Lactobacillus bulgaricus KFCC 35463과 Kluyveromyces fragilis KFCC 35458 을 두유 배지에 접종하여 생육과 산생성의 특성을 조사한 결과 두유를 L. bulgaricus로 단독발효하는 것보다 K. fragilis와 혼합발효하는 것이 산생성량이 많고 산생성속도가 빨랐다. 이 두 균을 혼합배양하여 산생성을 높이기 위한 배양조건을 검토한 결과는 다음과 같았다. 두유에 sucrose를 1.0% 또는 탈지분유를 1.5% 첨가하고 L. bulgaricus와 K. fragilis 를 $O.\;D._{660}$ 값으로 1 : 2가 되게 접종하여 $35{\sim}37^{\circ}C$의 온도에서 24시간 배양하는 것이 효과적이었다. L. bulgaricus를 단독 또는 K. fragilis와 혼합배양할 때의 산도는 각각 0.14%와 0.41%로서 혼합배양한 것이 2.9배 높았다. sucrose를 1.0% 첨가한 두유를 사용하였을 경우는 각각 0.13%와 0.70%로서 혼합배양한 것이 5.4배 높았다. 그리고 두유에 탈지분유를 1.5% 첨가하였을 경우는 단독해양한 것과 혼합배양한 것 모두가 0.84% 수준이었고 탈지분유를 1.5% 이하로 첨가하였을 때만 단독배양한 것보다 흔합배양한 것이 산도가 높았다.
Lactobacillus bulgaricus 균체(菌體)의 고정화방법(圖定化方法)으로서 polyacrylamide gel과 Al- Ca-, Fe- 및 Mg-alginate bead에 대하여 고찰하고 이중 가장 활성이 좋은 것은 Ca-alginate bead 이었으며 입경(粒經) 2m/m로 형성시킨 Ca-alginate bead로 고정화(圖定化)시킨 균류(菌類)의 경우, 4.5% lactose 용액 및 whey에서의 lactose 분해실험 결과, 생균(生菌)에 대비(對比)한 상대적 활성은 각각 최고 28% 및 18% 이었다.
L.bulgaricus KFCC 35462와 S.uvarum KFCC 32021을 두유에 혼합하였을 때 L.bulgaricus의 생육은 크게 촉진되었으나 젖산발효는 거의 촉진되지 않았고, S.uvarum의 생육과 알코올 발효는 억제되지 않았다. 젖산균과 효모의 혼합배양에 의한 두유음료의 산도증가 등의 발효적성의 향상에는 젖산균에 의한 효모의 억제작용 등의 배합균주 상호간의 특이적 작용이 중요하였다.
우유에 쑥 추출물을 수준별로 첨가하고 2종(Lac. bulgaricus와 Str. themophilus)의 젖산균을 단독 또는 혼합 배양하여 호상 요구르트를 만들고, 쑥 추출물의 첨가가 젖산균의 생육과 산 생성 및 요구르트의 관능적 특성에 미치는 영향을 조사하였다. 쑥 추출물의 첨가로 인해 요구르트의 젖산균 증식과 산 생성이 대조군(우유 요구르트)보다 현저하게 촉진되었으며, 특히 Lac. bulgaricus와 Str. themophilus를 혼합 배양한 경우에 산 생성이 가장 우수하여 산도는 1.921%이었고, Lac. bulgaricus를 단독 배양한 경우에 생균수가 가장 높아 7.72$\times$$10^{8}$ CFU/ml를 나타내었다. 관능검사 결과를 보면 쑥 추출물 첨가 요구르트의 경우 대조군에 비해 색깔, 향기, 맛, 조직감, 후미 및 전체적인 기호도 등 관능성이 대체로 우수한 것으로 나타났으며, Lac. bulgaricus를 단독 균주로 하여 쑥 추출물을 5% 첨가하여 제조한 요구르트의 선호도가 가장 높게 평가되었다. 이상의 결과로 볼 때 우유에 쑥 추출물의 첨가는 기호성이 높고 식품 영양학적으로 우수하여 그 상품적 가치가 인정되는 새로운 요구르트의 제조가 가능할 것으로 생각된다.
유산균의 균주개량방법의 일환으로 photoplast fu-sion 기법과 electrofusion법을 이용하여 protease 활성, lipase 활성, 내열성, 내산성 등이 우수한 L. bulgaricus와 bacteriocin을 생산하는 L. acidophilus 간의 융합시켜 얻은 융합주들의 생리학적 성질을 검토하였다. 산 생성능, 내열성, 내산성 protease, lipase 활성 등 L. bulgaricus가 L. acidophilus보다 우수하였다. L. bulgaricus는 lactose와 sorbos를 이용하였으나. mal-tose 와 dorbitol을 이용하지 못하는 반면 , L. acidophilus는 matose를 이용하고 lactose 와 sorbose를 이용하지 못하였다. 융합주 가운데서는 367810번이 모균주의 발효능 특성을 함께 지님으로서 재조합체임을 확인 할 수 있었으며, sorbitol의 경우 모균주에서는 발효능이 전혀 나타나지 않았음에도 불구하고 융합주 4, 7번이 발효능을 나타내어 융합과정에서 새로운 형질을 획득하기도 한다는 사실을 알 수 있었다. Lactase 활성은 모균주 모두 높은 $\beta-galactosidase$ 활성을 보였으나, $phospho-\beta-galactosidase$ 활성은 거의 없었으며 융합주들도 다소 차이는 있었지만 모균주와 유사한 효소활성을 나타내었다. 발효에 있어서 key enzyme으로 작용하는 protease. lipase 등의 효소활성도 모균주의 활성보다 우수한 융합주도 존재하였다.
An interspecific fusant was made from the protoplasts of two strains of Lactobacillus genus (L. bulgaricus and L.helveticus). And in order to test the applicability of the fusant in manufacturing the cheddar cheese, functional properties of the strain was examined by determining acid-producing activity, three important enzyme activities and volatile free fatty acid-producing activity. The recombinant strain did not exhibit greatly increased acid-porducing activity. Lipase and volatile free fatty acid-porducing abilities of the fusant, however, were remarkably higher than those of the two parental strains. The fusant actually porduced the cheese porduct of the highest ammount of total volatile free fatty acid after 7 days ripening at 10$^{\circ}C$. Finally, the cheddar cheese ripened with this strain was also evaluated to be high preference and flavor intensity by organoleptic panel tests.
Kim, Hyun-Jin;Kim, Ji-Hyun;Son, Jeong-Hwa;Seo, Hyo-Jin;Park, So-Jin;Paek, Nam-Soo;Kim, Sung-Koo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제14권3호
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pp.503-508
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2004
The antimicrobial substance produced by Lactobacillus bulgaricus was inactivated by protease. It showed inhibitory activity against Staphylococcus aureus ATCC6538, Streptococcus agalactiae ATCC14364, some Gram-positive and Gram-negative bacteria, and characteristics of a bacteriocin. The optimal temperature and culture time for the production of bacteriocin were $30^{\circ}C$ and 10 h, respectively, in the culture of L. bulgaricus. The bacteriocin production started in the exponential phase and reached a maximum at the early stationary phase. Using Staph. aureus ATCC6538 and Strep. agalactiae ATCC14364, known as common bovine mastitis pathogens, as indicator strains for determination of the bacteriocin activity, the antimicrobial activity of the bacteriocin was found to be stable in acidic and neutral pH's (2- 7) even at lOOT, whereas it was lost at high pH (10- 11) and $100^{\circ}C$. The mode of action for the antimicrobial activity was bacteriocidal, and the molecular weight determined by SDS-PAGE and overlay method was 14 kDa.
To evaluate bile salt-tolerance of lactic acid bacteria (LAB, Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus casei IFO 3533, Streptococcus thermnophilus KCTC 2185, Lactobacillus lactis ATCC 4797, and Lactobacillus bulgaricus ATCC 11842), We investigated the survivals, acid production and $\beta $-galactosidase activity of LAB under anaerobic broth system. Cellular permeability of LAB and their cellular retention of $\beta $-galactosidase were also examined in the same system. Although the growth of LAB was slightly suppressed by 0.3% bile salt, they showed normal growth curve. Streptococcus thermophilus KCTC 2185 was significantly more resistant to bile salt than the others. The $\beta $-galactosidase activity from Streptococcus thermophilus KCTC 2185 and Lactobacillus bulgaricus ATCC 11842 and their cellular retention of $\beta $-galactosidase decreased by 0.3% bile salt. The cellular permeability of LAB in the presence of bile salt increased significantly.
본 연구는 기능성 발효유로서 티벳산 발효유에서 분리한 효모(Kluyveromyces marxianus)와 유산균(Lactobacillus bulgaricus)의 혼합스타터를 이용한 발효유를 제조하여 배양 기간별 균수 측정, pH, 적정산도, ethanol 함량, 항암 활성에 대해 알아보았다. 배양은 $30^{\circ}C$에서 curd가 형성되는 시점에 마치게 되는데 이때의 최종 산도는 0.68, pH는 4.5 이었다. 배양 36시간 후의 균수는 K. marxianus는 $5.3{\times}10^9 CFU/mL$, L. bulgaricus는 $3.2{\times}10^9 CFU/mL$ 이었고 ethanol 함량은 0.35%까지 증가하였다. 36시간 배양하여 제조된 발효유의 항종양 활성은 HEp-2에 대해서는 86.6%, HEC-1B에 대해서는 70.3%, SW-156에 대해서는 60.4%, SK-MES-1에 대해서는 57.14%의 항종양 활성을 나타내었다. 이상의 결과 기존의 유산균 발효유에 효모를 첨가한 알코올 발효유의 제조가 가능하며, 제품의 항종양 활성의 측면에서도 높은 기능성을 나타내는 것으로 나타났다.
Onion extracts were tested for effects on the growth and lactic acid production of Lactobacillus bulgaricus in the medium containing mercury. The media containing mercury were added with onion extracts and inoculated with the bacterium and then incubated at $39^{\circ}$ for four days. All of the onion extracts examined increased the growth and lactic acid production of the bacterium in the medium containing mercury. At the addition of the edible portion extract of onion to the medium containing 5 ppm, 10 ppm and 20 ppm mercury, the higher the concentration of the onion extract was added, the greater the increasing effect on the growth and lactic acid production. The brown peel extract of onion increased the growth and lactic acid production of the bacterium in the medium containing mercury at all concentrations. The higher the concentration of the extract added, the more effective the increasing effect. The onion solutions of edible portion and brown peel extracted at $90^{\circ}\;to\;100^{\circ}$ showed more desirable effects than those extracted at the room temperature. Among four kinds of the onion extracts, the brown peel solution extracted at $90^{\circ}\;to\;100^{\circ}$ was the most effective in increase of the growth and lactic acid production in the medium containing mercury.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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