• Food Science and Biotechnology
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• 제14권2호
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• pp.297-300
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• 2005

Effects of allyl sulfides on kinetic behavior of cytochrome P450 1 (CYP1)-catalyzed ethoxyresorufin O-deethylase (EROD) activity were studied using microsomes from benzo[a]pyrene-treated human hepatoma cells. Apparent $K_m$ and $V_{max}$ values were calculated as $2.8\;{\mu}M$ and $3.0\;{\mu}mol$ resorufin/min/mg protein based on Lineweaver-Burk plot of microsomal EROD activity, respectively. Diallyl disulfide (DADS) and diallyl trisulfide (DATS) affected $K_m$ and $V_{max}$ values of EROD activity and acted as mixed-type inhibitors for CYP1 isozymes. Apparent Ki values of DADS and DATS were calculated as 1.07 and 0.88 mM, respectively, by re-plotting slopes of Lineweaver-Burk plot and inhibitor concentrations.

• KSBB Journal
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• 제13권1호
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• pp.44-51
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• 1998

Hydrolysis and adsorption reversibility experiments were run for initial enzyme activity of 4.48, 9.65, 11.19 and 17.14U/mL at a temperature 30$^\circ C$. The chitin particle size corresponded to a mean particle diameter of 0.127mm, and the initial concentration of chitin was 10mg/mL. After approximately 2hrs, the enzyme activity remained constant in a speudo-steady state. The amounts in the bulk [E] and the amounts of enzyme adsorbed on the chitin surface [E] are plotted on Lineweaver-Burk plot to yield a linear relationship with a correlation coefficient of 0.99, a slope of 2.79cm$^-1$ and an intercept of 0.08$\textrm{cm}^2$/U. From this parameters, the values of [E$_T$] and $K_E$ were calculated to be 12.5U/cm$^2$ and 34.88U/mL. respectively, Adsorption isotherm of the enzyme on the particles showed a well developed plateau of 1.35$\times$10$^-3$, 4.72$\times$10$^-3$, 4.42$\times$10$^-3$, 8.58$\times$10$^-3$U/cm$^2$ at 30$^\circ C$. To determine the specificity of chitinase for crystalline chitin, the free energy of adsorption was measured, and its was determined as about -14.62~-18.8kJ/mol.

• KSBB Journal
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• 제14권3호
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• pp.322-327
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• 1999

토양에서 분리된 Streptomyces sp으로부터 cholesterol oxidase의 정제 및 효소학적 특성을 조사하였다. 본 효소의 정제는 50~80% 포화의 황산암모늄 침전 및 cholesterol affinity column chromatography를 통하여 28.3%의 수율로 정제 되었다. 정제된 효소는 SDS-PAGE에서 단일한 밴드를 보였으며 분저량은 약 60,000 dalton으로 추정되었으며, HPLC분석 결과 단일의 peak로 검출되었다. 본 효소의 특성을 검토한 결과, 금속 이온으로 Hg와 Cu의 존재시 크게 저해를 받았고, dithiothreitol 과 mercaptoethanol과 같은 저해제에 의해서 상당히 실활되었다. 본 cholesterol oxidase의 Michaelis 상수는 cholesterol을 기질로하여 Lineweaver-Burk plot분석에서 1.38mM로 추산되었다. 정제효소의 아미노산 조정은 약 416개의 잔기로 추정되며 glycine, alanine, threonine의 함량이 높은 반면, methionine, isoleucine의 함량은 극히 낮았다.

• 미생물학회지
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• 제50권4호
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• pp.381-383
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• 2014

미생물 기원의 ${\alpha}$-glucosidase 저해제를 탐색하는 과정에서 토양에서 분리한 균주인 Bacillus sp. SKU31-1 배양액에서 강력한 저해제 compound K을 일련의 크로마토그래피 방법에 의해 분리 정제하였고 $^1H$ NMR, $^{13}C$ NMR, $^1H-^1H$ COSY spectra 분석과 문헌조사를 통해 5-amino-1-hydroxymethyl-1,2,3,4-cyclohexanetetrol로 동정되었다. Compound K의 ${\alpha}$-glucosidase 저해 활성은 $IC_{50}$값이 maltose 기질에서는 $1.9{\mu}M$이고, sucrose 기질 사용시 4.9 mM이었다. Lineweaver Burk plot에 의해 $K_i$값이 0.15 mM 로 강력한 경쟁적 저해제 임이 밝혀졌다.

• Elastomers and Composites
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• 제42권2호
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• pp.112-118
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• 2007

EPDM을 결합재로 사용하고, HRP를 고정시켜 과산화수소 정량을 위한 탄소반죽전극을 제작하고, 바이오센서로서 실용화 가능성을 살펴보기 위하여 전기화학적 특성을 고찰하였다. 실험 농도 영역에서 신호의 Lineweaver-Burk 도시가 보여준 좋은 직선성은 촉매력이 효과적으로 발휘될 수 있도록 EPDM이 전극 물질 속에서 HRP를 잘 고정하고 있음을 보여 주었으며, 이는 EPDM이 전극물질 결합재로 활용될 수 있음을 말하는 것이다. 전극은 낮은 전극전위($0.0\sim-1.0$ V vs. Ag/AgCl)에서 작동하였으며, 이 때 얻어진 신호는 높은 감도와 재현성을 보여 주었다. 특히 건조된 고무의 기계적 안정성은 탄소반죽 전극 실용화의 난제였던 실리콘 오일 결합재의 대체가능성을 열어주었다.

• 분석과학
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• 제19권1호
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• pp.58-64
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• 2006

탄소반죽에 쑥조직을 혼입시켜 과산화수소 정량 바이오센서를 제작하고 그것의 전기화학적 성질을 조사하였다. 다른 생체조직을 이용하여 제작한 센서와 비교할 때, 생촉매 안정성이 뛰어났으며, 보다 큰 감응신호를 보여주었다. 조직의 함량 변화에 따른 신호의 변화는 넓은 범위에 걸쳐 직선성을 보여 주었고, Lineweaver-Burk 도시의 직선성은 전극 감응이 효소 촉매작용에 의하여 조절되고 있음을 보였다. 또 감응전류의 pH 의존성 변화는 센서가 두 종류의 동위효소를 포함하고 있음을 암시하였다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제15권2호
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• pp.161-164
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• 2007

While searching for ${\alpha}$-glucosidase inhibitors, the active compound was found in a methanol extract of Burthus martensi Kirsch. The separation of the active compound was performed using various chromatography methods and the physico-chemical properties of the purified compound were characterized. The compound showed very potent inhibitory activity against ${\alpha}-glucosidase$ with an $IC_{50}$ value of $5.3\;{\mu}g/ml$. Lineweaver-Burk plot indicated that its inhibition of ${\alpha}-glucosidase$ was competitive.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제6권2호
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• pp.216-220
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• 1999

혹미의 취반과정 중 lipoxygenase 작용에 의해 생성되는 휘발성 향미 성분의 분석을 위한 기초 자료를 제공하기 위해 진도산 흑미의 lipoxygenase activity를 비색법을 이용하여 측정하였다. 20-60% 포화농도의 ammonium sulfate를 첨가하여 활성을 비교한 결과 30% 포화농도에서 23.9 unit/mg으로 가장 높은 활성을 나타내었다. pH 6.0-9.0에서 조효소액의 활성을 측정한 결과 pH 7.0에서 24.97 unit/mg 으로 가장 높게 나타났으며 0.05-0.8 mM의 linoleic acid를 기질로하여 활성을 측정한 후 Lineweaver-Burk plotting으로 해석하여 속도상수 Vmax와 Km을 구한 결과 각각 53.85 unit/mg과 0.21 mM로 나타났다. 저장온도 -4$0^{\circ}C$, 4$^{\circ}C$, $25^{\circ}C$에서 저장하며 활성을 측정한 결과 -4$0^{\circ}C$에서 저장 3일 후 활성이 62%까지 떨어졌으며 $25^{\circ}C$ 저장의 경우에는 저장 4시간 이후로는 활성을 나타내지 않았다. Microwave로 0-100초간 가열처리 후 활성을 측정한 결과 100초간 가열 하였을 때 대조구에 비해 3.25%의 활성만을 나타내었다. 따라서 진도산 흑미의 lipoxygenase activity는 pH 7.0, ammonium sulfate 30% 포화농도, 기질의 농도 0.21 mM에서 측정하는 것이 가장 적합하며 microwave heating 처리에 의해 효소를 불활성화 할 수 있는 것으로 생각되었다.

• Elastomers and Composites
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• 제41권4호
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• pp.231-237
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• 2006

부틸고무를 결합재로 사용하여 과산화수소 정량 바이오센서를 제작하고, 그것의 전기화학적 특성과 실용화 가능성을 살펴보았다. 전극은 본 실험실에서 연구되었던 실리콘 오일을 결합재로 사용한 동식물조직 바이오센서보다 수백 배 이상 큰 신호를 보여주었으며, $0.0{\sim}-1.00\;V$(vs. Ag/AgCl)의 넓은 퍼텐셜 영역에서 안정적으로 작동될 수 있었다. 또 신호전류는 실험 퍼텔셜 영역에서 전극전위에 따라 좋은 직선성을 보였다. 검출한계는 $3.0{\times}10^{-4}\;M$ 이었으며, Lineweaver-Burk 도시의 직선성은 효소가 전극 표면에 효과적으로 고정되어 있음을 확인시켜 주었다. 높은 감도에 의한 신호전류의 재현성과, 부틸고무의 결합력에 의한 전극물질의 기계적 안정성은 전극의 실용화 가능성을 보여 주었다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제19권4호
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• pp.326-334
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• 1996

We investigated the optimum conditions for conversion of water-insoluble components of basidiocarps of Ganoderma lucidum to water-soluble components by hydrolyzing with chitinase. We also tried it with Ganoderma luciclum residue remaining after extracting hot water-soluble components of Ganoderma lucidum. After hydrolyzing under optimum conditions (20 ppm chitinase, 2% Ganoderma lucidum or 6% Ganoderma lucidum residue, at pH 3 and at $ 35^{\circ}C$), the contents of total water-soluble components (polysaccharide or protein) were measured, and it was found that the contents of water-soluble components increased to 1.5-2.7 fold. Michaelis constant, $K_m$ and maximum rate, $V_max$ calculated by Lineweaver-Burk plot for hydrolysis of Ganoderma lucidum were 1.75% and 0.02%/min respectively and those for hydrolysis of Ganoderma lucidum residue were 53.15% and 0.53%/min respectively The protein-bound polysaccharide was isolated after hydrolysis and molecular weights were measured by Sepharose CL-4B gel filtration and compared with the molecular weights of polysaccharide before hydrolysis.