The lactobacilli associated with a fermented goat milk product from Tajikistan were isolated to characterize their technological properties and antibiotic resistances in order to assess their suitability for development as starter cultures. In this study, twenty three strains were identified by 16S rRNA sequencing as typical dairy-associated lactic acid bacterial strains, i.e. L. plantarum, L. pentosus, L. delbrueckii, L. helveticus and L. paracasei. These strains were generally susceptible to most antibiotics tested in this study and this allowed a selection of strains as safe starters. The draft genomes of four representative strains were sequenced and the number of contigs of the four assembled genomes ranged from 51 to 245 and the genome sizes ranged from 1.75 to 3.24 Mbp. These representative strains showed differences in their growth behavior and pH-reducing abilities in in vitro studies. The co-inoculation of these Lactobacillus spp. strains together with a yeast Kluyveromyces marxianus MBT-5698, or together with the yeast and an additional Streptococcus thermophilus MBT-2, led to a pH reduction to 3.4 after 48 h. Only in the case of fermentation inoculated with the co-culture, the viscosity of the milk increased noticeably. In contrast, fermentations with single strains did not lead to gelation of the milk or to a decrease in the pH after 24h. The results of this study provide a comprehensive understanding of the predominant lactobacilli related to Tajikistani fermented milk products.
A food-grade integration vector based on site-specific recombination was constructed. The 5.7-kb vector, pIMA20, contained an integrase gene and a phage attachment site originating from bacteriophage A2, with the ${\alpha}$-galactosidase gene from Lactobacillus plantarum KCTC 3104 as a selection marker. pIMA20 was also equipped with a controllable promoter of nisA ($P_{nisA}$) and a signal peptide-encoding sequence of usp45 ($SP_{usp45}$) for the production and secretion of foreign proteins. pIMA20 and its derivatives mediated site-specific integration into the attB-like site on the Lactococcus lactis NZ9800 chromosome. The vector-integrated recombinant lactococci were easily detected by the appearance of blue colonies on a medium containing $X-{\alpha}-gal$ and also by their ability to grow on a medium containing melibiose as the sole carbon source. Recombinant lactococci maintained these traits in the absence of selection pressure during 100 generations. The ${\alpha}-amylase$ gene from Bacillus licheniformis, lacking a signal peptide-encoding. sequence, was inserted downstream of $P_{nisA}\;and\;SP_{usp45}$ in pIMA20, and the plasmid was integrated into the L. lactis chromosome. ${\alpha}-Amylase$ was successfully produced and secreted by the recombinant L. lactis, controlled by the addition and concentration of nisin.
Park, Eui-Seong;Lee, Seung-Min;Lim, Yaung-lee;Park, Kun-Young
CELLMED
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v.8
no.3
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pp.11.1-11.6
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2018
In vitro anti-obesity effects of anti-cancer (AC) functional kimchi in differentiated 3T3-L1 adipocytes were studied. We constructed three experimental groups: Control, standardized kimchi (SK), and AC functional kimchi (A-FK) that included active ingredients and Lactobacillus plantarum. Kimchi extracts did not show any cytotoxicity in pre-adipocytes in the concentration range of 1 - 5 mg/mL. A-FK significantly reduced fat droplet formation and absorbance in differentiated 3T3-L1 adipocytes, as shown by Oil red O staining, compared to Control and SK (P < 0.05). SK and A-FK reduced adipo-/lipogenesis related genes such as $C/EBP{\alpha}$, SREBP-1, LPL, and $LXR{\alpha}$ compared to Control (P < 0.05). Especially, A-FK more greatly reduced SREBP-1 and LPL compared to SK (P < 0.05). A-FK up-regulated the ${\beta}$-oxidation related gene CPT-1c and down-regulated the pro-inflammatory cytokine IL-6 compared to Control (P < 0.05). Based on the results, A-FK exhibited anti-obesity effects by inhibiting fat droplet formation and adipo-/lipogenesis related genes by regulating the ${\beta}$-oxidation related gene CPT-1c and pro-inflammatory cytokine IL-6. In previous studies, A-FK kimchi already exhibited a strong anti-cancer effect. These results indicate that A-FK increased anti-obesity activity in this model system due to its functional ingredients and anti-cancer functionality.
Han Jin Oh;Jun Pyo Lee;Ji Hwan Lee;Yong Ju Kim;Jae Woo An;Se Yeon Chang;Young Bin Go;Dong Cheol Song;Hyun Ah Cho;Min Gyu Jeon;Yo Han Yoon;Jin Ho Cho
Korean Journal of Agricultural Science
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v.49
no.1
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pp.1-10
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2022
One hundred and twenty imprinting control region (ICR) mouse with initial body weights of 26 ± 2 g (5 weeks old) were assigned to six treatments for a two-week feeding trial to determine the effect of Pediococcus pentosaceus strains (PpS) which were isolated from three different types of Kimchi in ICR mice infected with Escherichia coli (Ec) or Salmonella Typhimurium (ST). Six groups constituted a normal control group without Ec or ST orally administrated (NC-; n = 20), a normal control group (NC+; n = 20), a group for which Lactobacillus plantarum was orally administrated (LP; n = 20), a group for which PpS A was orally administrated (PSA; n = 20), a group for which PpS B was orally administrated (PSB; n = 20), and a group for which PpS C was orally administrated (PSC; n = 20), the latter five groups constituted the Ec infected groups and the ST infected groups of 10 mice each. LP and PSC showed significantly (p < 0.05) improved growth performance compared to the other groups, except for NC- in the Ec infected mice group. NC+ showed significantly lower (p < 0.05) growth performance compared to the other groups, except for NC- in the ST infected mice groups. Regarding the Ec and Salmonella counts in the intestine, the LP and PSC groups had significantly lower (p < 0.05) counts than the NC+ and PSB groups. In conclusion, LP and PSC strains isolated from Kimchi can act as probiotics by inhibiting Ec and ST.
Joo, Young Ho;Kim, Dong Hyeon;Paradhipta, Dimas H.V.;Lee, Hyuk Jun;Amanullah, Sardar M.;Kim, Sang Bum;Chang, Jong Soo;Kim, Sam Churl
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.31
no.12
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pp.1897-1902
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2018
Objective: This study was conducted to evaluate the effect of homo or hetero fermentative inoculants on fermentation quality and aerobic stability of sweet potato vine (SPV) silage containing Italian ryegrass hay as moisture absorbent. Methods: The SPV was harvested at 15% dry matter, mixed with Italian ryegrass hay at 1:1 ratio on a fresh weight basis, and chopped to 3 to 5 cm length. After then, the chopped forage mixture was ensiled into 20-L mini silos in quadruplicate for 7, 48, and 100 days after application of microbial inoculants at $1.2{\times}10^5$ colony forming units (cfu)/g of forage following: no inoculant (CON), Lactobacillus plantarum as a homo fermentative (LP), Lactobacillus buchneri as a hetero fermentative (LB), and mixture of LP and LB at 1:1 ratio as a combo fermentative (MIX). Results: The LP and MIX silages had lowest pH (p<0.001) on 7 and 48 days, while MIX and CON silages had greatest lactate concentrations (p<0.05) on 7 and 48 days, respectively. Acetate concentrations were highest (p<0.01) in LB and MIX silages on 7 days, and in LB silage on 48 days, while lactate to acetate ratios were lowest (p<0.001) in LB silages. The chemical compositions and nutrient digestibility of silage ensiled for 100 days was not affected by inoculants. On 100 days of ensiling, LB silage had lowest (p<0.01) lactate concentration and lactate to acetate ratio, but highest acetate concentration. Aerobic stability was highest (p<0.001) in LB silage followed in MIX silage. On contrast, LB silage had lowest (p<0.05) lactic acid bacteria and mold. Conclusion: The results indicated that application of LB solely had a better effect on aerobic stability than not only LP, but also MIX. However, LP application did not show beneficial effects from the viewpoints of fermentation quality and aerobic stability compared to CON.
Heating characteristics for retort pouches of Kimchi heated in hot water were determined as a function of various parameters for processing. Processing conditions in laboratory and commercial retort were also evaluated on the basis of storage test. D values for Lactobacillus plantarum isolated from test sample ranged from $D^{1.08}\;to\;D^{0.18}$ and z value was $10.5^{\circ}C$. Thermal diffusivity of Kimchi increased from 1.15 to $1.44{\times}10^{-3}cm/s$ by blanching for 15 min at $80^{\circ}C$. The rate of heat penetration was significantly decreased with increasing the thickness of the pouch although the decreases was less significant below 1.0cm thickness. Increasing in the ratio of solid to syrup up to 90:10 proportionately decreased $f_h$ value, but above the ratio $f_h$ values were nearly constant.
Lee, Youn Hee;Ahmadi, Farhad;Kim, Young Il;Oh, Young-Kyoon;Kwak, Wan Sup
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.33
no.3
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pp.436-445
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2020
Objective: Ensiling is a simple and effective method for long-term preservation; however, less information exists about the ensilability characteristics of garlic stalk (GS). Therefore, the objectives were to examine the ensiling feasibility of GS. Methods: The GS was ensiled alone or inoculated with Lactobacillus plantarum KU5 in the presence or absence of 5% molasses and ensiled for 7, 14, and 28 d. As an alternative storage method, GS was co-ensiled with wet citrus pulp (CP) at different proportions (GS:CP: 70:30, 60:40, 50:50, and 40:60). Analysis was made on physicochemical, fermentative, and nutritional parameters. Results: The GS was found to be a biomass which is difficult to ensile. A combination of microbial inoculant and molasses was successful in the improvement of the silage fermentation quality of GS. Co-ensiling of GS with wet CP at the mixing ratio of 50:50 provided the most desirable silage fermentation parameters, including the substantial lactic acid formation, low final pH, minor effluent loss, and the more favorable organoleptic properties. Conclusion: Co-ensiling GS with CP appears to be a simple and viable method of conservation, enabling the more efficient utilization of these by-product resources over a prolonged period.
Cho, Seung Kee;Lee, Soo Jin;Shin, So-Yeon;Moon, Jin Seok;Li, Ling;Joo, Wooha;Kang, Dae-Kyung;Han, Nam Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.12
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pp.2100-2105
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2015
Probiotic bacteria must have not only tolerance against bile salt but also no genes for antibiotic resistance. Leuconostoc citreum is a dominant lactic acid bacterium in various fermented foods, but it is not regarded as a probiotic because it lacks bile salt resistance. Therefore, we aimed to construct a bile salt-resistant L. citreum strain by transforming it with a bile salt hydrolase gene (bsh). We obtained the 1,001 bp bsh gene from the chromosomal DNA of Lactobacillus plantarum and subcloned it into the pCB4170 vector under a constitutive P710 promoter. The resulting vector, pCB4170BSH was transformed into L. citreum CB2567 by electroporation, and bile salt-resistant transformants were selected. Upon incubation with glycodeoxycholic acid sodium salt (GDCA), the L. citreum transformants grew and formed colonies, successfully transcribed the bsh gene, and expressed the BSH enzyme. The recombinant strain grew in up to 0.3% (w/v) GDCA, conditions unsuitable for the host strain. In in vitro digestion conditions of 10 mM bile salt, the transformant was over 67.6% viable, whereas only 0.8% of the host strain survived.
Park, Soyeon;Kim, Chung Yoh;Park, Bokyoung;Kim, Kiju;Park, Keuntae;Han, Jong Kwon;Hahn, Tae-Wook
Korean Journal of Veterinary Research
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v.56
no.4
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pp.255-260
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2016
The Ecklonia cava Kjellman by-product (ECBP) as a feed additive was evaluated in improvement of productivity and immune enhancement against Salmonella Gallinarum (SG). Lohmann Brown chickens proved SG-free were randomly divided into 3 groups of 8 chickens each. Chickens were fed with the experimental diet treatment: T0, Non treatment-commercial feed; T1, commercial feed with 0.5% ECBP; T2, commercial feed with 0.1% Lactobacillus plantarum. In this study, we evaluated the effect of T1 and T2 groups on the body weight and protective efficacy against SG in chickens. The results demonstrated that treatment of T1 group as a feed additive affected significantly body weight gaining in chickens. In addition, T1 group showed a significant different colonization of SG when compared to T2 and T0 groups. We also studied that serum IgG and $interferon-{\gamma}$ levels were significantly different compared with other treatment groups. Therefore, we suggest that ECBP can be used as a good candidate of feed additives in chicken industry.
Total mixed ration (TMR) including concentrate diet and roughage together have been used for the ruminant animal. Relatively high concentrations of moisture and water soluble carbohydrate are representative feature of TMR. Those moisture and water can also provide a niche for bacterial growth. Therefore, a possible fermentation of TMR induced by micro-organism is generally accepted. The present study hypothesized that different lactic acid bacteria could alter fermentation of TMR and subsequently rumen fermentation. Three lactic acid bacteria, Lactobacillus paracasei (A), L. plantarum (B) and L. parabuchneri (C), were employed and 7 treatments under full factorial design were compared with control without inoculation. TMR for dairy cow was used. Significant alterations by treatments were detected at lactic acid and butyric acid contents in TMR (p<0.05). Treatment AC (mixture of A and C) and BC (mixture of B and C) showed great lactate production. Great butyrate production was found at treatment C. At in vitro rumen fermentation, treatments B, C and AB (mixture of A and B) showed significantly great total gas production (p<0.05). All treatments except treatments B and AB, showed less dry matter digestibility, significantly (p<0.05). Total volatile fatty acid production at treatment AC was significantly greater than others (p<0.05). In individual volatile fatty acid production, treatment AB and AC showed great acetate and propionate productions, significantly (p<0.05). This study investigated correlation between organic acid production in TMR and rumen volatile fatty acid production. And it was found that butyric acid in TMR had significant negative correlation with acetate, propionate, total volatile fatty acid, AP ratio and dry matter digestibility.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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