Phenotypic changes after plasmid curing experiment suggested that the bacteriocin production phenotype ($Bac^{+}$) might be linked to a chromosomal DNA and the mucin production phenotype ($Muc^{+}$) might be linked to a 62.5 kilobase (kb) plasmid (pMUC62) in Lactobacillus plantarum 27 isolated from meat starter culture. The non-mucoid ($Muc^{-}$) variants were missing pMUC62 but they produced bacteriocin as the wild strain ($Bac^{+}$). There was no difference in antibiotic resistance and sugar fermentation patterns between the wild strain ($Bac^{+}$$Muc^{+}$) and the nonmucoid ($Bac^{+}$$Muc^{-}$) variants. Antimicrobial spectrum of bacteriocin produced by both wild strain and $Muc^{-}$ variant of Lb. plantarum 27 included strains of Pediococcus acidilactici (A, M, H), Pediococcus sp. isolated from meat, Lactobacillus sp. isolated from meat, Lb. plantarum NCDO 955 and Staphylococcus aureus 485. Neither of the tested Gram negative bacteria were inhibited by bacteriocin. Antimicrobial activity of crude bacteriocin was retained after autoclaving, DNase or catalase treatment and exposure from pHs 4 to 9 but was lost after treating with several proteolytic enzymes and exposure at pH 10.
김치의 L. plantarum의 생균제적 특성을 조사하기 위하여 김치에서 산생산과 성장능력 등이 우수한 25종의 Lactobacillus sp.를 분리하였고, API kit 분석에 의하여 L. plantarum을 동정하고 재차 16S rDNA 염기서열(99.9% 상동성)을 비교한 후 L. plantarum JK-01로 표기하였다. L. plantarum JK-01은 MRS broth에서 배양시 18시간 후 $2.9{\times}10^{10}CFU/ml$로 최대로 증식하는 빠른 성장특성을 나타냈으며 pH도 4.5로 조속히 하강하였다. 효소활성은 xylanase, amylase, protease, phytase의 순으로 높은 활성을 포함하고 있는 것으로 예측되었다. L. plantarum JK-01은 pH 2에서도 $1.36{\times}10^5CFU/mL$가 생존하였고, 1%의 담즙산에서도 약 $10^6CFU/mL$이상이 생존하여 내산성과 내담즙산성이 강한 것으로 나타났다. 또, $60^{\circ}C$에서도 $3.3{\times}10^3$ CFU/mL 정도로 생존하는 내열성이 있었으며, 대장균과 함께 배양시 18시간 후 대장균을 사멸시키는 것으로 나타났다. 이상의 결과로부터 분리한 L. plantarum JK-01은 생균제로서 충분히 이용가치가 있는 것으로 사료되었다.
본 연구는 국내 각 지역의 목장에서 수거한 원유에서 분리된 젖산균 M23 균주에 대해 tyrosinase 활성 저해율을 측정한 결과, mushroom에서 추출한 tyrosinase에서는 52.1%, Melanoma B16에서 추출한 tyrosinase에서는 32.0%로 나타났으며, 활성 저해율이 다른 상업균주와 시중 발효유에 비해 높게 나타남에 따라 tyrosinase 활성 저해효과가 우수한 균주로 선발하였다. 선정된 균은 Gram 양성, rod형태의 homo균이며, 당 발효실험과 16S rRNA 분석결과 Lactobacillus plantarum으로 판명되었고, L. plantarum M23으로 명명하였다. 발효유에 적합한 starter인지 확인하기 위해 생리적 특성을 조사하였다. L. plantarum M23은 배양온도 $40^{\circ}C$에서 빠른 생장을 보였고, pH 4.3에 도달하는데 17시간이 소요되었다. 16종의 항생제 중 vancomycin에 대해 내성이 높았으며, 효소활성실험에서 leucine arylamidase, ${\beta}-galactosidase$의 활성도가 높았다. 담즙 첨가시 약간의 영향을 받았으나 담즙에 대한 내성이 있는 것으로 나타났으며, pH 내성 실험결과 pH 2에서 큰 변화가 없음에 따라 내산성이 있었다. 항균력 시험에서는 E. coli에 대해 77.8%, S. typhimurium와 S. aureus에 대해 각각 86.5%, 83.8%의 억제력이 나타나 항균력이 높은 것으로 나타났다. 이러한 결과를 토대로 멜라닌 억제능이 우수한 기능성 발효유 제품의 스타터로 L. plantarum M23은 적합하다고 할 수 있다.
This study was carried out to investigate antimicrobial activities of ethanol extracts from 12 kinds of spices against Lactobacillus plantarum and Leuconostoc mesenteroides to kimchi fermentation. Lactic acid bacteria were isolated from fermenting kimchi, were identified as Leu. mesenteroides, Lac. sake, Lac. plantarum and Pediococcus pentosaceus. The ethanol extracts of cardamon, thyme and cumin among 12 spices showed antimicrobial activities against Lac. plantarum, while they did not showed the activites against Leu. mesenteroides through paper disc method. In addition, the growth of Lac. plantarum was inhibited in MRS broth containing each of cardamon(>4%), thyme(>4%) an cumin(>1%).
본 연구는 김치로부터 비만 억제능력이 있는 젖산균을 분리 및 동정하고, 이 균주의 생리적 특성을 규명하여 상업적으로의 이용가능성을 검토하고자 실시하였다. 이를 위해 Modified MRS 분별배지를 사용하여 노란색 집락을 형성하는 균주를 대상으로 각각 ${\alpha}-amylase$ inhibitory activity, ${\alpha}-glucosidase$ inhibitory activity와 lipase inhibitory activity가 우수한 균주를 선발한 결과 K6 균주가 최종 선발되었다. K6 균주는 ${\alpha}-amylase$ 억제활성 $96.78{\pm}3.29%$, ${\alpha}-glucosidase$ 억제활성 $92.55{\pm}9.62%$, lipase 억제활성 $85.17{\pm}0.79%$, 지방분화 억제활성 $27.4{\pm}1.4%$로 나타났으며, 동정결과 Lactobacillus plantarum으로 판명되었고, Lactobacillus plantarum K6으로 명명하였다. L. plantarum K6은 답즙산과 산성의 pH에서 모두 우수한 생존력을 나타내었고, 효소활성은 전반적으로 낮았으나 arylamidase와 ${\beta}-galactosidase$에 대해 비교적 높은 효소 활성을 나타내었다. 항생제 내성 실험 결과 vancomycin, ampicillin, polymyxin B에 내성이 있는 반면 erythromycin에 감수성을 나타냈으며, Escherichia coli, Salmonella Typhimurium, Listeria monocytogenes와 Staphyloccous aureus에 대해 각각 51.8%, 42.4%, 61.6%와 54.9%의 억제 효과를 지니고 있는 것으로 나타났다. 또한, 아민을 생성하지 않으며, 장부착성은 대조구인 L. rhamnosus GG보다 우수하였다.
Jang, Ki-Hyo;Han, Woo-Cheul;Ji, Seol-Hee;Kang, Soon-Ah;Shah, Nagendra P.
Food Science and Biotechnology
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제18권5호
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pp.1180-1185
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2009
This study was aimed to investigate the effect of glycine supplementation on the growth of Leuconostoc mesenteroides and Lactobacillus plantarum during kimchi fermentation. As preliminary experiment, the effect of supplementation of glycine (0-2.0%, w/v) to MRS medium on the growth of Leuc. mesenteroides and L. plantarum was evaluated. At 2.0% glycine in the MRS medium, cell growth rate was inhibited by 79% for L. plantarum and 27% for Leuc. mesenteroides. Subsequently, different concentrations of glycine (0, 0.5, and 2.0%, w/v) were applied for kimchi fermentation for 21 days, at $5^{\circ}C$. At day 14, the pH and titratable acidity (TA) of kimchi supplemented with 2.0% glycine were 4.83 and 0.38%, respectively, whilst the control kimchi had a pH of 4.49 and TA of 0.44%, respectively. The ratio of Leuconostoc/ Lactobacillus in kimchi increased as the concentration of glycine increased. The results show that the presence of glycine affected the growth of the 2 lactic acid bacteria, particularly of L. plantarum.
피부에는 여러 종의 미생물들이 군집을 이루며 서식하고 있고, 서로 상호작용을 하며 균형을 유지하고 있다. 하지만, 여드름, 건선 및 아토피 피부염과 같은 질병 상태에서는 피부 미생물의 균형이 깨져 건강한 피부와는 다른 미생물 군집 구성을 보인다. 피부 미생물 군집 구성의 조절은 이러한 피부 질환에 대한 잠재적인 치료 방법이 될 수 있다. Quorum sensing (QS)은 세포간 전달인자로, QS을 조절하면 유해균의 바이오필름 형성이나 효소 분비등을 억제할 수 있고, 이 역시 피부 미생물 군집 구성에 영향을 준다. 이번 연구에서는 아모레퍼시픽의 특허 성분인 유산균 발효 용해물(Lactobacillus plantarum APsulloc 331261, KCCM 11179P 이용)의 QS억제능력 및 피부 유익균과 피부 유해균의 생장에 미치는 영향을 확인하였다. 유산균 발효 용해물 10 ㎍/mL 처리시, QS에 의해 제어되는 Chromobacterium violaceum의 자주색 안료 생산을 대조군 대비 27.4% 감소시켰다. 또 피부 유익균인 Staphylococcus epidermidis의 생장을 대조군 대비 12% 증가 시켰고, 피부 유해균인 Pseudomonas aeruginosa의 생장을 38.5% 감소, 바이오필름 형성을 17.7% 감소시켰다. S. epidermidis를 같은 속(genus)에 포함되어 있는 대표적인 피부 유해균 Staphylococcus aureus와 함께 공배양 하였을 때 S. epidermidis의 생장은 대조군 대비 134% 증가시켰고, S. aureus의 생장은 13% 억제시켰다. 이러한 결과들을 종합하였을 때 L. plantarum APsulloc 331261을 이용한 발효 용해물은 피부 미생물의 균형을 조절해 줄 수 있는 화장품 원료로 유용하게 사용 될 수 있다고 사료된다.
This study was conducted to optim ize the composition of CEM (cabbage extract medium) and cryoprotectants on the growth of Lactobacillus plantarum, a probiotics growing in plant and milk. For this, we analyzed the growth characteristics of Lb. plantarum in CEM and subsequently optimized the medium composition by addition of carbon, nitrogen sources and buffering agents. Among carbon sources, glucose showed the best result to increase the cell density after dilution of CEM. When 0.5% yeast extract and 1% soy peptone were supplemented in the diluted CEM, Lb. plantarum grew up to the maximum cell density. Addition of buffering agents in CEM was not significantly effective to increase the cell density. Meanwhile, addition of 12% skim milk, 5% sucrose and 0.5% glycerol showed a cryoprotective effect against cell damage of Lb. plantarum during freeze drying process showing high survival rate after 150 days. This optimized CEM can be used for economical production of bacterial cells particularly originated from a plant-related ecosystem.
Chae, Jong Pyo;Pajarillo, Edward Alain;Hwang, In-Chan;Kang, Dae-Kyung
한국축산식품학회지
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제39권1호
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pp.13-22
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2019
This study aimed to develop a bile-responsive expression system for lactobacilli. The promoters of four genes, encoding phosphoenolpyruvate-dependent sugar phosphotransferase (mannose-specific), L-lactate dehydrogenase (LDH), HPr kinase, and D-alanine-D-alanine ligase, respectively, which were highly expressed by bile addition in Lactobacillus johnsonii PF01, were chosen. Each promoter was amplified by polymerase chain reaction and fused upstream of the ${\beta}$-glucuronidase gene as a reporter, respectively. Then, these constructs were cloned into E. coli-Lactobacillus shuttle vector pULP2, which was generated by the fusion of pUC19 with the L. plantarum plasmid pLP27. Finally, the constructed vectors were introduced into L. plantarum for a promoter activity assay. The LDH promoter showed the highest activity and its activity increased 1.8-fold by bile addition. The constructed vector maintained in L. plantarum until 80 generations without selection pressure. A bile-responsive expression vector, $pULP3-P_{LDH}$, for Lactobacillus spp. can be an effective tool for the bile-inducible expression of bioactive proteins in intestine after intake in the form of fermented dairy foods.
본 연구는 막걸리로부터 ${\gamma}$-amino butyric acid (GABA) 생성 유산균을 분리 및 동정하고 최적 GABA 생산조건을 확립하는데 그 목적이 있다. 막걸리로부터 64균주의 유산균은 MRS 배지에서 성장된 집락의 색과 모양의 특성에 따라 분리하였다. 분리균주의 GABA 생산은 1% MSG가 첨가된 MRS 액체배지에서 배양하여 TLC와 HPLC 방법에 의해 평가되었다. B-134 균주는 GABA생성을 위한 우수균주로 선발하였다. 16S rRNA 유전자 및 glutamate decarboxylase B (gadB) 유전자의 염기서열분석을 통하여, B-134 균주는 Lactobacillus plantarum subsp. plantarum B-134 균주로 명명하였다. GABA 생성을 위한 온도, pH, NaCl 및 MSG 농도를 달리하여 최적배양조건을 조사하였다. 그 결과 B-134 균주의 최적배양 조건은 온도 $37^{\circ}C$, pH 5.7, NaCl 농도 0% (w/v), 그리고 MSG 농도 3% (w/v)로 결정되었으며 본 조건에서 48시간 배양시 25 mM의 GABA를 생산하였다. 이러한 결과로부터 B-134 균주는 GABA함유 건강기능식품개발을 위한 유용한 균주로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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