Hassanein A. M.;Ibrahiem I. A.;Galal A. A.;Salem J. M. M.
Journal of Plant Biotechnology
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제7권3호
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pp.175-181
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2005
This work described some essential factors necessary for micro-propagation of banana for mass production of synthetic seeds for germ plasm conservation, and how peroxides activity of conserved tissue was influenced. Shoot tips of field grown plants were used to obtain shoot clusters on shoot proliferation medium (MS medium supplemented with 5 mg/l BAP). Using longitudinally-split shoot tip technique, 18720, 8640, 7488, 2016 plantlets were obtained from one shoot tip of Maghraby, Grand Naine, Balady, and Williams, respectively, in six subculture, one month each, on solid medium. Shoot tips excised from in vitro grown plantlets were encapsulated in calcium-alginate beads and stored at $4^{\circ}C$ for one month on half-strength MS basal medium without growth regulators or sugars. After one month all the viable-conserved synseeds formed shoots when they were transferred to MS basal medium, some of them showed synchronous formation of shoot and root systems in one week. Plants retrieved from encapsulated shoot tips were hardened off and transferred to soil.
Yi Jung-Yoon;Seo Hyo-Won;Choi Young-Moo;Park Young-Eun
Journal of Plant Biotechnology
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제5권2호
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pp.101-105
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2003
To eradicate several viruses such as PVX, PVY, and PLRV which often cause considerable damages to the growth and yields of potatoes, several stems including shoot tips were excised from the potato plants grown for 50 days and electric shock was treated. Shoot tips excised from electric-shocked stems were transferred into the medium supplemented with antiviral compound, ribavirin to examine the combinatorial effect. When treated only with 20 mg/L ribavirin, PVX concentration in the regenerated plant-lets was slowly decreased as repeating sub-culture and finally, it took 32 weeks to reach completely PVX-free stock. With an electric shock treatment (10 mA electric current), all the replicates became free from PVY. However, PLRV was not completely eradicated from 94P70-4 and 93P29-3 lines even by treating with 10 mA electric shock. In this case, both electric shock and antiviral compound treatments in axillary buds from the stem segment were successful in eradicating viral contamination.
본 실험은 무궁화 '홍화랑' 품종의 기내 대량 생산 체계를 구체적으로 확립하기 위한 연구로서 고체배지 또는 액체배지에서 thidiazuron (TDZ)이 캘루스 형성과 신초의 재분화에 미치는 효과 및 가장 적합한 multiple shoot 형성을 위한 배지의 조건을 유도하여 기내 식물체 대량생산 체계를 확립하기 위해 실시하였다. 고체배지에서의 캘루스 형성에 있어서는 TDZ 0.01 mg/L에서 가장 효과적으로 나타났으며, 반면 신초의 생장에 있어서는 BA 0.1 mg/L에서 가장 좋게 나타났다. 전반적으로 TDZ 0.01 mg/L에서는 캘루스의 형성이 가장 좋았고, TDZ 0.001 mg/L과 BA 0.1 mg/L의 혼용처리구에서는 약간의 신초원기가 형성되었다. 신초의 형성은 TDZ 0.001 mg/L에서 가장 잘 되었다. 대량의 multiple shoot를 유도하기 위해서 1단계는 TDZ 0.01 mg/L에서 8주간 캘루스의 형성을 유도한 후, 2단계에서 형성된 캘루스를 TDZ 0.001 mg/L에서 4주간 배양하여 많은 신초원기를 형성시켰다. 3단계는 형성된 신초원기들을 growth regulator-free 배지에 4주간 계대배양하여 multiple shoot 유도 및 발달시켰다. 발근은 MS 기본 배지에 NAA 1.0, 5.0 mg/L와 IBA 5.0 mg/L의 농도에서 효과적이었다.
우리나라 자생식물인 산호수 (Ardisia pusilla DC)를 기내에서 대량증식하기 위하여 초대배양으로 산호수 경정을 MS, 1/2MS 배지에 BA와 TDZ의 농도를 달리하여 첨가된 배지에 치상하여 배양하였다. 무기염류를 달리한 배지와 생장조절물질 농도를 다르게 한 배지 중 1/2MS 배지에 BA 0.5mL가 첨가된 배지가 신초 수 7개 이상으로 증식이 양호하여 산호수의 초대배양에 적정배지로 나타났다. TDZ를 첨가한 배지에서는 캘러스형성이 과다하여 부정아 형성을 오히려 방해하여 BA 첨가배지보다 신초증식이 양호하지 못하였다. 신초의 증식을 위해 1/2 MS 배지에 BA 0.5 mg와 sucrose의 농도를 달리하여 첨가한 결과, sucrose 농도 20 g/L를 첨가한 배지에서 신초의 증식, 생장 및 다아체 형성이 양호하였다. 형성된 신초의 발근은 1/2MS 배지에 IBA, NAA를 각각 첨가한 배지를 사용하였는데 두 가지 옥신류에서 0.5 mg의 농도에서 신초의 생장과 발근이 양호하였다. 잎과 뿌리가 잘 발달한 유식물체를 원예용 상토에 옮겨 키웠을 때 모든 개체가 정상적인 형태로 성장하였다.
Field and nutrient cultures of American ginseng (Panax quinquefolius L.) were used to establish foliar symptoms related to boron (B) concentration in leaves and soils, and to evaluate radish as a time-saving model system for B nutrition. Application of excess B, 8 kg/ha versus the recommended 1.5 kg/ha, to field plantings of 2-, 3-, and 4-yr-old American ginseng plants just prior to crop emergence caused, within 4 wk after crop emergence, leaf symptoms of chlorosis followed by necrosis starting at the tips and progressing along the margins. The B concentration in leaves of 2-4-yr-old plants receiving 1.5 kg/ha Bwas $30{\mu}g/g$ dry mass compared to $460{\mu}g/g$ dry mass where 8 kg/ha B was applied. Similarly, B concentration in soils receiving the lower B concentration was 1.8 mg/g dry mass and $2.2-2.8{\mu}g/g$ dry mass where the higher B concentration was applied. Application of 8 kg/ha B reduced the dry yield of 3rd-yr roots by 20% from 2745 kg/ha to 2196 kg/ha and 4th-yr roots by 26% from 4130 kg/ha to 3071 kg/ha. Ginseng seedlings and radish were grown under greenhouse conditions in nutrient culture with four B concentrations ranging from 0 mg/L to 10 mg/L. At 5 mg/L and 10 mg/L ginseng and radish developed typical leaf B toxicity symptoms similar to those described above for field-grown plants. Increasing B in the nutrient solution from 0.5 mg/L to 10 mg/L decreased, in a linear fashion, the root and leaf dry mass of ginseng, but not radish. Given the many similarities of ginseng and radish to B utilization, radish might be used as a timesaving model system for the study of B, and other micronutrients, in the slow-growing perennial ginseng.
Delphinium cv. Princess Caroline을 대량번식하기 위하여 신초를 MS 배지에 사이토킨닌과 오옥신이 단용 또는 혼용으로 첨가된 배지에서 배양하였다. 사이토킨닌 단용처리에서 kinetin이나 2iP 첨가배지보다는 BA 첨가배지에서 신초 증식율이 높았다. 농도는 BA 1.0-5.0 mg/L가 첨가된 배지에서 신초수가 5개 이상으로 증식이 양호하였다. BA와 IAA를 혼용처리한 배지에서는 BA 1.0-3.0 mg/L와 IAA 0.1-0.5 mg/L 첨가배지에서 신초수가 5개 이상으로 높은 신초증식을 보여주었다. 그러나 BA와 IAA를 혼용첨가 하였을 때, 생체중은 약간 증가하였으나 저농도의 오옥신 첨가에 의한 신초증식 효과는 나타나지 않았다. IBA 또는 NAA가 농도별로 첨가된 배지에서 신초는 거의 발근되지 않았으며, 활성탄소가 첨가된 배지에서도 전혀 발근이 되지 않았다. 기내에서 생산된 신초의 기부에 Rootone을 뭍혀 기외발근을 한 결과, 펄라이트 1과 버미큘라이트 1의 배합토에서는 발근율이 68%, 뿌리수 약 4개, 뿌리길이 2.2cm로 발근이 양호하였다.
Development of efficient plant regeneration and genetic transformation protocols (using the Particle Inflow micro-projectile Gun and the shoot-tips as target tissue) of Sorghum bicolor (L.) Moench in terms of expression of the reporter gene, $\beta$-glucuronidase(uidA) is reported here. Two Indian cultivars of sorghum were used in the study, viz. M-35-1 and CSV-15. Plant regeneration was achieved from one-week-old seedling shoot-tip explants via multiple-shoot-clumps and also somatic embryos. The multiple-shoot-clumps were produced on MS medium containing BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$), with biweekly subculture. Somatic embryos were directly produced on the enlarged dome shaped expansive structures that developed from shoot-tip explants (without any callus formation) when cultured on MS medium supplemented both with BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$) and 2,4-D (0.5 mg/$L^{-1}$). Whereas each multiple-shoot-clump was capable of regenerating more than 80 shoots via an intensive differentiation of both axillary and adventitious shoot buds, the somatic embryos were capable of 90% germination, plant conversion and regeneration. The regenerated shoots could be efficiently rooted on MS medium containing 1.0mg/$L^{-1}$ IBA and successfully transplanted to the glasshouse and grown to maturity with a survival rate of 92%. The plant regeneration efficiency of both the genotypes were similar. After the micro-projectile bombardment, expression of uidA gene was determined by scoring blue transformed cell sectors in the bombarded tissue by an in situ enzyme assay. The optimal conditions comprising a helium pressure of 2200 K Pa, the target distance of 11 cm with helium inlet fully opened and the use of osmoticum have been defined to aid our future strategies of genetic engineering in sorghum with genes for tolerance to biotic and abiotic stresses.
제초제 bialaphos에 저항성인 phosphinothricin ace-tytransferase gene이 도입된 형질전환 감자 식물체에서 유전자의 간편한 확인방법을 확립하였다. 먼저 형질전환체와 대조식물체의 잎 disc를 취해 bialaphos 5mg/l를 처리한 액체배지에 치상하였을 때 배양 25일이면 대조식물체의 잎 disc는 완전히 고사되어 형질전환체와 구별이 가능하였다. 감자의 뿌리 생육 비교실험에서는 bialaphos 0.5mg/l의 농도에 agar를 0.6% 첨가한 선발배지에서 식물체의 정단부위를 치상하여 비교하였을 때 7-10일이면 뿌리의 생육차이를 이용하여 간편하게 형질전환여부를 판정할 수 있었다. 또한 감자의 잎 disc를 제초제 bialaphos 0.5mg/l를 처리한 액체배지에 치상하여 15일이 경과한 후 chlorophyll A의 함량을 측정하였을때 형질전환체는 대조식물체보다 2.5배 정도 많은 chlorophyll A를 가지고 있어 형질전환체의 조기 판별시 chlorophyll A함량에 의해 검증이 가능하였다. 한편, 이렇게 형질전환 여부가 확인된 감자 식물체를 이용하여 PAT효소의 활성을 측정한 결과 대조 식물체에서는 PAT효소의 활성을 보이지 않았으나 형질전환 식물체에서는 모두 효소의 활성이 높았다.
The behavior of fatigue was studied by using low carbon steel bar with microhole(artificial small defect) under the condition of rotary bending stress which is made artificially at smooth surface and round notch root. The results obtained can be summerized; The behavior of non-propagating cracks which are produced at both tips of small defect occurred to dissymmetry, and it is found to be double size of small defect. For the range of l>lc, threshold stress intensity is constant. However, for the range of l
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[게시일 2004년 10월 1일]
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