The partial 165 rDNA sequences of 6 lactic acid bacterial strains isolated from Kimchi were determined. Two strains were Leuconostoc mesenteroides and the rest were incorrectly classified and turned out to be Lactobacillus. As the case of dairy lactic acid bacteria, the strains isolated from Kimchi also had cell-envelope proteinase (CEP) activity. As the result of partial CEP gene amplification with CEP-specific primers, the expected 1.2-kb amplificate was obtained not from Leu. mesenteroides but from Lactobacillus strains. The deduced amino acid sequence of PCR product amplified from the genomic DNA of Lactobacillus pentosus KFR1821 showed 95% and 92% homology with those of PrtPs from Lactococcus lactis subsp. cremoris and Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, respectively. The PCR amplificate was used as a probe and the result of Southern hybridization illuminated the location of CEP gene in chromosomal DNA of Lb. pentosus KFR1821.
Our aim was to ferment soymilk using lactic acid bacteria that showed protease activity and to optimize the condition for fermentation. In total, 108 strains of protease-producing lactic acid bacteria were isolated from various fermented foods such as kimchi and jeotgal, and among them, 29 strains displaying the highest protease activity were selected for further study. From these 29 strains, strain MK1, whose protease activity was 126 $mU/mL{\cdot}min$, was selected as the optimal fermentation strain owing to its high ability to digest soymilk protein. It was henceforth labeled as Lactobacillus paracasei MK1. The optimum conditions for the fermentation of soymilk by using L. paracasei MK1 were determined to be as follows: 30 h of fermentation time at a temperature of $30^{\circ}C$, and at a pH of 6.0 in the initial growth medium.
Kim, Soo-Young;Kim, Jong-Doo;Son, Ji-Soo;Lee, Si-Kyung;Park, Kab-Joo;Park, Myeong-Soo
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.43
no.4
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pp.446-452
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2011
Total 480 lactic acid-producing bacteria were isolated from five kinds of kimchi, and their antibacterial activity was tested against Salmonella enterica serovar Typhimurium, Bacillus subtilis, and Pseudomonas aeruginosa using an agar diffusion assay. Among them, 340 isolates showed a halo on MRS agar against one or more indicator strains, which were identified using multiplex PCR, an API 50CHL kit, and a 16S rDNA sequence analysis. As a result, 169 Lactobacillus plantarum, 20 Lactobacillus fermentum, two Lactobacillus paracasei ssp. paracasei, two Lactobacillus sp., and 15 Pediococcus sp. were identified. This may be the first report on the isolation of antibacterial Lactobacillus fermentum from kimchi.
Various probiotic Lactobacillus spp. are known to produce exopolysaccharide (EPS) which has potential health promoting functionality. A Lactobacillus paracasei strain producing EPS was isolated from healthy human. This strain, named L. paracasei KLB58, was grown on modified MRS medium. Experiments were conducted under various growth conditions to optimize the EPS production. Our study showed that incubation temperature played an important role in EPS production. When incubation temperature was changed from $37^{\circ}C$ to $25^{\circ}C$, the increase of EPS production (28.1 mg/ml) was the highest in our experiment. The type of carbon source in the medium also affected EPS production. Galactose was the most effective for EPS production among the carbon sources examined. Using galactose, glucose, lactose and sucrose, the amount of released EPS was 38.9 mg/ml, 35.6 mg/ml, 21.76 mg/ml and 16.9 mg/ml, respectively. However, acidity in growth medium inhibited EPS productivity due to the low growth yield. When grown at pH 4, L. paracasei KLB58 could only produce EPS of 14.6 mg/ml. When the initial amounts of nitrogen and carbon sources were examined, EPS production was not significantly affected by nitrogen source while carbon source affected considerably.
Kim, Sun-Joong;Seo, Hye-Kyung;Kong, Won-Sik;Yoon, Min-Ho
Journal of Mushroom
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v.11
no.4
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pp.187-193
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2013
A galactose fermentation bacterium producing lactose from red seaweed, which was known well to compromise the galactose as main reducing sugar, was isolated from button mushroom bed in Buyeo-Gun, Chungchugnamdo province. The lactic acid bacteria MONGB-2 was identified as Lactobacillus paracasei subsp. tolerans by analysis of 16S rRNA gene sequence. When the production of lactic acid and acetic acid by L. paracasei MONGB-2 was investigated by HPLC analysis with various carbohydrates, the strain MONGB-2 efficiently convert the glucose and galactose to lactic acid with the yield of 18.86 g/L and 18.23 g/L, respectively and the ratio of lactic acid to total organic acids was 1.0 and 0.91 g/g for both substrates. However, in the case of acetic acid fermentation, other carbohydrates besides galactose and red seaweed hydrolysate could not be totally utilized as carbon sources for acetic acid production by the strain. The lactic acid production from glucose and galactose in the fermentation time courses was gradually enhanced upto 60 h fermentation and the maximal concentration reached to be 16-18 g/L from both substrates after 48 h of fermentation. The initial concentration of glucose and galactose were completely consumed within 36 h of fermentation, of which the growth of cell also was maximum level. In addition, the bioconversion of lactic acid from the red seaweed hydrolysate by L. paracasei MONGB-2 appeared to be about 20% levels of the initial substrates concentration and this results were entirely lower than those of galactose and glucose showed about 60% of conversion. The apparent results showed that L. paracasei MONGB-2 could produce the lactic acid with glucose as well as galactose by the homofermentation through EMP pathway.
This study is focused on establishing the optimal conditions to enhance the production of antilisterial substances by Lactobacillus paracasei BK57 isolated from Baikkimchi. In addition, the growth and in situ lactic acid and bacteriocin production of this strain were investigated during the manufacture of fresh cheese. And then the efficacy of using Lactobacillus starter as a protective culture to improve the safety of fresh cheese against Listeria monocytogenes KCTC 3569 was estimated. Maximum growth rate and activity of antibacterial substances were obtained in Lactobacilli MRS broth at $37^{\circ}C$ with controlled pH 6.0 after 30 h of incubation under aerobic condition. However, the growth rate and antimicrobial activity of bacteriocin produced in whole milk supplemented with yeast extract (2.0%) as a substrate were lower than those obtained in MRS broth. Live cells and cell-free culture supernatant of BK57 strain were effective in the suppression of L. monocytogenes in milk, whereas the inhibitory of the bacteriocin obtained from BK57 strain was higher in BHI broth than in milk. During storage at $4^{\circ}C$ and $15^{\circ}C$ for 6 days, no significant difference was found in the cell viability and antimicrobial activity of BK 57 strain in fresh cheese. In samples held at two temperatures, there was at least a 15% reduction in the numbers of the pathogen in fresh cheese artificially contaminated with approximately $10^5CFU/ml$ of L. monocytogenes within 6 days. Our results demonstrated the usefulness of L. paracasei BK57 having antilisterial activity as a biopreservative in the cheese making process.
In previous study, we have isolated Lactobacillus spp. from healthy human vagina and examined various characteristics such as antimicrobial substance production and exopolysaccharide (EPS) production. It is known that an EPS is an important factor of Lactobacillus spp. to adhere to epithelial cell. We have selected L. paracasei KLB58 having high antimicrobial activity and EPS production. In this study, we performed NTG (1-Methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidine) mutagenesis to isolate an EPS deficienct mutant of KLB58 showing high cell surface hydrophobicity (CSll) compared to wild type strain. By monitoring the kinetics of the partition with hexadecane the EPS mutant was found to be far more hydrophobic than the wild type strain ; the CSH of the EPS mutant was 0.5-fold higher than the wild type strain.
Kim, Da-Young;Kim, Hong Seok;Yoo, Jung Sik;Cho, Yoon Ah;Kim, Cheol-Hyun
Journal of Dairy Science and Biotechnology
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v.38
no.2
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pp.89-98
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2020
The purpose of this study was to investigate the probiotic properties of lactic acid bacteria (LAB) isolated from a Korean traditional food kimchi. Gram staining was performed by Macrogen (Macrogen, Inc.) for identification of the LAB. Five strains of LAB were identified, including DKGF9 (Lactobacillus plantarum), DKGF1 (L. paracasei ), DKGF8 (L. casei ), DK207 (L. casei ), and DK211 (L. casei ). The biological activities of the isolated strains were assessed. The results showed that heat resistance of the strains was similar to or higher than the commercial strain L. acidophilus LA-5. Indirect testing of the ability of the strains to attach to the mucin layer revealed that DKGF9, DKGF1, and DKGF8 have high binding affinities for the mucous layer. All strains showed antimicrobial activity similar to or higher than the commercial strain LA-5. In proteolysis experiments, the diameters of proteolysis zones of the five strains increased in the period of 24-72 h, with DKGF1 exhibiting the largest zone diameter. Three strains were selected based on their antioxidant activities. Among the five isolated strains, L. paracasei DKGF1 showed potential probiotic activity, and thus, it may be useful for the development of health-promoting products.
Ha, Gwangsu;Kim, JinWon;Im, Sua;Shin, Su-Jin;Yang, Hee-Jong;Jeong, Do-Youn
Journal of Life Science
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v.30
no.6
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pp.522-531
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2020
The aim of this study was to establish the optimal medium composition for enhancing L(+)-lactic acid (LLA) production using response surface methodology (RSM). Lactobacillus paracasei SRCM201474 was selected as the LLA producer by productivity analysis from nine candidates isolated from kimchi and identified by 16S rRNA gene sequencing. Plackett-Burman design was used to assess the effect of eleven media components on LLA production, including carbon (glucose, sucrose, molasses), nitrogen (yeast extract, peptone, tryptone, beef extract), and mineral (NaCl, K2HPO4, MgSO4, MnSO4) materials. Glucose, sucrose, molasses, and peptone were subsequently chosen as promising media for further optimization studies, and a hybrid design experiment was used to establish their optimal concentrations as glucose 15.48 g/l, sucrose 16.73 g/l, molasses 39.09 g/l, and peptone 34.91 g/l. The coefficient of determination of the equation derived from RSM regression for LLA production was mathematically reliable at 0.9969. At optimum parameters, 33.38 g/l of maximum LLA increased by 193% when compared with MRS broth as unoptimized medium (17.66 g/l). Our statistical model was confirmed by subsequent validation experiments. Increasing the performance of LLA-producing microorganisms and establishing an effective LLA fermentation process can be of particular benefit for bioplastic technologies and industrial applications.
Exopolysaccharides (EPSs) are microbial polysaccharides that are released outside of the bacterial cell wall. There have been few studies on EPS-producing lactic acid bacteria that can enhance macrophage activity and the underlying signaling mechanism for cytokine expression. In the current study, EPS-overproducing Lactobacillus (L.) paracasei KB28 was isolated from kimchi and cultivated in conditioned media containing glucose, sucrose, and lactose. The whole bacterial cells were obtained with their EPS being attached, and the cytokine-inducing activities of these cells were investigated. Gas chromatography analysis showed the presence of glucose, galactose, mannose, xylose, arabinose, and rhamnose in EPS composition. EPS-producing L. paracasei KB28 induced the expression of tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-6, and IL-12 in mouse macrophages. This strain also caused the degradation of $I{\kappa}B{\alpha}$ and phosphorylation of the major MAPKs: Jun N-terminal kinase (JNK), p38, and extracellular signal-regulated kinase (ERK)1/2. The use of pharmacological inhibitors showed that different signaling pathways were involved in the induction of TNF-${\alpha}$, IL-6 and IL-12 by L. paracasei KB28. Our results provide information for a better understanding of the molecular mechanisms of the immunomodulatory effect of food-derived EPS-producing lactic acid bacteria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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