The probiotic Lactobacillus acidophilus KBL409 was encapsulated with alginate (Al) and alginate-chitosan (Al/Chi) through extrusion method. The sizes and zeta potentials of microspheres were measured to confirm encapsulation. To evaluate the protective effect of microspheres against gastrointestinal fluids, all the samples were exposed to simulated gastric fluids (SGFs, pH 1.5) at $37^{\circ}C$ for 1 or 2 h, followed by incubation with simulated intestinal fluids (SIFs, pH 6.5) for 2 h. The mucoadhesive ability of microspheres was evaluated using the intestinal epithelial cell line HT29-MTX. To extend the shelf-life of probiotics, lyoprotectants such as disaccharide and polysaccharide were mixed with free or encapsulated cells during the freeze-drying process. The size of the microspheres demonstrated a narrow distribution, while the zeta potentials of Al and Al/Chi-microspheres were $-17.9{\pm}2.3$ and $20.4{\pm}2.6mV$, respectively. Among all the samples, Al/Chi-encapsulated cells showed the highest survival rate even after exposure to SGF and SIF. The mucoadhesive abilities of Al and Al/Chi-microspheres were higher than 94%, whereas the free L. acidophilus showed 88.1% mucoadhesion. Ten percent of sucrose showed over 80% survival rate in free or encapsulated cells. Therefore, L. acidophilus encapsulated with Al and Al/Chi-microspheres showed higher survival rates after exposure to the gastrointestinal tract and better mucoadhesive abilities than the free cells. Also, sucrose showed the highest protective effect of L. acidophilus during the freeze-drying process.
본 연구에서는 한국인 분변으로 부터 분리, 동정된 Lactobacillus 속 균주의 종별 출현빈도, 산 생성능, 인공 위액 및 인공 담즙에 대한 내성, cholesterol 저하능력 등이 검토되었다. 생후3일부터 37세까지의 총 13명의 남·여의 분변으로부터 총 52균주의 Lactobacilli가 분리되었고 이 중 L. acidophilus가 19주로 가장 많았으며 다음으로 L. plantarum 순이었다. 분리주 중 L. acidophilus로 동정된 17주와 L. casei로 동정된 3주에 대해서 생리적 특성을 검토한 바 각각 다음과 같은 결과가 얻어졌다. 인공위액에 대한 내성 실험결과 L. acidophilus a-4는 pH 2.5에서 3시간 경과 후에도 전혀 사멸하지 않고 100% 생존하는 것으로 나타났으며, L. acidophilus a-2와 L. casei b-3도 75%이상의 높은 생존율을 나타내었다. 나머지 13주는 40%이하의 생존율을 나타내어, 균주 별로 인공위액에 대한 내성은 큰 차이를 나타났다. 내 담즙성을 측정한 결과 L. acidophilus a-3를 포함한 4주는 성장에 지장을 받지 않았으나 대부분의 분리 균주는 생균수가 처리전 보다 $54{\sim}99%$ 정도로 감소되는 것으로 나타나 인공위액 내성과 마찬가지로 균주에 따라 편차가 큰 것으로 나타났다. 환원 탈지유를 이용한 산생성능에 있어서는 두 L. acidophilus 균주 (a-2 및 a-16)가 60시간 경과 후 $2.1{\sim}2.3%$의 적정 산도까지 도달하였고 이때 pH는 $3.5{\sim}3.6%$이었다 60시간 배양 후 적정 산도가 0.8%에 도달하지 못한 것은 총 20주중 10주였다. 한편 cholesterol 저하능을 측정한 결과 공시한 20개 분리주 중에서 L. acidophilus a-2 주와 a-6 주가 70% 이상의 우수한 저하능력을 나타냈고, 12균주가 60% 이상의 저하능을 나타냈다. cholesterol 저하능은 동일 균종이라 하더라도 분리원(사람)은 물론 동일 분리원에서 유래된 균주 간에도 큰 차이가 나타났다. 담즙산에 대한 내성과 cholesterol 저하능력과의 관련성은 상호간의 유의적인 관계가 없는 것으로 나타났다. 결론적으로 본 실험에서 얻은 몇 균주는 인체에 섭취될 경우 사멸하지 않고 소화관 하부까지 도달할 수 있는 잠재성이 있었으며, 따라서 이들 분리주는 정장제로 이용될 수 있다고 생각되었다.
유제품 30여종과 야채발효 제품 2종에서 Lactobacillus casei ssp.(5 strains), Lactobacillus acidophilus(2 strains), Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus(6 strains), Lactobacillus plantarum(3 strains), Streptococcus salivarius ssp. thermophilus(11 strains), and Streptococcus faecalis(2 strains)를 각각 분리하여 이들의 내산성과 담즙산 내성을 평가하였다. 초기생균수를 고려하여 공분산분석으로 내산성을 비교한 결과, L. casei에 속하는 균주들의 내산성이 가장 우수하였으며, L. bulgaricus와 균주들은 가장 낮은 내산성을 보였다(p<0.05). 담즙산 내성은 L. casei, L. plantarum, L. acidophilus, S. feacalis 균주들의 경우 비슷한 경향을 보였으나, L. bulgaridus와 S. thermophilus 그룹에 속하는 균주들의 담즙산 내성은 거의 없는 것으로 나타났다.
This study was performed to evaluate the effect of hydrogen peroxide-producing Lactobacillus acidophilus V-20onthe replication of periodontal pathogens, Actinobacillus actinomycetemcomitans and Porphyromonas gingivalis. When A. actinomycetemcomitans and P. gingivalis were incubated alone and in the combination with L. acidophilus V-20, the viable cell numbers of A. actinomycetemcomitans and P. gingivalis were compared between those cultures. The effect of S. mutans, E. durans, and L. lactis on the replication of A. actinomycetemcomitans and P. gingivalis was also evaluated. The change of periodontal indexes(probine depth, gingival index, GCF volume) and the viable cell numbers of A. actinomycetemcomitans and black pigmented bacteroides in subgingival plaque sample were evaluated following gargling of fermented milk made from L. acidophilus V-20 for 1 month on patients with periodontal disease in maintenance phase. In the mixed culture of L. acidophilus V-20 and A. actinomycetemcomitans or P. gingivalis, the replication of A. actinomycetemcomitans or P. gingivalis wascompletely inhibited. But in the mixed culture of P. gingivalis and hydrogen peroxide-nonproducing Lactobacillus casei, the viable ceil numbers of P. gingivaliswas not decreased when compared with the numbers in the mixed culture of P. gingivalis and L. acidophilus V-20. In the mixed culture of A. actinomycetemcomitans and S. mutans, E. durans, or L. lactis, the viable cell number of A. actinomycetemcomitans was not almost changed when compared with the numbers in the culture of A. actinomycetemcomitans alone. And in the mixed culture of P. gingivalis and E. durans or L. lactis, the viable cell numbers of P. gingivaliswas not almost changed compared with the counts in the culture of P. gingivalis alone. But the replication of P. gingivalis was completely inhibited in the mixed culture of P. gingivalis and S. mutans. When the change of periodontal indexes following gargling of fermented milk was compared with baseline, probing depth and gingival index were not changed, but GCF volume was significantly decreased(p<0.05). And when the viable ceil numbers of microorganisms in subgingival plaque sample were compared with baseline, total viable ceil number was almost unchanged and the viable cell numbers of A. actinomycetemcomitans and black pigmented bacteroides were significantly decreased(p<0.05). These results suggest that L. acidophilus V-20 inhibit the replication of A. actinomycetemcomitans and black pigmented bacteroides by the formation of hydrogen peroxide.
갓김치로부터 분리한 probiotic L. acidophilus GK20 및 L. paracasei GK74를 단독 혹은 혼합 배양하여 제조한 요구르트를 저장하는 동안 이화학적 및 미생물학적 특성과 스타터의 위산이나 담즙산에 대한 저항성, Caco-2 cell에 대한 부착능, 항균, 항산화 및 효소적 활성에 대한 prebiotic FOS(fructooligosaccharide)의 영향을 살펴보았다. FOS를 첨가했을 때 요구르트 내의 스타터 균수, 총산도 및 점도는 유의하게 높아짐과 동시에 pH는 감소되었다(p<0.05). 또한 E. coli ATCC 11229와 S. enteritidis ATCC 13076은 probiotics 스타터가 생산한 항균물질에 의해 저해되었으며, FOS를 첨가한 synbiotic 요구르트의 항균활성은 더욱 증가되었다. 게다가 FOS (1.0%)를 첨가하여 혼합 스타터로 발효시킨 요구르트에서 가장 높은 단백질 분해능 ($1.06{\pm}0.06$ unit) 및 ${\beta}$-galactosidase 활성 ($20.14{\pm}0.31$ unit)을 나타내었다. 하지만 비록 L. acidophilus GK20과 L. paracasei GK74 모두 장관액에 대한 저항성, 장관상피세포에 대한 부착능 및 DPPH radical 소거능이나 환원력과 같은 항산화 활성을 나타내었지만, 이들 활성이 FOS에 의해 증가되진 않았다. 결과적으로 L. acidophilus GK20과 L. paracasei GK74 혼합 배양에 FOS를 첨가한 synbiotic 요구르트는 장내환경 개선과 건강기능 향상에 유용한 것으로 여겨지며, 생리활성은 $4^{\circ}C$에서 7일간 저장 하에서도 일정하게 유지되었음을 확인하였다.
Kim, Min-Soo;Yoon, Yeo-Sang;Seo, Jae-Gu;Lee, Hyun-Gi;Chung, Myung-Jun;Yum, Do-Young
Toxicological Research
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제29권2호
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pp.129-135
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2013
Salmonella is one of the major pathogenic bacteria that cause food poisoning. This study investigated whether heat-killed as well as live Lactobacillus protects host animal against Salmonella infection. Live and heat-killed Lactobacillusacidophilus was administered orally to Sprague-Dawley rats for 2 weeks before the rats were inoculated with Salmonella. Rise in body temperature was moderate in the group that was treated with heat-killed bacteria as compared to the Salmonella control group. The mean amount of feed intake and water consumption of each rat in the heat-killed bacteria group were nearly normal. The number of fecal Salmonellae was comparable between the live and the heat-killed L. acidophilus groups. This finding shows that L. acidophilus facilitates the excretion of Salmonella. Moreover, the levels of pro inflammatory cytokines, including tumor necrosis factor (TNF)-alpha and interleukin (IL)-1 beta, in the heat-killed L. acidophilus group were significantly lower when compared to the levels in the Salmonella control group. These results indicate that nonviable lactic acid bacteria also could play an important role in preventing infections by enteric pathogens such as Salmonella.
The objective of this research was to combine the physiological functionality of probiotics (Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium longum) and the milk-clotting activity of culture filtrate from lao-chao to develop a new dairy product which was different from the commercial yogurt. Rhizopus javanicus and Saccharomyces cerevisiae were chosen as a mold and yeast starter for production of culture filtrate. The study results indicated that both probiotic counts increased with incubation time and maintained $10^7$-$10^8$ CFU/ml after 6 h incubation with 10-30% culture filtrates. By contrast, samples with 40% culture filtrates inhibited the growth of L. acidophilus and B. longum. The more culture filtrates were added, the lower titratable acidities and higher pH values in Kou Woan Lao were detected after 36 h fermentation. No significant differences (p>0.05) were found for both L. acidophilus and B. longum, when grown in differing concentrations of skim milk powders. Storage results showed both L. acidophilus and B. longum exhibited excellent stability for 14 days at $4^{\circ}C$ in the Kou Woan Lao.
본 연구의 목적은 탈지유와 두유 내에서 Enterobacter aerogenes CIH05의 증식과 바이오제닉 아민(biogenic amines, BA) 생성량에 대한 유산균의 영향을 조사하는 것이다. 갓김치로부터 분리된 Lactobacillus acidophilus GK20, Lactobacillus paracasei GK74 및 Lactobacillus planatrum GK81은 탈카르복시화 배지 상에서 BA를 생성하지 않았다. 탈지유와 두유 내에서 L. paracasei GK74에 의해 가장 많은 생균수와 항균 물질 생성량이 측정되었고, 반면 L. plantarum GK81은 다른 균주들에 비해 유의하게 낮은 균수와 항균 물질을 생산하였다. 유산, 과산화수소 및 박테리오신의 생산량은 Lactobacillus의 균종과 배지 종류에 의존하였다. 유산균과 유사하게 E. aerogenes CIH05도 단독 배양 시 두유보다 탈지유에서 더 많은 균수가 측정되었다. 탈지유와 두유 내에서 L. acidophilus GK20이나 L. paracasei GK74와 혼합 배양하거나 박테리오신 용액(300 AU/ml)을 처리했을 때 E. aerogenes CIH05의 균수가 유의하게 감소되었고 히스타민과 카다베린의 생성도 효과적으로 억제되었다.
S.G.Y.배지(skim milk, glucose, yeast extract)와 S.M.W.배지(skim milk whey). 배지에 P. freudenreichii KFCC 31227과 L. acidophilus KFCC 32825를 단독 또는 혼합배양 후, 두 균주의 생육 및 유기산 생성에 미치는 발효여액의 영향과 당의 변화 및 이용 효과를 검토한 결과, 자신의 발효여액보다는 상대편의 발효여액에서 그리고 단독배양보다는 혼합배양에서 생육이나 산 생성의 효과가 촉진되었으며, 배지중의 glucose 및 lactose 의 이용효과를 보면 P. freudenreich-ii KFCC 31227 단독 배양시는 lactose 를, L. acdophilus KFCC 32825 단독배양시는 glucose를 생육이나 산 생성에 더 잘 이용하였다. 또한 두 균주의 혼합배양시에는 단독배양에 비해 발효에 glucose 나 lactose 를 이용하는 시간이 더욱 단축되는 결과로 나타났으며, 이것은 혼합배양시 두 균주의 상호작용에 의한 synergism 효과에 기인된 것으로 생각된다.
대두유중에서 L, acidophilus와 K. fragilis를 단독발효시키는 것 보다 혼합배양 함으로써 젖산의 생성이 촉진되었는데 균간의 어떠한 상호작용에 의하여 산의 생산이 증가되었는가를 연구하였다. 대두유와 Soywhey를 사용하였을 때의 젖산 생성속도는 L. acidophilus 단독보다는 K. fragilis 와 혼합배양하는 것이 빨랐다. 이들 균을 단독 또는 혼합배양하여 경시적으로 발효 대두유중의 당 성분을 HPLC로 분석하였다. 그 결과 L. acidophilus가 발효하기 어려운 sucrosed raffinose, stachyose를 K. fragilis가 생산하는 효소에 의하여 젖산균이 발효할 수 있는 glucose, fructose로 분해되기 때문에 혼합배양 함으로써 젖산 발효가 촉진된다는 것을 알았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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