vivo cytotoxicity tests.
The excess volumes of mixing of benzyl alcohol and halothane in vesicle and in suspensions of several lipids have been determined at $25^{\circ}C$ it using a excess volume dilatometer. The potency of general anesthetics has long been known to correlate with lipid solubility. Denaturations of the vesicle, which is a sole membrane protein in the purple membrane of Halobacteriun Halobium, were studied by absorption changes at 280 nm and fluorescence changes at 330 nm and excess volume dilatometer. The particle size analysis of viscous polymer solutions by diffusional interchange is the key step by measurement. The excess volume of mixing in chitosan was found to be negative, whereas them of purple membrane, Halobacteriun Halobium and red membrane were positive in benzyl alcohol and halothane. This result was confirmed as Miller's supposition.
Synaptic vesicles (SVs) are key structures for synaptic transmission in neurons. Numerous membrane-associated proteins are sorted from the Golgi complex to the axon and the presynaptic terminal. Protein-protein and protein-lipid interactions are involved with SV targeting in neurons. Interestingly, many SV proteins have lipid binding capability, primarily with either cholesterol or phosphoinositides (PIs). As examples, the major SV protein synaptophysin can bind to cholesterol, a major lipid component in SVs, while several other SV proteins, including synaptotagmin, can bind to PIs. Thus, lipid-protein binding plays a key role for the SV targeting of synaptic proteins. In addition, numerous SV proteins can be palmitoylated. Palmitoylation is thought to be another synaptic targeting signal. Here, we briefly describe the relationship between lipid binding and SV targeting.
전신마취제의 잉여 몰부피는 Halobacteriun Halobium에서 추출분리된 Purple membrane과 Red membrane에서 vesicle의 현탁액에서 $25^{\circ}C$ 잉여부피 dilatometer로 측정되었다. 우리의 연구에 의해 전신마취제인 Propofol은 잉여몰부피와 상관 관계가 있는 것으로 밝혔다. Halobacteriun Halobium에서 비중 차이에 의해 추출 분리된 Purple membrane과 Red membrane의 잉여몰 부피는 vesicle의 아미노산과 지질의 영향이다. 이들은 잉여 몰부피 dilatometer로 잉여 몰 부피를 측정되었으며, 흡광세기는 280 nm 330 nm 에서 연구되었다. Purple membrane과 Red membrane이 Propofol에 의한 입자크기 분석, 상대적 혼탁도가 기계적 특성을 위해 연구되었다. 확산 교환에 의한 점성 중합체 용액의 입자 크기 분석은 측정에 의한 중요한 단계이다. Propofol이 vesicle에서 재구성된 시료들 중에서, 특히 PM+RM+Propofol의 잉여 몰 부피가 PM, RM의 잉여 몰 부피보다 가장 크게 측정되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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