Eight strains of Lactobacilli(a, b, b', c, d, e, f and g) were isolated from seven Korean liquid-yogurts(A, B, C, D, E, F and G), and identification and tolerance-test to digestive fluids were carried out. Isolate a from yogurt A and isolate a from yogurt E were identified as L. casei, isolate b from yogurt B as L. acidophilus, isolate d from yogurt D as L. bulgaricus, isolate f from yogurt F as L. helveticus, and isolate b' from yogurt B, isolate c from yogurt C and isolate g from yogurt G as L. jugurti, respectively. Isolate f(L. helveticus) and c(L. jugurti) showed high tolerance to artificial gastric juice but didn't to bile acid. Isolate b(L. acidophilus), a(L. casei), and e(L. casei) showed high tolerance to both artificial gastric juice and bile acid, but isolate d(L. bulgaricus), b'(L. jurgurti) and g(L. jugurti) did not.
Gene for lactose catabolism in Lactobacillus casei SW-M1 was encoded by a 60Kb metabolic plasmid. A derivative of only 10kb, pPlac 15 of recombinant plasmid, was constructed by introducing into pBR322 and was cloned into E. coli using restriction endonuclease Pst I. A 10kb insery DNA in plasmid pBR322 was identified as a gene encoded phospho-$\beta$-galactosidase by the determination of enzyme activity. Phospho-$\beta$-galactosidase was apparently expressed in E. coli. The enzyme activities of cell-free extract from transformant E. coli HB101 carrying pPLac 15 DNA were not different from that of L. casei as a donor strain on the basis of enzyme properites. However, specific activity of phospho-$\beta$-galactosidase in the cloned strain with Lac $Y^{-}$ phenotype of E. coli HB101 was lower than that in L. casei strain.
Jo, Young-Bae;Heo, Kyeong;Kim, Sung-Koo;Baik, Hyung-Suk;Jun, Hong-Ki
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.7
no.1
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pp.25-31
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1997
Protoplast fusion between L. casei KCTC 1121 and L. acidophilus 88 was attempted to obtain improved strains. The fusants produced a bacteriocin against indicator strains, making a smaller inhibition zone compared to that of L. acidophilus 88. After culturing for 2 months on selective medium, the selected fusants were still stable without segregation. Fusants showed higher lipase activity compared to those of the two parent strains. Fusant No.4, 11, and 15 exhibited excellent lactic acid productivity. Fusant No.4 and 15 exhibited improved proteolysis ability compared to the two parent strains. Whereas L. casei possessed both ${\beta}-galactosidase$ and $phospho-{\beta}-galactosidase$ activities, and L. acidophilus 88 had only ${\beta}-galactosidase$ activity, the fusants had both the intermediate enzyme activities. Cell size of the fusants was greater than that of the parents.
The 14 lactic acid bacteria (LAB) have been evaluated to determine the binding capacity to HT29 cell and Aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$). The interaction of LAB to HT29 cells has been further investigated to identify the possibility of competing the binding sites with $AFB_1$. Of 14 LAB strains, Lactobacillus casei KCTC 3260 demonstrated the higher adhesiveness to HT29 and $AFB_1$ with the rate of 19.6% and 46.3%, respectively. In competitive analysis for binding sites, the adhesion of L. casei KCTC 3260 to HT29 cells was reduced with 100 nmol $AFB_1$ by 31.2%. The protoplast of L. casei KCTC 3260 showed no binding capacity to HT29 cells with increment of $AFB_1$ concentration, indicating that cell wall components might serve as a critical factor for the binding. To discriminate the major component influencing on L. casei KCTC 3260 binding to HT29 cells and $AFB_1$, four different pre-treatments (lipase, pronase E, sodium m-periodate, and urea) were employed. Of those, sodium m-periodate treatment caused the lower adhesion of L. casei KCTC 3260 to HT29 cells with the increment of $AFB_1$ concentration. These results indicated that carbohydrate moiety on the cell wall of L. casei KCTC 3260 might be the most critical component in binding to both HT29 cells and $AFB_1$.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.19
no.1
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pp.41-48
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1984
The present study was undertaken to elucidate the antibacterial spectrum of L. casei phage type $J_1$ strain isolated from a fermented milk product against pathogenic enteric bacteria. Growth inhibitory effects and minimum inhibitory concentration(MIC) of culture supernatants of L. casei grown in MRS broth were measured by both plate culture method and microplate broth dilution technique against Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, Shigella flexneri, Shigella dysenteriae, enterpathogenic E. coli, Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa. The results are summarized as follows: 1. The MRS broth culture of L. casei gave a similar extent of growth inhibitory effects against S. typhi, S. typhimurium, S. flexneri, S. dysenteriae, E. coli, K. pneumoniae and P. aeruginosa, respectively. 2. The inhibitory effects of L. casei culture were observed either in whole broth culture or in culture supernatant, but neither the bacterial suspension nor the neutralized culture supernatant showed such as antibacterial activities. 3. The MIC titres of the culture supernatants were ${\log_2}5$ to ${\log_2}6$, whereas those of the neutralized culture supernatant dropped markdely to ${\log_2}2$ to ${\log_2}3$. These results indicated that major portion of growth inhibitory effects of MRS broth culture of L. casei against enteric bacterial pathogens was possibly due to the acids produced, and minor portion to other antibacterial substances.
This study was targeted to isolate and characterize a bacterium producing lactic acid in a large amount. Lactic acid bacteria of about fifty strains were isolated from kimchi, a Korean traditional fermented vegetable food. Strain KH-1 of them was most effective in the lactic acid production and showed 99% homology with Lactobacillus casei from analysis of 16S rRNA sequencing. The conversion ratio of lactic acid from glucose by 1. casei KH-1 was 98% in anaerobic condition, and the lactic acid was composed as racemic mixture of D(-)-and L(+)-lactic acid, 7% and 93%, respectively. This result indicated that L. casei KH-1 was a homofermentative bacterium mainly producing L(+)-lactic acid. The strain KH-1 used glucose as a preferential substrate but not utilized lactose. In investigation of more inexpensive nitrogen source for cultivation of strain KH-1 using industrial MRS medium, when yeast extract and corn steep liquor were used at the ratio of 1 to 1, the molar yield of lactic acid produced per mole of glucose(Yp/s) was 1.09.
In vivo protective and in vitro inhibitory activities of Lactobacillus casei YIT 9018. against typical enteritis causing Salmonella enteritidis KU101 and IgA level after challenge have been determined. In order to identify the strains of lactobacilli the sequences of 16S-23S rRNA intergenic spacer region were determined. All the test strains of Lactobacillus spp. inhibited Salmonella enteritidis, the intensity varied depending upon the species of lactobacilli. Effects on the survival rate of the mouse after challenge with Salmonella enteritidis KU101 on feeding Lactobacillus spp. have shown the highest survival rate in L. helveticus CU 631 followed by L. casei YIT 9018 and L. johnsonii C-4 and the lowest in control mice. The higher level of total Ig A concentration in the intestinal fluid of lactobacilli fed mice than control mice was observed. The sequences of 16S-23S rRNA intergenic spacer region of seven strains of Lactobacillus casei could be utilized as a strain identification, those sequences showed some degree of difference in homology.
Previous studies have confirmed that fermented whey produced by Leuconostoc mesenteroides CJNU 0147 or Lactobacillus casei CJNU 0588 display bifidogenic growth stimulator (BGS) activity. The present study sought to determine if the strain itself can improve the growth of bifidobacteria in co-cultures. In reinforced clostridial medium (RCM), both strains stimulated the growth of a Bifidobacterium lactis strain during the exponential phase and also stimulated the growth during almost all growth phases in whey broth. Fermented whey containing viable Leu. mesenteroides CJNU 0147 and L. casei CJNU 0588 cells maintained viability of the B. lactis strain stored at $10^{\circ}C$ in MRS broth. Viable cell count of the B. lactis strain without the fermented whey was decreased to 5.6 log cfu/mL after 15 days, whereas that of the strain with the fermented whey was slightly increased to 7.1 log cfu/mL as compared with initial viable cell count of 6.9 log cfu/mL.
Phage utilizing medium and BL agar supplemented with antibiotic Tc(tetracycline) were developed as selective media for the isolation and counting of bifidobacteria in dairy products. The former was based on the host specificity of phage. When bifidobacteria and Lactobacillus casei HY 2782 were mixed together in dairy product, L. casei HY 2782 was laysed by J1 phage which has host specificity to L. casei HY 2782 whereas bifidobacteria grew well on the selective medium added wIth J1 phage. The latter was found to inhibit the growth of S. salivarius subsp. thermophilus, L. acidophilus, and L. casei, but commercial bifidobacteria grew well in Tc-containing BL agar.
A lactic starter organism, Lactobaciilus casei YIT 9018 was treated with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) to obtain phage-resistant mutants. Freshly grown cells suspended in citrate buffer were exposed to NTG of 50 g/$m\ell$ for 40 min. Among 88 colonies isolated eight colonies showed distinct resistance to phages isolated previously from milk plants. The eight new colonies showed character similar to the original L. casei except that they responded differently to phage of different sources and thus were designated as eight different mutants of L casei. From the phage resisting toaether with the fermentative ability equivalent to the mother organism the mutants may be considered to be used as starter cultures for fermented milk.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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