There has been some evidence concerning the fact that trihalomethanes(THMs), toxic chlorinated compounds, may be present in drinking water. One of the important methodologies to evaluate the toxicity of THMs is to determine enzyme alteration in experimental animal tissues after treatment. This study was intended to investigate how lactic dehydrogenase(LDH) of rat tissues is affected by administration of chloroform($CHCl_3$) and dichloromonobromomethane($CHCl_2\;Br$). THMs, high dose(1/10 LD50) or low dose(1/50 LD50) of $CHCl_3$ or $CHCl_{2}Br$ were administered orally to experimental rats for 4 or 8 weeks. The treated groups of rats were sacrificed to determine LDH specific activity and isozyme pattern in various organs which were liver, thigh muscle, kidney and brain. The conclusions were obtained as follows: 1. Alteration of LDH activities and isozyme patterns were revealed before morphologic changes in tissues. 2. The LDH specific activities were increased significantly in liver and brain after administration of high concentrations of $CHCl_3$ and $CHCl_{2}Br$ for 4 weeks respectively. Otherwise, they were decreased significantly in liver, muscle and kidney after administration for 8 weeks. 3. The isozyme activities of LDH-4 and LDH-5 were increased in muscle, brain, and especially the liver. 4. It was more distinct for the decrement of LDH H-type isozyme than the increment of M-type isozyme in muscle.
A hydrogenperoxide sensor containing peroxidase extracted from horseradish was constructed and pH effect on its sensing ability was investigated. Current profiles of the biosensor with pH and the electrophoretic analysis showed that horseradish peroxidase consists of two isozymes. Assuming that it is a hypothetical twoisozyme mixture, the current profiles were deconvoluted into two Gaussians. Application of the new Michaelis-Menten equation connoting pH concept to this system enabled to find all the related dissociation constants of the isozyme-substrates and the isozyme-proton complexes and to determine pHs for the maximal isozyme activities.
칠성장어(Lampetra japonica) 간조직 젖산탈수소효소(EC 1.1.1.27, lactate dehydrogenase, LDH) 동위효소는 affinity chromatography에서 buffer를 유입한 후 용출된 분획에서 정제되었다. 대구(Gadus macrocephalus)의 liver-specific $C_4$동위효소는 열처리한 후 affinity chromatography하여 NAD+ 를 함유한 buffer에서 용출되기 시작하여 buffer를 유입한 후 $B_4$ 동위효소와 함께 용출되어, DEAE-Sephacel chromatography에 의해 정제되었다. 대구 간조직에서 열에 대한 안정성은$C_4$$B_4$$A_4$ 동위효소의 순서로 나타났다. Chromate-focusing에 의해 정제한 칠성장어 간조직의 pH 7.45 분획의 LDH 동위효소는 정제된 간조직 LDH보다 피루브산에 의한 기질저해도가 컸다. 칠성장어 간조직 LDH의 최적 pH는 7.5, liver-specific $C_4$동위효소는 pH 8.5였다. 칠성장어 간조직 LDH는 항원-항체반응에서 꺽지 $A_4$ 항체와 liver-specific $C_4$ 항체의 순서로 반응하였고 eye-specific $C_4$ 항체와는 반응 정도가 낮았다. 따라서 칠성장어 간조직 LDH는 하부단위체 A와 liver-specific $C_4$의 구조와 유사하게 진화되었으며, 하부단위체 C 는 진화속도가 매우 빠른 것으로 확인되었다. 칠성장어 간조직의 LDH는 단일 동위효소가 아니라, 하부단위체 A, B 및 C로 구성된 동위효소들인 것으로 사료된다.
spirometra ernacei의 제3기 유충 plerocercoid(sparganum)를 중간숙주인 흰쥐와 종숙주인 고양이에게 감염시켜서 회수한 sparganum과 성충의 non-specific esterase와 acid,alkaline phosphatased의 분포 및 isozyme pattern 변화를 비교하기 위하여 효소조직화학적 방법과 전기영동법을 이용하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 첫째,non-specific esterase는 sparganum과 성체의 근층과 유조직층에 많이 분포하였고 표피층에는 거의 분포가 없었다. 이의 isozyme band pattern은 sparganum에서 7개의 성체에서 8개의 isozyme band로 분리 되었는데 sparganum과 성체의 major band는 각각 3번과 4번 band였다. 둘째,acid phosphatse는 sparganum과 성체의 표피층과 근층에서 많이 부포하였고 유조직층에는 거의 분포가 없었다. isozyme band pattern은 sparganum과 성체에서 각각 3개의 band로 분리되었는데 3번 band가 major band였다.셋째, alkaline phoosphatase는 sparganum과 성체의 표피층과 근층에서 많은 분포를 보였으며 유조직층에서 더 상당한 분포가 있었다. isozyme band pattern은 sparganum에서 2개 성체에서 4개가 분리되었는데 sparganum성체 모두 2번 band가 major band였다.
Starch gel electrophoresis was used to examine the banding pattern of Esterase isozyme in the leaf, root-nodule and seedling of four wild legume species, Trifolim repense, Glycine soja, Phaseolus nipponensis and Vigna uexillata. The number of band, enzyme activity and migrating rate of esterase isozyme varies depending on the species and tissues of legume plants. The isozyme banding pattern in the cotyledon and radicle of T. repense showed same pattern, however, the number of band were varible among the cotyledon of G. soja, P. nipponensis and V. vexzllata, respectively. Est-1 in the leaf of G. soja, V, vexillata. root-nodule of G. soja and seedling of V. vexillata expreesed the highest enzyme activity. The Est-1 showed the rapidest migrating rate among the isozymes.
Horizontal starch gel electrophoresis, follow by enzyrne-specific staining, separate and visualize several legume esterase isozyme. Using extracts prepared from cotyledon, radicle and plumule of legume seedlings germinated 5 days. The results were as follows. 1. The number and staining intensity of esterase isozyme bands varies depending on the plant species. tissues and developmental stage. 2. Bands in the cotyledon of field bean seedling expressed 4 and 1 in radicle. 3. In soybean cultivars, cotyledon of IIwangkum-kong had 3 bands and 1 band in the examined tissues of Paldal-kong and Jangkyung-kong seedling. 4. The cotyledon and radicle of french bean seedling had 3 bands, respectively. 5. The highest esterase isozyme activity appears to be expressed in the cotyledon and radicle of french bean, as indicated by intensity of stain, with the Paldal-kong particulary active.
Isozyme and protein electrophoresis data from mycelial extracts of 27 isolates of Trichoderma harzianum, 10 isolates of T. aureoviride, and 10 isolates of T. longibrachiatum from Southern Peninsular Malaysia were investigated. The eight enzyme and a single protein pattern systems were analyzed. Three isozyme and total protein patterns were shown to be useful for the detection of three Trichoderma species. The isozyme and protein data were analyzed using the Nei and Li Dice similarity coefficient for pairwise comparison between individual isolates, species isolate group, and for generating a distance matrix. The UPGMA cluster analysis showed a higher degree of relationship between T. harzianum and T. aureoviride than to T. longibrachiatum. These results suggested that the T. harzianum isolates had high levels of genetic variation compared with the other isolates of Trichoderma species.
연어류의 종간교배 실험과 LDH, MDH, IDH, $\alpha$GODH, ME 등 다섯가지 isozyme에 대한 genetic marker로서의 활용 가능성을 알아보고자 1차적으로 연어, 산천어 및 무지개송어를 이용하여 종간교배를 실시하였고 이들 세종의 isozyme pattern을 비교하였다. 교배실험은 종간교배, 및 allotriploid 구간 등 12구간으로 나누어 실시하였으며 연어 암컷과 산천어 수컷의 교배결과가 초기성장 단계적에서 가장 우수하게 나타났고이들의 allotriploid도 부활율이 28.1%로 가장 우수하였다. Genetic identification을 위한 isozyme loci 분석결과 연어와 산천어는 대부분의 loci에서 거의 찾아볼 수 없었고 무지개송어는 MDH-B와 IDH에서 다형현상을 확인할 수 있었다. 특히 MDH-B loci는 b 유전자의 출현 빈도에서 세 종간의 식별이 가능하였으며, IDH pattern을 산천어와 무지개송어의 비교에 유효한 것으로 나타났다. 이들 두 loci는 hybrid의 genotype 분석시 유용한 marker로 활용할 수 있는 가능성을 보였고, 앞으로의 어류 육종에 좋은 기초 자료로 이용될 것으로 사료된다.
Four kinds of Nicotiana species and five varieties belonging to N. tabacum were used as materials for electrophoretic analysis of the tetrazolium oxidase isozyme to examine the taxonomic affinity among them based on the biochemical property. All the five verieties of N. tabacum showed same isozyme bands despite the fact that these varieties had notably varied characteristics including morphological traits. The band patterns were more or less different among the four species. Although N. rustica and N. tabacum were of the same genome group of AABB, their isozyme bands showed considerable difference. N. sylvestris, genome A donor of Nicotiana species, was found to be markedly different from N. tatacum in band pattern, including the absence of system 2 in N. sylvestris.
Serratia marcescens ATCC 25419를 질소원이 풍부한 BHI 배지에서 황산 암모늄 분별 침전을 시킨 후 DAEA-Sephacel chromatography, Phenyl-Sepharose hydrophobic chromatography, Sephacryl S-400 gel filtration, native gel elution을 거쳐 ALS isozyme Rf 0.83을 분리하였다. 분리한 ALS isozyme Rf 0.83의 native 형태는 gel filtration을 이용하여 분자량을 측정한 결과, 531,400이었고, SDS-PAGE를 수행한 결과 55,000의 large subunit와 38,900의 small subunit로 구성된 multimer임을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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