전국 각지에서 수집된 발표식품으로부터 젖산균을 분리하고 유해균인 B. cereus, L. monocytogenes, S. Typhimurium, S. aureus 및 S. epidermidis 균주에 대하여 생육 억제효능이 강한 L2167 균주를 선발하고, 16S rDNA 분석법을 이용하여 L. plantarum로 동정하였다. L2167 균주의 단백질 분획물을 제작하여 S. aureus 등 5종의 유해균 배양액에 첨가한 후, 전자현미경으로 관찰하였다. L. plantarum L2167 균주의 균체 단백질 분획물은 유해균의 생육을 억제하였으며, 생육 억제활성은 균체 내부에 함유된 단백질이 유해균의 세포막을 파괴하는 것에서 기인하는 것으로 추정되었다. L. plantarum L2167은 pH 5.5로 조절한 MRS 배지에서 35℃로 배양하였을 때, 가장 우수한 비성장속도를 나타냈으며, 대조구로 사용된 L. plantarum KCTC21004보다 NaCl에 대하여 민감한 특징을 나타내었다. 본 연구를 통하여 선발한 L. plantarum L2167 균주는 추가연구를 통하여 유해균의 생육을 효율적으로 억제할 수 있는 스타터 균주로서 개발될 수 있을 것으로 기대된다.
This study investigates the genotoxicity of crude antifungal compounds produced by Lactobacillus plantarum AF1 (L.plantarum AF1) and Lactobacillus plantarum HD1 (L. plantarum HD1) isolated from kimchi. The genetic toxicity of crude antifungal compounds was evaluated in bacterial reverse mutation in Salmonella and Escherichia spp., chromosome aberrations in Chinese hamster lung cells, and micronucleous formations in mice. In bacterial reversion assays with Salmonella Typhimurium TA98, TA100, TA1535, TA1537, and WP2uvrA, crude antifungal compounds did not increase the number of revertant colonies in both the absence and presence of the 59 metabolic activation system. In the chromosome aberration test with Chinese hamster lung cells, crude antifungal compounds showed no increase in the frequency of chromosome aberrations in the short-period test with/without the S9 mix or in the continuos test. In the in vivo mouse micronucleus assay, crude antifungal compounds showed no increase in the frequency of polychromatic erythrocytes with micronuclei. The results show that crude antifungal compounds produced by L. plantarum AF1 and L. plantarum HD1 did not induce any genotoxicity.
In order to investigate the molecular mechanism of $\gamma$-aminobutyric acid (GABA) production in lactic acid bacteria, we cloned a glutamate decarboxylase (GAD) gene from Lactobacillus plantarum using polymerase chain reaction (PCR). One PCR product DNA was obtained and inserted into a TA cloning vector with a T7 promoter. The recombinant plasmid was used to transform E. coli. The insertion of the product was confirmed by EcoRI digestion of the plasmid purified from the transformed E. coli. Nucleotide sequence analysis showed that the insert is a full-length Lactobacillus plantarum GAD and that the sequence is $100\%$ and $72\%$ identical to the regions of Lactobacillus plantarum GAD and Lactococcus lactis GAD sequences deposited in GenBank, accession nos: NP786643 and NP267446, respectively. The amino acid sequence deduced from the cloned Lactobacillus plantarum GAD gene showed $100\%$ and $68\%$ identities to the GAD sequences deduced from the genes of the NP786643 and NP267446, respectively. To express the GAD protein in E. coli, an expression vector with the GAD gene (pkk/GAD) was constructed and used to transform the UT481 E. coli strain and the expression was confirmed by analyzing the enzyme activity. The Lactobacillus plantarum GAD gene obtained may facilitate the study of the molecular mechanisms regulating GABA metabolism in lactic acid bacteria.
비피도박테리아 증식인자인 1,4-dihydroxy-2-naphthoic acid 생산 유산균주 LP2가 선행연구에서 자연치즈로부터 분리되었다. LP2 균주는16S rRNA 유전자 염기서열 분석에 의한 균주동정에서 Lactobacillus plantarum(99% 일치율)과 가장 높은 상동성을 나타내어 Lactobacillus plantarum LP2 균주로 명명하였다. LP2 균주의 배양 상등액은 Helicobacter pylori KCTC 12083 균주에 대하여 항균활성을 나타내었으며 이는 생산된 DHNA에 기인하는 것으로 추측되었다.
Young Sang Yu;Yan Fen Li;Xaysana Panyavong;Li Zhunang Wu;Jeong Ung Hwang;Li Li Wang;Hak Jin Kim;Won Jin Lee;Jong Geun Kim
한국초지조사료학회지
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제44권1호
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pp.50-57
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2024
Silage inoculants, crucial in modern silage production, comprise beneficial microorganisms, primarily lactic acid bacteria (LAB), strategically applied to forage material during ensiling. This study aimed to compare the effectiveness of various inoculants produced by different companies. Five treatments were evaluated, including a control group: T1 (Lactobacillus plantarum), T2 (Lactobacillus plantarum + Pediococcus pentosaceus), T3 (Lactobacillus plantarum + Pediococcus pentosaceus + Lactobacillus buchneri), T4 (Lactobacillus plantarum + Lactobacillus acidophilus + Lactobacillus bulgaricus), and T5 (Lactobacillus plantarum + Pediococcus pentosaceus + Enterococcus faecium). Italian ryegrass was harvested at the heading stage and treated with these silage inoculants. Samples were collected over a 60-day ensiling period. Co-inoculation with L. plantarum and P. pentosaceus (T2) resulted in significantly higher CP compared to the control group co-inoculation exhibited with resulted in Lactobacillus plantarum and Pediococcus pentosaceus in the T2 treatment exhibited higher CP content of 106.35 g/kg dry matter (DM). The T3 treatment, which included heterofermentative bacterial strains such as Lactobacillus buchneri, exhibited an increase in acetic acid concentration (11.15 g/kg DM). In the T4 treatment group, which utilized a mixed culture of Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus bulgaricus, the NH3-N/TN content was observed to be the lowest (20.52 g/kg DM). The T5 containing Enterococcus faecium had the highest RFV (123) after 60 days. Expanding upon these findings, the study underscores not only the beneficial effects of particular inoculant treatments on silage quality but also underscores the potential of customized inoculation strategies in maximizing nutrient retention and overall silage preservation.
본 연구에서는 단백질이 풍부한 원료 콩에 청국장에서 분리한 Bacillus subtilis와 김치에서 분리한 Lactobacillus plantarum을 이용한 혼합 발효를 통해 대두 발효 제품의 개발을 목표로 한 연구결과는 다음과 같은 분석 결과를 얻었다. Bacillus subtilis 단독 배양 발효 두유, Lactobacillus plantarum 단독 배양 발효 두유, 또한 두 균을 혼합 배양한 발효 두유의 항산화 활성을 상호 비교하였다. 그 결과, Bacillus subtilis 단독 배양 발효 두유의 총 폴리페놀 함량, DPPH 라디칼 소거능, 환원력, 아질산염 소거능이 각각 3580.91 ${\mu}g/m{\ell}$, 67.14%, 6.54$mg/m{\ell}$, 83.63%로 가장 높았다. 혼합 발효 두유의 기능성을 증진시키기 위하여 토마토 추출물을 첨가하여 발효 두유를 제조하였고, 토마토 에탄올 추출물을 0, 0.25, 0.5, 그리고 1.0% 첨가한 토마토 요구르트의 항산화력은 토마토 첨가량 농도 의존적으로 항산화력이 유의적으로 증가하였다. 특히 DPPH 라디칼 소거능은 토마토 무첨가구는 28.39%인데 비해, 토마토 요구르트는 33.46~57.12%까지 증가하였다.
The study investigated the effect of prefermentation of Bifidobacteria longum and Lactobacillus plantarum on baking quality. Firstly, two kinds of prefermentation were cultured using two lactic acid bacteria, Bifidobacteria longum and Lactobacillus plantarum. White pan bread baked with dough that had undergone these two prefermentation methods was compared with that baked with a non-prefermented control. The physicochemical properties of the three breads were analyzed, and then the physicochemical and sensory properties of the dough and baked bread were cross-analyzed. The pH prefermentation of Bifidobacteria longum was lower than that of Lactobacillus plantarum, whereas the titratable acidity was higher. Compared to the results from analyzing the prefermentation of Lactobacillus plantarum, the prefermentation of Bifidobacteria longum was expected to give positive effects on enriching the bread flavor by creating acetic acid at a level three- to eight-fold higher than that of Lactobacillus plantarum. According to the mixogram data, the optimum ending time for both Bifidobacteria longum prefermentation and Lactobacillus plantarum was around 4.5 to 5 minutes. The speed of dough materialization decreased with increasing prefermentation culture time. The baked bread with added Bifidobacteria longum had a higher water content. However, the other contents were not influenced by prefermentation, but were by culture time. The specific loaf volume, oven spring and baking lass rate all peaked at 20 hours after culture for both prefermentation cultures. The sensory test results indicated the highest prefermentation for the bread baked with prefermented Bifidobacteria longum doughwith a culture time ranging from 20 to 26 hours. In addition, the bread baked with prefermented Lactobacillus plantarum dough gave the highest preference when cultured for 20 hours.
This study was conducted to isolate and identify the lactic acid bacteria (LAB) from spent mushroom substrates (SMS) for the effective anaerobic fermentation to utilize SMS as an animal feed and to determine the optimal medium conditions for their growth. At first, a total of 23 strains were isolated from the ensiled SMS based on the LAB counts and pH tested. Then, a total of 16 strains which rapidly produce lactate and decreased the pH, were selected for a screening test. The optical density (OD), pH, and yellow clear zone were tested for the selected 16 strains. Among the strains, KU5 strain had wider yellow clear zone and lower pH and KU13 strain had higher OD at 24 hr of incubation and wider yellow clear zone compared to other strains and control strain (Lactobacillus plantarum KCCM 12116). Accordingly, KU5 and KU13 strains were finally selected. The KU5 and KU13 were identified as Lactobacillus plantarum by the 16S rRNA sequencing. The KU5 strain was named as Lactobacillus plantarum KU5, and the KU13 strain was named as Lactobacillus plantarum KU13. Lactobacillus plantarum KU5 and Lactobacillus plantarum KU13 were registered at the National Center for Biotechnology Information (NCBI). Access number of Lactobacillus plantarum KU5 was HQ542227 and that of Lactobacillus plantarum KU13 was HQ542228. The optimal medium conditions for growth of KU5 and KU13 were soybean meal 2% and formulated feed 2%, respectively.
갓김치로부터 분리된 유산균 5종(Lactobacillus acidophilus GK20, Lactobacillus brevis GK55, Lactobacillus paracasei GK74, Lactobacillus plantarum GK81, 및 Leuconostoc mesenteroides GK104)의 활성산소종에 대한 저항성 및 항산화 활성을 조사하였다. Hydrogen peroxide (0.5 mM)와 반응 5시간후 L. acidophilus GK20, L. brevis GK55, L. paracasei GK74 및 L. plantarum GK81들은 50% 이상의 생존율을 보였으며, superoxide anions에 의한 저해율은 L. acidophilus GK20와 L. paracasei GK74가 가장 낮았고, hydroxyl radical과의 반응에서는 L. paracasei GK74와 L. plantarum GK81이 가장 안정하였다. 한편, L. plantarum GK81는 실험 균주 중 가장 높은 DPPH 소거능($70.8{\pm}10.1%$)을 나타내었는데, 세포(IC)보다는 세포추출물(ICFE)의 활성이 더 높았다. 또한 L. plantarum GK81의 ICFE는 다른 균주들에 비해 높은 superoxide radical 소거능을 보였고, 이 균주의 IC와 ICFE에 의한 환원력은 BHA와 vitamin C보다 유의적으로 더 높게 나타났으며, L.paracasei GK74 IC의 환원력도 vitamin C와 비슷한 수준으로 나타났다. L. brevis GK55, L. paracasei GK74 및 L.mesenteroides GK104 IC의 $Fe^{2+}$-chelating 활성은 30% 이상이었고, L. plantarum GK81의 ICFE는 45% 이상의 활성을 나타내었다. 따라서 실험 균주 중 L. plantarum GK81은 다른 균들에 비해 ROS에 대해 비교적 안정하고, 항산화 활성도 가장 높은 것으로 확인되었다.
Lactobacillus plantarum은 그람 양성, 비운동성의 이형발효세균이며, 다양한 환경에서 서식하고 있다. L. plantarum SK151은 장관상피세포 흡착능이 우수한 균주로서, 김치로부터 분리되었다. SK151 균주의 유전체 길이는 3,231,249 염기쌍이며, G + C 함량은 44.6%이었다. SK151 균주의 유전체에는 비타민 B2 (리보플라빈) 생합성에 필요한 유전자군이 완벽하게 존재하고 있었으며, 세포 흡착과 관련된 유전자도 다수 존재하고 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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