Red clover, ladino clover, white clover, alfalfa, 차풀 그리고 갈키나물등 6종의 콩과식물에서 잎과 줄기의 Esterase Isozyme를 추출하여 starch gel 전기영동법으로 분리한 후 염색하여 종간 차이점을 고찰하였다. 공시된 식물의 Esterase Isozyme의 band수, 염색강도, 이동속도는 종간에 차이가 있었다. 그러나 동일종에 있어서는 alfalfa를 제외하고는 잎과 줄기사이에 band의 수는 차이가 없었으며 차풀과 갈키나물에서는 전혀 나타나지 않았다.(Fig. 2). Esterase Isozyme의 염색강도와 이동속도는 Est 1 이 가장 강하고 빨랐다.
Isozyme과 AFLP분석에 있어 종간의 유전적 차이 및 유연관계를 분석에 따른 각 유전표식의 특징 및 유용성을 파악하기 위하여 종으로 명확히 구분되는 북반구 2종(H. discus hannai와 또 rufescens)과 남반구 2종(H rubra와 H midae)을 대상으로 분석한 결과 Isozyme 및 AFLP분석은 전복류의 종간분석에 있어 유전적 차이 및 유연관계 분석에 유용한 유전표식임을 시사하였다.
脊椎動物 網膜과 腦에 있어서 LDH isozyme pattern을 系統的으로 밝히기 위하여 cellulose acetate 電氣泳動法을 이용하여 실험한 결과 다음과 같은 結論을 얻었다. 1. 붕어와 잉어의 網膜과 腦의 LDH isozyme은 $LDH_1$과 $LDH_2$에 해당되는 부위에 彌滿된 단일 band가 觀察되었다. 잉어의 心臟, 胞筋, 肝臟, 胃의 LDH isozyme도 모두 다같이 퍼진 단일 band로 나타났다. 2. 도룡농과 개구리의 腦에 있어서 LDH isozyme pattern은 다르게 觀察되었다. 도룡뇽에서는 음극으로 移動된 단일 band가, 개구리에서는 $LDH_5$와 $LDH_4$ 두 개의 band가 검출되었다. 3. 유혈목이의 網膜과 腦에서는 다같이 하나의 band로 觀察되나 자라에서는 網膜과 腦의 isozyme이 다르다. 卽 자라의 網膜에서는 5個의 isozyme band가 觀察되었는데 그 농도는 $LDH_5, LDH_4, LDH_3, LDH_2$ 및 $LDH_1$의 순으로 낮아 졌다. 4. 닭과 사랑새의 網膜과 腦에 있어 LDH isozyme은 다같이 단일 band로 나타났다. 5. 집토끼, 개. 돼지, 소의 網膜에서도 포유류의 特徵的인 5個의 isozyme band가 검출되었고 mouse, albino rat, 관박쥐의 腦에서도 5個의 band가 검출되었다. 이러한 사실들로 미루어 보아 網膜과 腦의 LDH는 그 電氣泳動 이 대체로 비슷하여 두 器官은 유사한 pyruvate 代謝가 이루어지고 있는 것으로 추측된다.
젖산수소이탈효소의 isozyme 형을 8종의 담수산 어류에서 전기영동법으로 조사하였다. 이 isozyme형의 전기영동상의 분포는 명백한 종 특이성을 보여 준다. 그리고 이 isozyme은 random hybridizaiton이 아니고 선택적인 hybridization에 의하여 구성되고 있음을 시사하고 있다. 포유류와 달라 어류에서는 근조직과 뇌조직의 isozyme형이 동일한 형을 나타내는 경향이 있다.
In order to pursue some physiological studies on organogenesis in ginseng tissue culture, ginseng root explants were cultured on a modified MS medium containing NAA and kinetin. The activities of peroxidase and some enzymes were investigated and their isoenzyme patterns were also observed. The activity of peroxidase decreased by 20% in one week's culture and increased thereafter by 80% in culturing for 7 weeks compared with the control group. Glucose-6-phosphate dehydrogenase activity increased by 400% after culturing for 5 weeks and increased during the days preceeding root formation. The activities of glutamate dehydrogenase and acid phosphatase also increased during the culture. After 3 weeks' culture, new peroxidase isozyme (pH 7.6) appeared and 7 weeks' culture, another new peroxidase isozyme (pH unidentified) appeared. These patterns were also identified by using FPLC. After 7 weeks' culture, a new esterase isozyme of pH 8.5 appeared and isozyme patterns of acid phosphatase were quite changed compared with the isozyme patterns of tissue cultured for 5 weeks. In so far as these new isoenzymes appear distinctively after 7 weeks' culture, root differentiation is supposed to be induced after 7 weeks' culture.
Isozyme PAGE에 의한 isozyme polymorphism 및 random amplified polymorphic DNA(RAPD) pattern의 비교를 통하여 한국에서 수집된 63개의 표고 버섯(Lentinus edodes)품종의 유연관계를 조사하여 보았다. NTSYS PC program을 통하여 비교에 사용되어진 3가지 isozyme 즉 esterase, peroxidase, acid phophatase 등은 각각 10, 7, 3개의 isozyme polymorphism type으로 나뉘어질 수 있었고, 이러한 3개의 isozyme type들은 group-average method를 이용하여 최종적으로 6개의 집단으로 구분되어질 수 있었다. 또한 RAPD를 통한 표고 품종간 유연관계 비교는 사용되어진 총 20개의 random primer 들중 3개의 primer(OPA 03, OPA 18, OPA 19)가 품종간 polymorphism을 보였고 사용되어진 전체 random primer의 PCR product들의 집단 분석을 통해 최종적으로 5개의 집단으로 구분할 수 있었다. 사용되어진 두 가지 방법 즉, isozyme polymorphism및 RAPD pattern에 의해 구분되어진 63개 표고 버섯 품종의 subgroup level에서의 절대적인 유사성은 관찰할 수 없었다. Yii-Mattila(1996) 등에 의하면 품종간 비교시 isozyme analyses에서와는 달리 RAPD analyses에서는 많은 수의 strain-specific band들이 얻어질 수 있고 이것이 두 방법간의 유사성을 관찰하지 못하게 하는 원인이라고 보고하였다.
The esterase isozyme in tissue of wild legume plants were separated by horizontal starch gel electrophoresis. Extracts used in this study were prepared from fully expanded young leaf, cotyledon and radicle of seedling and root-nodule of Glycine sola, Vigna vexillata var. tsuscmensis and Trifoliwn repens. The results are as follows; 1. Each tissue examined had a characteristic banding pattcrn. Number of bands in each species, G. soja, V. vexillata, and T . repens, were 14, 8 and 1 1 bands, respectively. And difference in esterase isozyme bands were greater from tissue to tissue than difference between habitat. 2. Est-I, Est-2. Est-3 and Est-4 in G. soja, Est-I in V. vexillata and Est-l and Est-2 in T. repens showed strong cnzyme activity than other enzyme. 3. Esterase isozyme variation in G. soja and T . repens showed more variety than V. vexillata. This is resulted from many genotypic differences within species. 4. The main enLyme among thc esterase isozyme were Est-I. Est-2, Est-3 and Est-4.
This study was planned to identify the effect of low-temperature stress on Alcohol dehydrogenase(ADH) isozyme in sixteen varieties of Italian ryegrass using starch gel electrophoresis. The specific electrophoretic zymograms of each variety were observed by ADH isozyme. The results were summarized as follows: 1. All tested varieties displayed two band zone by ADH and R.f values were 0.63 and 0.60, respectively. 2. There were four band type for ADH isozyme of 16 varieties classified with ADH isozyme dyeing intensity. According to dyeing intensity 7, 2, 1 and 6 varieties belong to banding type I,II,III and IV, respectively(Fig.2-A, B). 3. The effect of short tern low-temperature stress induces ADH gene expresson in Italian ryegrass, which may reflect a fundmental shift in energy metabolism to ensure plant tissue survival during the low-temperature stress period.
Aspergillus sp.로부터 추출한 glucoamylase를 Sephacryl S-200과 DEAE-Sephacel 이온교환 칼럼을 통과시킨 후, 2개의 Isozyme으로 분리하였다. 분리된 glucoamylase isozyme(GI, GII)의 효소학적특성을 각각 조사하였다. GI 및 GII isozyme의 활성최적 pH 및 온도는 pH4.5 및 $65^{\circ}C$였다. 분리된 효소는 pH 3-7 사이에서 안정했으며, 또한 55$^{\circ}C$ 이하에서 안정하였다. Hg$^{++}$는 효소 황성을 완전히 저해하였으나, 글리세롤은 효소의 안정성을 크게 증가시켰다. 효소반응의 활성화에너지는 GI의 경우 10,62 kcal/mole이었으며, GII의 경우에는 10.23kcal/mole이었다. GI isozyme의 기질에 대한 Km값은, 0.62% (soluble starch), 0.32% (dextrin), 1.03%(glycogen)이었으며, GII isozyme의 경우에는, 0.66%(soluble starch) 0.23%(dextrin), 그리고 0.14% (glycogen)이었다.
반하의 조직부위별 배양기간에 따른 단백질 및 4종의 중요 효소에 대한 전기영동적 특성이 비교연구 결과는 다음과 같다. 1. 각 조직 유내 Callus의 단백질 pattern 은 야생식물체 각 조직과 현저한 차이가 있었다. 2. 각 조직 유내 Callus의 Esterase isozyme pattern은 야생 식물체 각 조직과 뚜렷한 차이가 있었다. 3. 각 조직 유내 4주 배양 Callus의 GOT isozyme pattern은 야생식물체 각 조직과 비슷하였으나 배양 8주 Callus에서는 분자량이 큰 새로운 isozyme band 1개가 출현하였다. 4. 각 조직 유내 4주 배양 Callus의 Peroxidase isozyme band pattern 에서는 야생식물체 총 기관에서 출현했던 1개의 분자량이 작은 band 가 나타나지 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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