건강에 대한 관심의 증가로 천연식품뿐만 아니라 산업 부산물을 이용한 기능성 소재 탐색에 대한 연구들이 활발하게 진행되고 있다. 본 연구에서는 산업 부산물인 잣송이를 이용하여 초임계 방법으로 추출을 하여 항비만 식품 소재로서의 기능성을 알아보고자 하였다. 분화된 3T3-L1 지방세포에서 잣송이 초임계 추출물이 지방의 축적 및 지방분해에 미치는 영향을 확인한 결과, 잣송이 초임계 추출물을 1, $5{\mu}g/mL$ 농도로 처리 시 세포 내 지방 축적이 억제되었고 중성지방분해 산물인 glycerol의 함량은 증가하였다. 잣송이 초임계 추출물이 지방합성 효소 및 지방분해 효소에 미치는 영향을 알아보기 위해 real-time PCR을 실시한 결과, 잣송이 초임계 추출물은 지방합성 효소인 FAS에 아무런 영향이 나타나지 않았고, 지방분해 효소인 LPL과 HSL의 유전자 발현이 증가됨에 따라 세포 내 중성지방이 지방산과 glycerol로 분해되었음을 확인하였다. 따라서 이 결과들은 잣송이 초임계 추출물이 지방조직에서의 LPL과 HSL 유전자 발현 증가를 통한 지방분해로 항비만 효과를 나타냄을 보여주고 있다. 잣송이 초임계 추출물이 항비만 생리활성을 나타내는 기능성 식품 신소재로서 개발 가능성이 있을 것으로 사료된다.
본 연구에서 어린 으름잎으로부터 추출된 열수추출물인 AQH와 80% 주정추출물인 AQE를 대상으로 3T3-L1 전지방세포의 지방세포 분화과정 중에 처리한 후, Oil Red O 염색법에 의한 lipid accumulation, intracellular 중성지방 함량을 평가하고 free glycerol release 함량을 측정하여 지방세포형성 억제능을 확인하며, ICR 마우스를 대상으로 고지방식이 섭취 하에 어린 으름잎 추출물의 경구투여에 따른 체중과 백색지방에 작용하는 효과를 평가하여 어린 으름잎 추출물의 항비만 효과를 밝히고자 하였다. 3T3-L1 지방세포 분화과정 중 AQH 및 AQE 추출물을 처리한 결과 AQE 처리군에서만 유의적 감소를 나타내었다. Intracellular 중성지방 함량의 경우도 AQE 처리군에서 유의적으로 감소되었다. 지방세포 분화 중 배양액으로 유출되는 free glycerol 함량을 평가한 결과에서도 AQE 처리군의 유의적 감소를 확인할 수 있었다. 이상의 결과를 통해 AQE는 3T3-L1 지방세포 분화과정 중에 지방구 생성 억제 및 지방세포의 지방세포 생성 억제효과가 있는 것으로 판명되었다. 마우스에서 8주간 고지방식이 하에 600 mg/kg/day의 AQE를 경구투여 하였을 때 고지방식이군과 비교하여 체중 및 체중증가량이 통계적으로 유의하게 감소하였고, 부정소 주위 및 신장 주위 백색지방의 감소가 나타났다. AQE 투여에 의한 체중 감소 및 부정소 주위 백색지방량의 감소는 양성대조군으로 사용한 Orlistat의 경구투여 결과와 유사하였다. 이상의 결과로 세포수준에서의 지방세포 분화 억제, 지방구 생성 억제 작용과 실험동물에서 체중증가량 및 체지방의 감소 작용을 갖는 AQE는 향후 항비만 효과를 갖는 소재로 유용하게 사용될 수 있을 것으로 사료된다.
인삼근의 구조적인 차이점에 따른 지질의 함량 및 지방질 조성을 규명하기 위하여 chloroform-methanol로 추출한 지질을 column, thin layer, gas-liquid chromatography에 의하여 분석하였다. 각 부위별 정제 지질은 1.08~2.23%로서 그 조성면에서 볼 때 중성지질은 64.2~73.5%였고 당지질은 15.4~17.4%였으며 인지질은 10.4~19.2%였다. 특히 피층에서는 중성지질의 함량이 가장 높았는데 이는 이곳에만 특징적으로 존재하는 지질분비관에서 합성 분비된 중성지질 때문이라 생각된다. 이러한 점은 조직화학적 관찰 결과 분비관 내강의 분비물질이 nile blue에 적색의 반응을 나타내는 것으로 더욱더 뒷바침 될 수 있었다. 중성지질 획분중에는 triglycerides, sterol esters and hydrocarbons 의 함량이 높았고 그외에 1,3-diglycerides, monoglycerides, 1,2-diglycerides, free sterols, free fatty acids와 미동정된 5종류가 검출되었다. 그러나 중심주에서는 unidentified II, IV 및 V가 검출되지 않은 점이 특이하였다. 당지질 획분 중에는 sterol glucoside, digalactosyl diglyceride 및 esterified sterol glucoside가 주성분이었고 미동정된 6종류가 검출되었다. 인지질 획분 중에는 phospatidyl glycerol, phosphatidyl choline과 phosphatidyl ethanolamine이 주성분이었고 그 외에 phosphatidic acid, phosphatidyl inositol 및 미동정된 2종이 검출되었다. 각 부위별 중성지질, 당지질, 인지질 획분 중에서 모두 18종류의 지방산이 동정되었는데 주요지방산은 linoleic acid, palmitic acid, oleic acid 및 linolenic acid였으나 각 지방산의 함량은 부위별 및 지질분획에 따라서 다소 상이하였다.
Lipid and fatty acid compositions of free lipids and bound lipids from fresh ginseng, red ginseng and white ginseng were studied by means of silicic acid column chromatography, thin-layer chromatography and gas-liquid chromatography. Free lipid and bound lipid contents in those three samples were 1.21 to 1.45% and 0.32 to 0.45%. Neutral lipid fractions in free lipids from the samples were 76.6 to 79.7%, while glycolipid and phospholipid fractions were 11.6 to 14.7% and 8.5 to 8.7%, respectively. The major lipids were triglycerides, sterol esters and hydrocarbons, diglycerides and free sterols in neutral lipids, sterol glucoside, monogalactosyl diglyceride, esterified steryl glycoside, digalactosyl diglyceride in glycolipids and phosphatidyl ethanolamine, phosphatidyl glycerol, phosphatidyl choline and phosphatidyl inositol in phospholipids. Fourteen kinds of even numbered and four kinds of odd numbered fatty acids were identified in the four lipid fractions (TL, NL, GL and PL) by GLC, and the main fatty acids were linoleic acid, palmitic acid, oleic acid and linolenic acid.
Proteins and lipids not only provide a source of energy to the cell, but also play vital roles in modifying the physical properties and function of the biological membranes. In the present study, we investigated the biochemical constituents, viz. proteins and lipids, in growing oocytes of goat antral follicles during summer and winter seasons. Goat genitalia in phosphate buffered saline (pH 7.4) were brought to the laboratory within one hour of slaughter under aseptic conditions at $37^{\circ}C$. Oocytes were aspirated from normal small (<3 mm in diameter) and large (>3 mm) follicles and pooled for biochemical estimations. A significant increase in the amount of protein and lipid was observed with the growth of the oocyte. The amount of protein varied non-significantly with the season, while the amount of lipid varied significantly. The amounts of phospholipid, cholesterol, free fatty acid, and triglyceride increased with the growth of the oocyte, but no significant effect of season in these constituents was observed. Lysolecithin, sphingomyelin, and sterols were the polar lipids identified in both oocytes prepared from small follicles (small oocytes) as well as large follicles (large oocytes). In addition, the small oocytes also contained phosphatidyl serine, while large oocytes contained phosphatidyl glycerol phosphate and phosphatidyl inositol. Among non-polar lipids, triglycerides and long chain alcohols appear only in small oocytes and not in large oocytes. Monoglycerides, 1,2-diglycerides, 1,3-diglycerides and o-dialkyl glycerol ethers, fatty acids, fatty acid methyl esters, and wax esters were identified in both small and large oocytes. Information on biochemical composition of growing oocytes is relevant to oocyte and embryo competence, culture and cryopreservation.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Several medicinal properties of Smilax china L. have been studied including antioxidant, anti-inflammatory, and anti-cancer effects. However, the antiobesity activity and mechanism by which the water-soluble fraction of this plant mediates its effects are not clear. In the present study, we investigated the lipolytic actions of the water-soluble fraction of Smilax china L. leaf ethanol extract (wsSCLE) in 3T3-L1 adipocytes. MATERIALS/METHODS: The wsSCLE was identified by measuring the total polyphenol and flavonoid content. The wsSCLE was evaluated for its effects on cell viability, lipid accumulation, glycerol, and cyclic adenosine monophosphate (cAMP) contents. In addition, western blot analysis was used to evaluate the effects on protein kinase A (PKA), PKA substrates (PKAs), and hormone-sensitive lipase (HSL). For the lipid accumulation assay, 3T3-L1 adipocytes were treated with different doses of wsSCLE for 9 days starting 2 days post-confluence. In other cell experiments, mature 3T3-L1 adipocytes were treated for 24 h with wsSCLE. RESULTS: Results showed that treatment with wsSCLE at 0.05, 0.1, and 0.25 mg/mL had no effect on cell morphology and viability. Without evidence of toxicity, wsSCLE treatment decreased lipid accumulation compared with the untreated adipocyte controls as shown by the lower absorbance of Oil Red O stain. The wsSCLE significantly induced glycerol release and cAMP production in mature 3T3-L1 cells. Furthermore, protein levels of phosphorylated PKA, PKAs, and HSL significantly increased following wsSCLE treatment. CONCLUSION: These results demonstrate that the potential antiobesity activity of wsSCLE is at least in part due to the stimulation of cAMP-PKA-HSL signaling. In addition, the wsSCLE-stimulated lipolysis induced by the signaling is mediated via activation of the ${\beta}$-adrenergic receptor.
The boar sperm has more lipid droplets and specialty of seminal plasma compared with other species, causing difficulties of freezing sperm and decreases for the utilization of frozen semen into the artificial insemination. However, several studies reported significant results for the recovery of sperm motility and reproductive by addition of cryoprotectants and seminal plasma after thawing. This study was designed to investigate the effects of supplementation of trehalose or glycerol in the LEY (lactose and egg yolk in BTS) solution for the conventional freezing and vitrification process. Two boars aged 16 months were used to collect semen for 2 times in a week. The samples were allotted to 3 freezing solutions (LEY + glycerol 10.5% + OEP 1.5%, LEY + trehalose 1M + OEP 1.5%, and sucrose 1.5M + trehalose 1 M + OEP 1.5%) after centrifugation at 800 g for 10 minutes. Semen was equilibrated in freezing solutions for 10 minutes and injected into plastic straws with 2~3 air bubbles to minimize freezing damages. Vitrification was performed to locate sperm in 5 cm above $LN_2$ for 5 minutes, and the conventional freezing was conducted with an automatic freezer. Motility and survival rates were measured by CASA (Computer assisted sperm an alyzing system) and FITC (Fluorescein isothiocyanate), respectively after thawing semen at $50^{\circ}C$ for 12 seconds. The results were analyzed by ANOVA with STATVIEW statistical program. The vitrificatioin solution (LEY + 10.5% glycerol + 1.5% OEP) presented higher motility (20.9%) than other solutions while the solution (LEY + 1M trehalose + 1.5% OEP) showed the lowest (motility : 5.2%). However, survival rates of vitrified sperms detected by FITC showed 1~4% live sperms in almost of dead sperms at all vitrification solutions' groups, but survival rate of freezing solution of LEY + 1M trehalose + 1.5% OEP LEY and LEY + 10.5% glycerol + 1.5% OEP were showed 49%, and 79%, respectively. There were differences (P<0.05) survival rate of conventional freezing in LEY + 10.5% glycerol + 1.5% OEP and LEY + 1M trehalose + 1.5% OEP and the remaining showed no differences. The results suggested that vitrified boar semen was not enough to be utilized for the artificial insemination, but it showed possibility to utilize for ICSI and conventional freezing with glycerol would be useful method for artificial insemination in pig while we choose the outstanding semen against tolerance to freezing damages.
The objective of this study was to evaluate novel usability as natural anti-obesity supplement of Selaginella tamariscina extract. The total phenol contents and total flavonoid contents were $60.29{\pm}3.11GAE\;mg/g$ and $14.90{\pm}0.34QE\;mg/g$, respectively. To evaluate anti-obesity activity of Selaginella tamariscina extract, pancreatic lipase inhibition activity as well as its inhibition effect of lipid accumulation in adipocytes were conducted by Oil Red O staining and lipolysis assay. The result of pancreatic lipase inhibition activity of S. tamariscina extract showed a wide range between 40 and 73% dose dependently. While the incubation of 3T3-L1 cells with S. tamariscina extract inhibited differentiation of preadipocytes and reduced lipid accumulation, the level of released free glycerol into culturing medium was increased in multiple concentrations. These results showed that S. tamariscina extract inhibit adipogenesis and pancreatic lipase activity. Thus, S. tamariscina extract can be a candidate for regulating lipid accumulation in obesity.
Effects of perilla leaf extracts (PLE) on adipocytes differentiation of 3T3-L1 cells were examined. Ethanol extract of PLE treatment significantly decreased lipid accumulation, a marker of adipogenesis, in a dose-dependent manner. Moreover, gene expression levels of peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$), the key adipogenic transcription factor, were markedly decreased by PLE. PLE also suppressed adipocyte fatty acid binding protein (aP2) and glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH), which are adipogenic marker proteins. These results suggest that PLE treatment suppressed differentiation of 3T3-L1 adipocytes, in part by down-regulating expression of adipogenic transcription factor and other specific target genes.
Yao, Amenan A.;Wathelet, Bernard;Thonart, Philippe
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제19권8호
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pp.810-817
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2009
The effect of cryoprotectants (maltodextrin+glycerol) and cryoprotectants+antioxidant [ascorbic acid and/or butylated hydroxytoluene (BHT)] mixtures on the survival, electrolyte leakage, and lipid degradation of freeze-dried Weissella paramesenteroides LC11 during storage was investigated and compared with that of the control (cells without additives) over a 90-day storage period at 4 or $20^{\circ}C$ in glass tubes with water activity ($a_w$) of 0.23. The survival, electrolyte leakage, and lipid degradation were evaluated through colony counts, electrical conductivity, and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) content, respectively. The fatty acids composition was determined by gas chromatography, in both the total lipid extract and the polar lipid fraction, and compared with that of the control after the 90-day storage period. As the storage proceeded, increases in leakage value and TBARS content, as well as a decrease in viability, were observed. After 90 days of storage, the major fatty acids found in both the total lipid extract and the polar lipid fraction were palmitic (16:0), palmitoleic (16:1), stearic (18:0), oleic (18:1), linoleic (18:2), and linolenic (18:3) acids. The survival, leakage value, TBARS content and 18:2/16:0 or 18:3/16:0 ratio were the greatest for the protected strain held at $4^{\circ}C$. Cells with the cryoprotectants+BHT mixture showed the highest percentage of survival and 18:2/16:0 or 18:3/16:0 ratio in both lipid extracts, as well as the lowest leakage value and TBARS content after the 90-day storage period. Drying cells with the cryoprotectants+BHT mixture considerably slowed down polar lipid degradation and loss of membrane integrity, resulting in improved viability during storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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