[68Ga]Ga-FAPI-04는 암세포에 과발현 되어 있는 fibroblast activation protein (FAP)에 특이적으로 결합하는 FAP 저해제(FAP inhibitor, FAPI)에 방사성동위원소 68Ga을 표지한 방사성의약품이다. 본 연구에서는 국내에서 제작된 카세트기반 자동합성장치를 사용하여 [68Ga]Ga-FAPI-04를 제조하는 방법을 개발하였다. [68Ga]Ga-FAPI-04의 합법을 개발하기 위해 완충액 HEPES의 농도, 반응시간, FAPI-04 전구체 양, 반응온도에 따른 표지효율을 확인하였다. [68Ga]Ga-FAPI-04는 2 M HEPES를 사용하여 pH 3.85에서 반응할 경우 가장 높은 표지효율을 획득할 수 있었고, 반응시간이 10분일 경우와 25 ㎍의 FAPI-04 전구체를 사용할 경우 및 100℃에서 반응할 경우 가장 높은 표지효율을 획득할 수 있었다. 또한 최종 합성된 [68Ga]Ga-FAPI-04는 모든 품질기준을 만족하여 본 연구를 통해 개발된 [68Ga]Ga-FAPI-04의 합성법은 FAPI 기반 방사성의 약품생산에 활용도가 높을 것으로 예상된다.
This paper describes the development of $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine as potential renal function diagnostic radiopharmaceutical and evaluation of its biological characteristics using experimental animals. l-Cysteine was labeled efficiently with $^{99m}Tc$ tricarbonyl precursor $([^{99m}Tc(CO)_3(H_2O)_3)]^{+})$ under 30 min heating at ${75^{\circ}C}$. Labeling yield and stability were analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC). The biodistribution property of $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine in mice and its dynamic imaging profiles in rabbits were carried out. To investigate the excretion mechanism of $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine, tubular transport inhibition test with probenecid was adopted. $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine was obtained with a high labeling yield under the moderate condition. The results of biodistribution experiments of $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine in ICR mice at 3 and 90 min provided that $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine was very highly accumulated in the kidney and bladder, thereby almost 99% of $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine was excreted within 90 min post injection. The same results were confirmed by the whole body dynamic images for 30 minutes and static images in rabbits at given time intervals after injection. Renogram of $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine in rabbits showed that its $T_{max}$ and $T_{1/2}$ of $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine were $2.33{\pm}0.56$ and $4.30{\pm}0.79$ min, respectively. The $T_{max}$ of $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine with probenecid pretreatment was $2.30{\pm}0.17$ min, whereas $T_{1/2}$ of that with probenecid pretreatment was $17.0{\pm}32.47$ min. $T_{1/2}$ of $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine with probenecid pretreatment was significantly different, as compared to the result without probenecid (p<0.0001). The results showed that the excretion of $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine was extremely affected by probenecid. Therefore, $^{99m}Tc$ tricarbonyl cysteine was rapidly excreted from the kidney principally by the tubular secretion.
본 연구는 조제유류 중 "식품의 기준 및 성분규격"에 기준 규격이 설정되어 있지 않으나 제품에 함유되어 있는 베타카로틴에 대해 분석법을 마련하고자 수행하였다. 조제유류에 함유된 베타카로틴 함량 분석을 위해 HPLC를 이용한 분석법을 확립하고 시중에 유통 중인 제품을 대상으로 적용성을 검토하였다. 베타카로틴 표준품을 이용하여 HPLC를 이용한 기기분석조건을 확립하고 시료 중의 베타카로틴을 추출하여 분석하였다. 분석법 검증은 특이성, 직선성, 검출한계 및 정량한계, 정확성, 정밀성에 대해 수행되었다. 0.125~2 mg/L의 농도범위에서 $R^2=0.999$ 이상의 우수한 직선성을 확인할 수 있었으며, LOD와 LOQ는 각각 0.1, 0.2 mg/L였다. 표준물질 첨가법을 이용하여 정확성을 검토하였으며, 81~120%의 회수율을 확인할 수 있었다. 정밀성을 검토한 결과 시료 채취량에 따른 반복성은 RSD값이 2.1~4.9%, 실험실간 교차검증을 통한 실험일자에 따른 재현성은 4.0 RSD(%)로 확인되었다. 본 연구에서 확립된 분석법을 적용하여 조제유류 13건, 성장기용조제식 7건 등 국내 유통 중인 제품 20건에 대해 적용성 검토를 실시한 결과 전체 시료에서 분석이 용이하였으며, 모두 표시기준에 적합함을 확인하였다.
본 논문에서는 솔더페이스트의 이차원 및 삼차원 자동검사를 함께 할 수 있는 복합 검사 광학계와 그 구동유닛을 단일 프로브 시스템으로 구현하고, 그를 위한 효과적인 비젼검사 알고리즘을 제안하였다. 솔더페이스트의 이차원 검사에는 One-pass Run Length 레이블링 알고리즘을 제안하여 입력 영상으로부터 솔더 페이스트 형상을 효과적으로 추출하도록 하였고, 고속 검사를 위한 프로브의 최적 이동 경로도 구하였으며, 삼차원 검사에는 기존의 레이져 슬릿빔(slit-beam) 방식 대신 격자 투영식 모아레 간섭계에 기반한 위상이동 알고리즘을 도입하여 고정밀 검사가 가능토록 하였다. 전체 소프트웨어 구현에는 MMX 병렬처리기법도 적용함으로써 더욱 고속화 하였다. 10㎜×10㎜의 단위 측정영역(field of view: FOV)에 대하여 x, y 축으로 10㎛ Z축으로 l ㎛의 분해능을 가지는 이차원 및 삼차원 복합 광학 검사 시스템을 제작하여 실험한 결과, 한 FOV에 대한 솔더페이스트의 이차원 및 삼차원 검사를 영상포착 후 각각 평균 11msec와 15msec의 짧은 시간에 처리할 수 있었고, ±1㎛의 두께 측정 정밀도를 얻을 수 있었다.
The apoptotic effect of bacteria-derived $\beta$-glucan was investigated in human colon cancer cells SNU-C4 using terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) assay, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) expressions of Bcl-2, Bax, and Caspase-3 genes, and assay of caspase-3 enzyme activity. $\beta$-Glucan of 10, 50, and $100{\mu}g$/mL decreased cell viability in a dose-dependent manner with typical apoptotic characteristics, such as morphological changes of chromatin condensation and apoptotic body formation from TUNEL assay. In addition, $\beta$-glucan ($100{\mu}g$/mL) decreased the expression of Bc1-2 by 0.6 times, whereas the expression of Bax and Caspase-3 were increased by 3.1 and 2.3 times, respectively, compared to untreated control group. Furthermore, the caspase-3 activity in the $\beta$-glucan-treated group was significantly increased compared to those in control group (P < 0.05). Bacterial derived $\beta$-glucan could be used as an effective compound inducing apoptosis in human colon cancer.
서울시내 백화점과 대형 마트에서 판매되는 칼슘강화식품을 조사하여 이들을 곡류가공품, 우유 및 유제품, 식.어육가공품, 라면류, 레토르트식품, 쥬스 및 음료류, 기타로 분류하고 각 제품에 표기된 영양표시를 중심으로 현재 우리나라 칼슘강화 현황과 영양표시 실태를 살펴보았다. 그러나 본 조사에서는 특정인을 위한 건강보조식품이나 특수영양식품 및 유아용 조제유와 이유식은 대상에서 제외하였다. 조사된 캄슘강화식품은 총 81건이었으며 곡류가공품, 라면류를 중심으로 광범위한 식품군에 강화되었다. 특히 칼슘이 기호식품에 첨가됨으로서 소비자의 식사 패턴과 기호도에 따라 개인별로 칼슘 섭취량의 차이가 클 가능성이 있었다. 그리고 칼슘강화식품은 대부분 칼슘이 단독으로 강화되었고 그 다음으로 칼슘 이외에 1종의 영양소가 추가로 강화된 제품들이 많았고 식품군에 따라서는 약간의 차이를 보였다. 특히 우유 및 유제품 식품군은 다중 강화식품군으로 한 제품과 칼슘과 1~8종의 영양소가 동시에 강화되었다. 또한 같이 첨가되는 영양소의 종류는 DHA가 가장 많았으며 그 외에 비타민류, 무기질류 등이 있었다. 제품의 칼슘함량을 표시하는 기준단위는 주로 '100g/100mL', '포장중량'이었으며 각 제품에 대한 소비자들의 실제 섭취량을 비교하기 위해 칼슘함량을 '1인 분량'당 % RDA로 환산해보면 2.5~27.6% RDA 범위였다. 특히 칼슘이 강화된 제품의 칼슘함량이 '1인 분량'당 10% RDA에도 미달되는 제품들이 많아 강화함량에 대한 전반적인 평가가 필요했다. 영양표시는 표시기준에 규정되지 않은 용어가 사용되고 규정된 용어를 사용하더라도 함량기준에 미달되는 경우가 있는 등 몇 가지 문제점을 드러냈다. 그러므로 영양강화가 제 역할을 다하기 위해서는 시대적인 요구에 능동적으로 대처하는 관련 정부기관의 노력과 식품업계의 강화에 따르는 기술력 향상 및 사후 품질관리가 필요했다. 또한 학술기관에서는 이에 대한 기초연구가 소비자들 대상으로 영양교육을 실시하고 소비자 스스로도 자신에 맞는 식품을 선택할 수 있는 능력을 갖추도록 꾸준한 노력과 관심을 가져야 할 것이다.
미토콘드리아가 포함하고있는 결정한유물의 미새구조와 면역황금표식법에 의한 분석을 위하여 우심근 세포의 미토콘드리아에서 전자전달체에 관여하는 효소를 분리하였다. 우심근 미토콘드리아에서 분리된 효소는 실험토끼에 주사하여 (복합체I,NADH-conezyme Q reductase; 복합체 III,Ubiquinol-cytochrome-c-oxldoreductase; 복합체 IV, Cytochrome-c-oxidase)들에 대한 면역항체를 얻었다. 이들 면역항체들은 우심근과 정상인의 골격근 미토콘드리아와 미토콘드리아에 결정함유물을 포함하는 mitochondrical myopathy환자의 골격근 미토콘드리아에 반응시켜 황금입자를 표식하고 전자현미경을 이용하여 이들 면역항체반응을 관찰하였다. 미토콘드리아가 포함하는 결정함유물의 미세구조에는 paracrystalline inclusions body와 multilamellar strudure inclusion body그리고 구형결정함유물(globular crystalline inclusions body) 및 윤형구조 (whirl shaped structure)의 크리스테 중심에 있는 구형결정함유물 등의 4종류로관찰되었다. 복합체 I,복합체 Iv의 효소에 대한 항체를 우심근과 정상인 골격근 그리고 mitochondrical myopathy환자의 골격근에 동일한 면역반응을 시켰을때 미토콘드리아 크리스테에 부착하는 황금입자의 표식 정도는 각각의 근조직에서 유사한 반응이 관찰되었다. 복합체 III의 효소에 대한 항체는 우심근과 정상인의 골격근에서는 유사한 반응이 나타났으나 mitochondrical myopathy환자의 골격근에서는 극히 소수의 황금입자가 관찰되었다. 구형결정함유물은 복합체 I,III,IV의 3종류의 효소에 대한 면역반응 결과 황금입자표식은 관찰되지 않았다. 따라서 mitochondrical myopathy환자의 미토콘드리아에는 복합에 III의 효소가 결핍되었으며 구형결정함유물은 전자전달체 효소들인 복합체 I,III,Iv 효소단백질과는 상관없는 물질로 생각된다.
Several herbs including Artemisia are known to possess conceptive property. In the present study, mouse spermatozoa were incubated with ethanol extract of Artemisia vulgaris leaves. The effect of extract on acrosome exocytosis was studied by labeling spermatozoa with fluorescein isothiocyanate (FITC) peanut agglutinin and by staining with Coomassie blue. Viability and membrane integrity were studied by Trypan-blue staining and hypo-osmotic swelling test. Artemisia extract at very low concentration caused precocious acrosome reaction and loss of sperm viability. Acrosome reaction increased remarkably from 22.63% to 88.42% with increasing extract concentration from 0 to 2,000 ㎍/mL. However, the viability loss of spermatozoa was increased from 11.71% in control to 63.73% in samples treated, evaluated by Trypan-blue staining method. Membrane damage caused by the extract, evaluated by hypo-osmotic swelling test was even low, ranging from 2.27% to only 24.23%. These results indicate that Artemisia extract might block fertilization by causing precocious acrosome exocytosis in spermatozoa. A direct contraceptive effect was tested by injecting the plant extract into the vagina of female mice and then allowing them to mate with normal males. The treated female mice delivered significantly fewer litters in comparison to the control.
Microplastic contamination in waterbodies is a growing source of concern for researchers and other stakeholders. We investigated oxidative stress and toxicity in goldfish (Carassius auratus) in response to exposure to 1-㎛ diameter micro-polystyrene (MP) at concentrations of 0, 10, 100, and 1000 beads/mL (MP 0, MP 10, MP 100, and MP 1000 groups) for 7 d (at day 0, 1, 3, 5, and 7). We analyzed the survival rates; superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) mRNA expression levels in the liver; SOD and CAT activity in the plasma; caspase-3 mRNA expression in the liver; and the levels of hydrogen peroxide (H2O2) in plasma. Terminal transferase dUTP nick end labeling (TUNEL) assays were also conducted to determine apoptosis levels in the liver. All fish in the MP 1000 group died by day 7 and the MP 100 group had a lower survival rate than the MP 10 and MP 0 groups. The mRNA expression as well as SOD, CAT, and caspase-3 activity levels were increased significantly with increases in MP concentration and exposure time. Finally, according to the TUNEL assay, more apoptosis was observed in the MP 1000 group at day 5 than in other groups. In summary, MP concentrations above 100 beads/mL caused death and oxidative stress to goldfish. We conclude that MP can cause oxidative stress and apoptosis in goldfish, which leads to death.
Lee, H. Y.;S. H. Jun;Y. J. Chung;X. S. Cui;Kim, N. H.
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2003년도 학술발표대회 발표논문초록집
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pp.22-22
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2003
This study was conducted to determine effects of polyvinyl alcohol (PVA), fetal bovine serum (FBS) and bovine serum albumin (BSA) on blastocoel formation, cell number, apoptosis and apoptosis-related gene expression of porcine diploid parthenotes developing in vitro. Embryos were collected from 2-cell or late 4-cell diploid parthenotes that activated with electro pulse, and in vitro cultured in the NCSU 23 medium supplemented without or with 0.1% PVA, 10% FBS or 0.4% BSA for day 7. The morphological analysis of apoptosis in embryos was carried out using propidium iodide staining and terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling. The expressions of Bcl-xL, Bak and P53 in blastocyst stage parthenotes and in vivo-derived blastocysts were determined using semiquantitative RT-PCR. The addition of 0.4% BSA to the culture medium enhanced the development of 2- or late 4-cell stage parthenotes to the blastocysts stage (P < 0.01) while FBS decreased the incidence of blastocoel formation. FBS also reduced cell numbers of blastocysts developed from both 2- (P < 0.001) and late 4-cell (P < 0.05) embryos and increased percentage of apoptosis in the blastocysts (P < 0.001). The relative abundance of Bcl-xL mRNA in diploid parthenotes cultured from 2-cell stage in the presence of BSA is similar with that in in vivo derived embryos, but is significantly higher than in parthenotes cultured with FBS, PVA or none protein supplement control. Bak mRNA showed a significant increase at the blastocyst stage in FBS supplement medium. This result suggests that apoptosis related gene expression is significantly affected by protein supplements, which may result in alteration of apoptosis and embryo viability of porcine embryos developing in vitro.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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