Synaptic vesicles (SVs) are key structures for synaptic transmission in neurons. Numerous membrane-associated proteins are sorted from the Golgi complex to the axon and the presynaptic terminal. Protein-protein and protein-lipid interactions are involved with SV targeting in neurons. Interestingly, many SV proteins have lipid binding capability, primarily with either cholesterol or phosphoinositides (PIs). As examples, the major SV protein synaptophysin can bind to cholesterol, a major lipid component in SVs, while several other SV proteins, including synaptotagmin, can bind to PIs. Thus, lipid-protein binding plays a key role for the SV targeting of synaptic proteins. In addition, numerous SV proteins can be palmitoylated. Palmitoylation is thought to be another synaptic targeting signal. Here, we briefly describe the relationship between lipid binding and SV targeting.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.13
no.4
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pp.459-468
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1984
The currently accepted model of membrane structure proposes a dynamic, asymmetric lipid matrix of phospholipids and cholesterol with globular proteins embedded across the membrane to various degrees. Most phospholipids are in the bilayer arrangement and also closely associated with integral membrane proteins or loosely associated with peripheral proteins. Biological functions of membrane, such as membrane-bound enzyme functions and transport systems, are influenced by the membrane physical properties, which are determined by fatty acid composition of phospholipids, polar head group composition and membrane cholesterol content. Polar and non-polar region of the phospholipid molecule can interact, with changes in the conformation of a membrane-associated protein altering either its catalytic activity or the protein's interaction with other membrane proteins. Mammalian dietary studies attempted to change the lipid composition of a few cell membranes have shown comparisons, using essential fatty acid-deficient diets. In recent years, Clandinin and a few other workers have pioneered the study proving the influence of dietary fat fed in a nutritionally complete diet on composition of phospholipid classes of cell membrane. Modulation caused by diet fat was rapid and reversible in phospholipid fatty acyl composition of membranes of cardiac mitochondria, liver cell, brain synaptosome and lymphocytes. These changes were at the same time, accompanied by variety of membrane associated functions controlled by membrane-bound enzymes, tranporter and receptor proteins. The findings suggest the basic concept of the necessity of dietary fatty acid balance if consistency of optimal membrane structural lipid composition is to be maintained, as well as the overall inadequacy of describing the nutritional-biochemical quality of a dietary fat solely by its content of linoleic acid. Furthermore, they give light on the possible application to clinical and preventive medicine.
Yi, Seung-In;Park, Mee-Yeon;Kim, Ju-Kon;Choi, Yang Do
Plant Biotechnology Reports
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v.3
no.3
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pp.213-223
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2009
Lipid transfer proteins (LTPs) are widely distributed in the plant kingdom, but their functions remain elusive. The proteins AlLTP2-4 were isolated from three related Allium plants: garlic (A. sativum L.), Welsh onion (A. fistulosum L.), and Nanking shallot (A. ascalonicum L.). These novel proteins comprise a new class of LTPs associated with the Ace-AMP1 from onion (A. cepa L.). The AlLTP genes encode proteins harboring 132 common amino acids and also share a high level of sequence identity. Protein characteristics and phylogenetic analysis suggest that LTPs could be classified into five distinct groups. The AlLTPs were clustered into the most distantly related plant LTP subfamily and appeared to be restricted to the Allium species. In particular, the number of amino acids existing between the fourth and fifth Cys residue was suggested as a conserved motif facilitating the categorization of all the LTP-related proteins in the family. Unlike other LTPs, AlLTPs harboring both the putative C-terminal propeptide and N-terminal signal peptide were predicted to be localized to cytoplasmic vacuoles. When a chimeric GFP protein fused with both N-terminal and C-terminal AlLTP2 signal peptides was expressed in rice cells, the fluorescence signal was detected in the endomembrane compartments, thereby confirming that AlLTPs are an unprecedented intracellular type of LTP. Collectively, our present data demonstrate that AlLTPs are a novel type of LTP associated with the Allium species.
This study was carried out to examine the potency of the three surface compo- nents from Porphyromonas gingivalis to stimulate the murine macrophage cell line RAW264.7 to synthesize the pro-inflammatory cytokine tumor necrosis factor alpha($TNF-{\alpha}$) and nitric oxide (NO). Lipopolysaccharide(LPS). lipid A-associated proteins(LAP) and saline-extractable surface -associated material(SAM) were isolated from P. gingivalis 381. $TNF-{\alpha}$ release into culture supernatants was determined by two-site ELISA. NO production was assayed by measuring the accumulation of nitrite in culture supernatants. Western blot analysis of iNOS and analysis of reverse transcription(RT)-PCR products were carried out. The surface components extracted from this bacterium were almost equally potent in stimulating release of $TNF-{\alpha}$ and NO by RAW264.7 cells. $TNF-{\alpha}$ that was being measured immunologically was due to activation of $TNF-{\alpha}$ gene transcription. The present study clearly shows that P. gingivalis surface components fully induced iNOS expression in RAW264.7 cells in the absence of other stimuli. The ability of P. gingivalis surface components to promote the production of $TNF-{\alpha}$ and NO may be important in the pathogenesis of inflammatory periodontal disease.
The aim of this study was to evaluate protein expression patterns of liver in response to subacute ruminal acidosis (SARA) induced by high-concentrate diet. Sixteen healthy mid-lactating goats were randomly divided into 2 groups and fed either a high-forage (HF) diet or a high-concentrate (HC) diet. The HC diet was expected to induce SARA. After ensuring the occurrence of SARA, liver samples were collected. Proteome analysis with differential in gel electrophoresis technology revealed that, 15 proteins were significantly modulated in liver in a comparison between HF and HC-fed goats. These proteins were found mainly associated with metabolism and energy transfer after identified by matrix-assisted laser desorption ionization/time of flight. The results indicated that glucose, lipid and protein catabolism could be enhanced when SARA occurred. It prompted that glucose, lipid and amine acid in the liver mainly participated in oxidation and energy supply when SARA occurred, which possibly consumed more precursors involved in milk protein and milk fat synthesis. These results suggest new candidate proteins that may contribute to a better understanding of the mechanisms that mediate liver adaptation to SARA.
Park, Jun-Seop;Jung, Tae-Sang;Noh, Yang-Ho;Kim, Woo-Sung;Park, Won-Ick;Kim, Young-Soo;Chung, In-Kyo;Sohn, Uy Dong;Bae, Soo-Kyung;Bae, Moon-Kyoung;Jang, Hye-Ock;Yun, Il
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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v.16
no.6
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pp.413-422
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2012
The purpose of this study is to investigated the mechanism of pharmacological action of local anesthetic and provide the basic information about the development of new effective local anesthetics. Fluorescent probe techniques were used to evaluate the effect of lidocaine HCl on the physical properties (transbilayer asymmetric lateral and rotational mobility, annular lipid fluidity and protein distribution) of synaptosomal plasma membrane vesicles (SPMV) isolated from bovine cerebral cortex, and liposomes of total lipids (SPMVTL) and phospholipids (SPMVPL) extracted from the SPMV. An experimental procedure was used based on selective quenching of 1,3-di(1-pyrenyl)propane (Py-3-Py) and 1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene (DPH) by trinitrophenyl groups, and radiationless energy transfer from the tryptophans of membrane proteins to Py-3-Py. Lidocaine HCl increased the bulk lateral and rotational mobility of neuronal and model membrane lipid bilayes, and had a greater fluidizing effect on the inner monolayer than the outer monolayer. Lidocaine HCl increased annular lipid fluidity in SPMV lipid bilayers. It also caused membrane proteins to cluster. The most important finding of this study is that there is far greater increase in annular lipid fluidity than that in lateral and rotational mobilities by lidocaine HCl. Lidocaine HCl alters the stereo or dynamics of the proteins in the lipid bilayers by combining with lipids, especially with the annular lipids. In conclusion, the present data suggest that lidocaine, in addition to its direct interaction with proteins, concurrently interacts with membrane lipids, fluidizing the membrane, and thus inducing conformational changes of proteins known to be intimately associated with membrane lipid.
Satellite cells are skeletal muscle progenitor/stem cells that reside between the basal lamina and plasma membranes of skeletal fibers in vivo. These cells can give rise to both myogenic and adipogenic cells. Given the possible role for differentiation of satellite cells into adipocytes in marbling and in some pathological disorders like sarcopenia, knowledge of the proteins involved in such process remains obscure. Using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis coupled with mass spectrometry, we investigated the proteins that are differentially expressed during adipogenic differentiation of satellite cells from bovine longissimus muscle. Our proteome mapping strategy to identify the differentially expressed intracellular proteins during adipogenic differentiation revealed a total of 25 different proteins. The proteins up-regulated during adipogenic differentiation of satellite cells like Cathepsin H precursor, Retinal dehydrogenase 1, Enoyl-CoA hydratase, Ubiquinol-cytochrome-c reductase, T-complex protein 1 subunit beta and ATP synthase D chain were found to be associated with lipid metabolism. The down-regulated proteins like LIM protein, annexin proteins, cofilin-1, Rho GDP-dissociation inhibitor 1 and septin-2, identified in the present study were found to be associated with myogenesis. These results clearly demonstrate that the adipogenic conversion of muscle satellite cells is associated with the up-regulated and down-regulated proteins involved in adipogenesis and myogenesis respectively.
Kim, Jung-Hee;Rhee, Jin-Kyu;Ahn, Dae-Gyun;Kim, Kwang Pyo;Oh, Jong-Won
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.12
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pp.1744-1754
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2014
The hepatitis C virus (HCV) RNA genome is replicated by an RNA replicase complex (RC) consisting of cellular proteins and viral nonstructural (NS) proteins, including NS5B, an RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) and key enzyme for viral RNA genome replication. The HCV RC is known to be associated with an intracellular membrane structure, but the cellular components of the RC and their roles in the formation of the HCV RC have not been well characterized. In this study, we took a proteomic approach to identify stomatin, a member of the integral proteins of lipid rafts, as a cellular protein interacting with HCV NS5B. Co-immunoprecipitation and co-localization studies confirmed the interaction between stomatin and NS5B. We demonstrated that the subcellular fraction containing viral NS proteins and stomatin displays RdRp activity. Membrane flotation assays with the HCV genome replication-competent subcellular fraction revealed that the HCV RdRp and stomatin are associated with the lipid raft-like domain of membranous structures. Stomatin silencing by RNA interference led to the release of NS5B from the detergent-resistant membrane, thereby inhibiting HCV replication in both HCV subgenomic replicon-harboring cells and HCV-infected cells. Our results identify stomatin as a cellular protein that plays a role in the formation of an enzymatically active HCV RC on a detergent-resistant membrane structure.
Kim, Hwa-Jin;You, Mi-Kyoung;Lee, Young-Hyun;Kim, Hyun-Jung;Adhikari, Deepak;Kim, Hyeon-A
Nutrition Research and Practice
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v.12
no.6
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pp.494-502
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2018
BACKGROUND/OBJECTIVES: Reducing the number of adipocytes by inducing apoptosis of mature adipocytes as well as suppressing differentiation of preadipocytes plays an important role in preventing obesity. This study examines the anti-adipogenic and pro-apoptotic effect of red pepper seed water extract (RPS) prepared at $4^{\circ}C$ (RPS4) in 3T3-L1 cells. MATERIALS/METHODS: Effect of RPS4 or its fractions on lipid accumulation was determined in 3T3-L1 cells using oil red O (ORO) staining. The expressions of AMP-activated protein kinase (AMPK) and adipogenic associated proteins [peroxisome proliferator-activated receptor-${\gamma}$ ($PPAR-{\gamma}$), CCAAT/enhancer-binding proteins ${\alpha}$ (C/EBP ${\alpha}$), sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c), fatty acid synthase (FAS), and acetyl-CoA carboxylase (ACC)] were measured in 3T3-L1 cells treated with RPS4. Apoptosis and the expression of Akt and Bcl-2 family proteins [B-cell lymphoma 2 (Bcl-2), Bcl-2-associated death promoter (Bad), Bcl-2 like protein 4 (Bax), Bal-2 homologous antagonist/killer (Bak)] were measured in mature 3T3-L1 cells treated with RPS4. RESULTS: Treatment of RPS4 ($0-75{\mu}g/mL$) or its fractions ($0-50{\mu}g/mL$) for 24 h did not have an apparent cytotoxicity on pre and mature 3T3-L1 cells. RPS4 significantly suppressed differentiation and cellular lipid accumulation by increasing the phosphorylation of AMPK and reducing the expression of $PPAR-{\gamma}$, C/EBP ${\alpha}$, SREBP-1c, FAS, and ACC. In addition, all fractions except ethyl acetate fraction significantly suppressed cellular lipid accumulation. RPS4 induced the apoptosis of mature adipocytes by hypophosphorylating Akt, increasing the expression of the pro-apoptotic proteins, Bak, Bax, and Bad, and reducing the expression of the anti-apoptotic proteins, Bcl-2 and p-Bad. CONCLUSIONS: These finding suggest that RPS4 can reduce the numbers as well as the size of adipocytes and might useful for preventing and treating obesity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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