This study was an attempt to investigate and compare the fine structure of small cells in the space of Disse of various animal livers. All animal livers contained small cells with or without lipid droplets and the one with lipid droplet seemed to be more developed and show an abundance of activity in function. The fine structure of the small cells observed in the nonmammals was similar to that of Ito cell in the mammal. The electron density of the small cells was similar to that of other cell types in the same animal liver. The cisternal dilation of rough endoplasmic reticulum and Golgi apparatus was more predominant in the mammalian Ito cells. In the nonmammalian, aquatic vertebrates, however, lysosomes and filaments are much more abundant in the Ito cell and its abundant cytoplasmic processes rich in filaments were usually extended between the parenchymal cells. The disparity in size of organelles and numbers of lipid droplets in the small cells showed a tendency similar to those of other cell types in the same animal. From these results, it is considered that the small cells in the space of Disse is a Ito cell and the Ito cell without lipid droplets differentiates into the one containing lipid droplets according to the characteristics of the different animals respectively, and that the Ito cells in the mammals are more active in metabolic function, while those in the nonmammalian aquatic vertebrates are abundant in support of parenchyme.
Non-alcoholic fatty liver disease(NAFLD) is excessive hepatic lipid accumulation mainly caused by obesity. This study aimed to evaluate whether micro-current stimulation(MCS) could modulate lipid metabolism regarding the Sirt1/AMPK pathway, fatty acid β-oxidation pathway, and lipolysis and lipogenesis-related factors in FL83B cells. For the NAFLD cell model, FL83B cells were treated with oleic acid for lipid accumulation. MCS were stimulated for 1 hr and used frequency 10 Hz, duty cycle 50%, and biphasic rectangular current pulse. The intensity of MCS was divided into 50, 100, 200, and 400 ㎂. Through the results of Oil red O staining, it was confirmed that MCSs with the intensity of 200 ㎂ and 400 ㎂ significantly reduced the degree of lipid droplet formation. Thus, these MCS intensities were applied to western blot analysis. Western blot analysis was performed to analyze the effects of MCS on lipid metabolism. MCS with the intensity of 400 ㎂ showed that significantly activated the Sirt1/AMPK pathway, a key pathway for regulating lipid metabolism in hepatocytes, and fatty acid β-oxidation-related transcription factors. Moreover, it activated the lipolysis pathway and suppressed lipogenesis-related transcription factors such as SREBP-1c, FAS, and PPARγ. In the case of MCS with the intensity of 200 ㎂, only PGC1α and SREBP-1c showed significant differences compared to cells treated only with oleic acid. Taken together, these results suggested that MCS with the intensity of 400 ㎂ could alleviate hepatic lipid accumulation by modulating lipid metabolism in hepatocytes.
도라지의 급이가 고콜레스테롤혈증 흰쥐의 간기능과 지질대사에 미치는 영향 구명하기 위하여 SD계 숫흰쥐에게 동결건조한 도라지 분말 5%와 도라지 분말 5%에 해당하는 식물섬유, saponin, 에탄올 추출물을 각각 급이하여 3주간 실험 사육한 후 혈청효소 및 간장의 지질성분 분석, 간세포의 형태를 검토하였다. 혈청 중 AST, ALT효소활성은 대조군에 비해 전 실험군이 유의적으로 감소하였고 그 중 saponin 급이군이 가장 낮았고 그 다음이 식물 섬유군이었다. LDH효소 활성도 전 실험군에서 유의적으로 낮게 나타났으며 22년근 도라지의 식물 섬유군과 saponin군이 낮은 값을 보였다. 간장 중의 총 콜레스테롤 함량은 4년근과 22년근 도라지 분말 및 식물섬유 급이군이 비교적 낮았으며, 중성지질 함량은 대조군이 비해 전 실험군에서 낮았으나, 각 실험군간의 차이는 크지 않았고, 인지직 함량은 전 실험군에 있어 비슷한 수준이었다. 간장 조직세포의 전자현미경 관철 결과, 대조군은 지방구가 증가되어 있는 반면 도라지 급이군에서는 감소되었으며, 22년근 도라지 급이군은 간장 글리코겐 축적량이 증가되어 있었다.
Mammalian patatin-like phospholipase domain containing proteins (PNPLAs) play critical roles in triglyceride hydrolysis, phospholipids metabolism, and lipid droplet (LD) homeostasis. PNPLA7 is a lysophosphatidylcholine hydrolase anchored on the endoplasmic reticulum which associates with LDs through its catalytic region (PNPLA7-C) in response to increased cyclic nucleotide levels. However, the interaction of PNPLA7 with LDs through its catalytic region is unknown. Herein, we demonstrate that PNPLA7-C localizes to the mature LDs ex vivo and also colocalizes with pre-existing LDs. Localization of PNPLA7-C with LDs induces LDs clustering via non-enzymatic intermolecular associations, while PNPLA7 alone does not induce LD clustering. Residues 742-1016 contains four putative transmembrane domains which act as a LD targeting motif and are required for the localization of PNPLA7-C to LDs. Furthermore, the N-terminal flanking region of the LD targeting motif, residues 681-741, contributes to the LD targeting, whereas the C-terminal flanking region (1169-1326) has an anti-LD targeting effect. Interestingly, the LD targeting motif does not exhibit lysophosphatidylcholine hydrolase activity even though it associates with LDs phospholipid membranes. These findings characterize the specific functional domains of PNPLA7 mediating subcellular positioning and interactions with LDs, as wells as providing critical insights into the structure of this evolutionarily conserved phospholipid-metabolizing enzyme family.
Species A rotaviruses (RVAs) replicate and assemble their immature particles within electron dense compartments known as viroplasms, where lipid droplets (LDs) interact with the viroplasm and facilitate viral replication. Despite the importance of LD formation in the life cycle of RVAs, the upstream molecules modulating LD formation remain unclear. This study aimed to find out the role of sterol regulatory element-binding proteins (SREBPs) in reprogramming of LD formation after RVA infection. Here, we demonstrate that RVA infection reprograms the sterol regulatory element-binding proteins (SREBPs)-dependent lipogenic pathways in virus-infected cells, and that both SREBP-1 and -2 transactivated genes, which are involved in fatty acid and cholesterol biosynthesis, are essential for LD formation. Our results showed that pharmacological inhibition of SREBPs using AM580 and betulin and inhibition of their downstream cholesterol biosynthesis (simvastatin for HMG-CoA reductase) and fatty acid enzymes (TOFA) negatively modulated the intracellular triacylglycerides and cholesterol levels and their resulting LD and viroplasm formations. Interestingly, pharmacological inhibition of SREBPs significantly reduced RVA protein synthesis, genome replication and progeny production. This study identified SREBPs-mediated lipogenic reprogramming in RVA-infected host cells, which facilitates virus replication through LD formation and its interaction with viroplasms, suggesting that SREBPs can be a potential target for the development of efficient and affordable therapeutics against RVA infection.
마요네즈 저장 중 미세구조의 변화를 광학현미경과 주사 전자현미경으로 관찰하였다. 신선한 마요네즈는 다양한 크기의 지방구로 이루어져 있었으며 지방구의 크기 분포는 정규분포를 보였다. $60^{\circ}C$와 $-10^{\circ}C$에서 저장하는 동안 지방구의 합일(合一)에 의해 지방구가 커지는 경향을 보였으며, 탁도에 의한 실험결과 또한 이러한 지방구의 합일(合一)현상을 확인시켜 주었다. 전자현미경은 광학현미경에 비해 크기가 작은 지방구를 측정하기가 용이하였으며, 따라서 지방구의 평균 입경이 작았다. 이것은 전자현미경의 높은 해상력과 심도 때문이며, 더욱이 시료를 회석할 필요가 없어 균일한 지방구의 분포를 보여주는 전자현미경 방법은 광학현미경에 비해 유화제품의 지방구 분포를 측정하기에 유리한 방법이라 하겠다.
본 실험은 알팔파의 Allelopathy와 Autotoxicity에 관련되는 생리활성 물질의 분리, 정제, 동정하기 위하여 실시되었다. 알팔파 생잎 1kg을 80% MeOH로 추출하여 silica gel TLC와 DCCC의 분리와 정제과정을 거쳐 HPLC로 동정하였다. HLPC 분석결과 4개의 phenolic 물질(salicylic acid, rutin, quercetin, scopoletin) 등이 동정되었다. 이들 물질을 이용한 발아실험에서도 모두 알팔파의 발아와 생육에 억제적으로 작용하였으며, 이 중 quercetin의 처리가 가장 억제적이었다. 따라서 최소한 이들 물질이 알팔파의 Allelopathy와 Autotoxicity에 관련하는 것으로 생각되었다.
Previous studies suggest that polyunsaturated fatty acids with long carbon chains such as eicosapentaenoic acid(EPA) and docosahexaenoic acid(DHA) have several health benefits. However metabolic consequences of these fatty acids themselves and their regulation of transcriptional activity involving glucose utilization are not well established. Thus, the purpose of this study was to investigate how EPA influx affects cellular lipid accumulation and gene expressions involving $de$$novo$ lipogenesis in hepatocyte cultures. Compared to oleic acid treatment, EPA treatment showed remarkably decreased cellular TG conversion and accumulation, along with phospholipids at a lower extent. As expected, EPA increased mRNA expression involving fatty acid influx and lipid droplet formation, but did not affect mRNA expression involving glucose utilization. EPA increased transcriptional activity of PPAR-${\alpha}$ and glucose responsive transcription factor when transcription factor binding protein was activated. Taken together, these data suggest that EPA decreases lipid accumulation through increases of the ${\beta}$-oxidation pathway without interruption of glucose utilization.
Lipid droplet (LD) is a cellular organelle that stores neutral lipids as a source of energy and carbon. However, recent research has emerged that the organelle is involved in lipid synthesis, transportation, and metabolism, as well as mediating cellular protein storage and degradation. With the exception of multi-cellular organisms, some unicellular microorganisms have been observed to contain LDs. The organelle has been isolated and characterized from numerous organisms. Triacylglycerol (TAG) accumulation in LDs can be in excess of 50% of the dry weight in some microorganisms, and a maximum of 87% in some instances. These microorganisms include eukaryotes such as yeast and green algae as well as prokaryotes such as bacteria. Some organisms obtain carbon from $CO_2$ via photosynthesis, while the majority utilizes carbon from various types of biomass. Therefore, high TAG content generated by utilizing waste or cheap biomass, coupled with an efficient conversion rate, present these organisms as bio-tech 'factories' to produce biodiesel. This review summarizes LD research in these organisms and provides useful information for further LD biological research and microorganism biodiesel development.
The objective of this study was to compare the quality characteristics of cultured and red sea bream. The color of dorsal muscle was different between wild and cultured red sea bream. Lipid content of the dorsal muscle was higher in cultured fish than in wild one. The contents of moisture and crude protein in cultured fish muscle were almost same as those of wild one. Sensory evaluation of raw fish meat showed that cultured fish had lower preference in appearance, taste and texture than wild one. Especially the texture of cultured raw fish meat had lower preference than wild meat. For cooked fish meat, cultured fish were harder and less juicy than wild fish. These textural differences between wild and cultured meats were confirmed by objective evaluation including the measurements of hardness, springiness, and cohesiveness. Light microscopic observation showed that cultured red sea bream had more lipid in the surface layer near epidermis than wild one. Also more lipid droplet between muscle fibers were observed in cultured red sea bream by SEM.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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