Regeneration and growth of bulblets from bulblet-derived bulb-scale segment of Lilium longiflorum (cv Georgia) were investigated. Bulblets were initiated on bulb scales taken from bulblets on MS medium containing 0.05 mg/L 2,4D with 3% sucrose or 0.02 mg/L 2,4D with 9% sucrose. Benzyladenine promoted the differentiation of bulblets but inhibited the growth of differentiating bulblets. The growth of bulblet was promoted by supplying 1/2 strength 1/2 NH$_4$NO$_3$ concentration in MS medium containing 12% sucrose.
A method of collection and long-term storage of viable lily (Lilium longiflorum) pollen grains were developed for their in vitro growth and transformation in consistency. Petroleum ether, n-heptane, cyclohexane and benzene, as pollen collection medium, were determined less toxic to pollen growth in vitro than others tested. Pollen grains, however, lost their growth activity if stored in these solvents more than a week, So, a serial performance, that is, pollen grain collection in these solvents, air-drying and immediate transfer to low temperature condition was determined desirable for keeping the viability much longer. Pollen grains from this storage showed a successful transformation in vitro with a cDNA encoding tissue plasminogen activator (TPA) protein using Agrobacterium via vacuum infiltration according to western blotting analysis.
In an attempt to produce recombinant proteins using the pollen enriched in some plant species, a 1.7 kb DNA encoding urease subunit B (UreB) amplified by PCR from Helicobacter pylori urease gene cluster in pH808 plasmid was cloned to be expressed under CaMV35S promoter in lily (Lilium longiflorum) pollen tubes elongated in vitro. Lily pollen at early germinating stage was transformed with the ureB DNA using Agrobacterium via vacuum infiltration and, incubated for a full pollen tube growth 16 - 24 h in the dark in the presence of kanamycin. DNA integration and expression in the transgenic pollen were analyzed by the standard molecular techniques and the results suggest that the pollen in vitro may be employed as a protein factory in a disposable fashion.
This study was undertaken to study the effect of interspecific pollination of L. longiflorum and L. ${\times}$formolongi as the female parent with Oriental, Martagon and Trumpet group as the male parent by cut-style pollination. In the interspecific pollination of L. longiflorum cv. Gelria and Lorina with Oriental group as the male parent, the corresponding fruits obtained immature embryo were 1, 8, and the mean number of embryo per fruit were 11.0, 3.0, respectively. In the interspecific pollination of L. ${\times}$formolongi cv. Raizan, the corresponding fruits obtained immature embryo were 17, and the mean number of embryo per fruit were 4.0. On the other hand, in the interspecific pollination between L. longiflorum and L. ${\times}$formolongi as the female parent and Martagon and Trumpet group as the male parent, the pollination of L. ${\times}$formolongi as the female parent and L. henryi of Trumpet group as the male parent were obtained only 2 fruits, however no embryo.
A new strain of Cucumber mosaic virus (CMV) from easter lily (Lilium longiflorum), Ly2-CMV, was identified and compared to the well-characterized Mf-CMV (subgroupⅠ) and LS-CMV (subgroupⅡ) by host reaction in several indicator plants, dsRNA analysis, serological property, RT-PCR analysis, restriction enzyme profile of the PCR products and nucleotide sequence of coat protein (CP) gene. Remarkable differences in symptoms of Ly2-CMV were found between Mf-CMV or LS-CMV in tobacco plants and Datura stramoinium. Ly2-CMV induced small necrotic ringspots on the inoculated leaves of Nicotiana tabacum cvs. Xanthi nc and Burley 21 and D. stramonium, and failed to infect these species systemically. Of the indicator plants tested, N. benthamiana only reacted with systemic infection by inoculation of Lr2-CMV. In experiments of dsRNA analysis, serology and RT-PCR of CP gene, Ly2-CMV was come within subgroupⅠ CMV. However, restriction enzyme analysis of the PCR products using MspⅠ showed that Ly2-CMV was distinct to Mf-CMV. The CP gene of Ly2-CMV contains 657 nucleotides, and the nucleotide sequence is similar to that of Mf-CMV. There is also a high degree of conservation between their putative gene products in Ly2-CMV and Mf-CMV, with five amino acid changes in the 218 amino acids of the CPs.
Callus from scale segments of Lilium longiflorum 'Gelia' was effectively induced and maintained from unorganized tissue on the semi-solid medium by 0.42% Bacto agar with MS basal salts and vitamins of SH medium supplemented with 0.5 mg/L 2, 4-D, 1.0 mg/L NAA, 0.3 mg/L BA, and 3% sucrose. More than 5% of high sucrose level had inhibiting effect on regeneration capacity of formed callus and decreased callus growth. Various combinations of nitrogen did not effective to proliferate the ELC (Embryogenic-like callus), but friability of callus was increased in the medium containing only nitrate as nitrogen source. 5 mL conditioned medium into 30 mL fresh medium was good for cell growth. However friable cell aggregates during suspension culture had to form hard callus which hindered to establish suspention culture system. Addition of 2 g/L casein hydrolysate increased callus growth and friability of the hard callus. As a result of anatomical observation of callus, organogenesis such as shoots, roots and bulblets was independently induced from callus tissue. Somatic embryogenesis from callus tissue could be observed with low frequency.
Journal of Practical Agriculture & Fisheries Research
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v.23
no.2
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pp.25-32
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2021
There is a need to breed and distribute of domestic varieties for Lilium longiflorum because most of the lily bulbs cultivated in Korea were imported from foreign country. The L. longiflorum 'Ace' and 'Nellie White' collected from 1996 had been self-crossed from 1996 to 2010. In 2012, the L. longiflorum 'Bright LoSong' was developed as a F1 hybrid crossed between 'L2-17-4' and 'L2-16-6' that obtained by 7th self-fertilization. The 'Bright LoSong' was tested for homogeneity, regional adaptability test, consumer preference show from 2014 to 2015, and it was registered in 2017. The flower of 'Bright LoSong' is a trumpet shaped single flower with no spots.It has 5.8 flowers per plant, which is a relatively many number compared control 'Mount Carmel', Its flower diamater is 9.8cm, relatively a bit small size. And the flower inflorescence has umbel or raceme while the attitude of longitudinal axis is horizontal. The plant height is 38.4cm with 30.8 leaves per plant and 1.9cm of the leaf width. 'Bright LoSong' has a longer flowering period because of relatively small diameter or many number of flowers than those of the control 'Mount Carmel'. Thus, the 'Bright LoSong' showed a high consumer preference, and the cultivar has the advantage of being able to reproduce since the parents are pure lines.
Liquid shaking culture was conducted to investigate the proper culture conditions for the micropropagation of high quality lily using bulblets (3 mm in diameter) obtained from small scale culture. The combinations of 9% sucrose and 10 mM nitrogen or 6% sucrose and 20 mM $NH_4NO_3$ were effective on the growth and weight of micro-bulbs. However, the number of new bulbs was the highest when 20 to 40 mM $NH_4NO_3$ and 3% sucrose were added to the MS medium. The total fresh weight was increased effectively in MS medium supplemented with BA 0.2 mg/L alone under $60\;{\mu}mol{\cdot}m^2{\cdot}sec^{-1}$ intensity. Also bulblet weight was increased at $60\;{\mu}mol{\cdot}m^2{\cdot}sec^{-1}$ intensity, regardless of BA concentrations (0.2 and 2 mg/L) in the medium. The proper culture period of bulblet was about 2 month in liquid shaking culture.
Regulation of organ differentiation by growth regulators was investigated through the shoot-tip and bulb-scale cultures of Lilium longiflorum (cv Georgia). When shoot tips were placed on MS medium supplemented with 0.1 mg/L NAA alone or 0.1 mg/L NAA and 0.1 mg/L BA, axillary shoots were proliferated. Root diffentiation and growth were stimulated on the basal medium. Although growth regulation did not seem to be necessary when bulb scales were used as explants for shoot differentiation, its differentiation was promoted vigorously by 0.2 mg/L NAA, but suppressed by BA. Bulblets were formed from bulb-scale-derived plantlets cultured on MS medium supplemented with 0.1 mg/L IBA. And more bulblets were formed from the plantlet in MS medium supplying 0.2 mg/L NAA with 6% than3% sucrose
Chung, Sung Jin;Lee, Ka Youn;Yoon, A Ra;Jang, Ji Young;Kim, Jin Kug;Lee, Geung-Joo
Korean Journal of Agricultural Science
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v.41
no.2
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pp.101-106
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2014
This study was conducted to identify lily species native to Korea from formosan lily (Lilium formosanum) belonging to Longiflorum section. Due to flowering time, flower color and orientation, long shelf life and resistant to diseases, the native lily species can be valuable genetic resources for interspecific hybrids. One of the chloroplast genes, matK, was used to clone and sequence to explore any base changes. The matK was successfully amplified into 1,539 bp (94% of the gene) and phylogenetic tree demonstrated 6 clades for those 11 lily species used in this study. There were one or two base substitutions among 10 lilies native to Korea, while formosan lily native to Taiwan exhibited 6 base substitutions in matK gene, rendering it genetically distant. A restriction enzyme NruI recognized one of the six base changes, and digested the matK gene of 10 native lily species only, but not in formosan lily. The confirmed cleavage characteristic of the target region in matK gene was designed into a CAPS (cleaved amplified polymorphic sequences) marker which will be available to estimate compatibility of interspecific hybridization and to trace the pedigree when those native lilies are crossed with the formosan lily.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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