인슐린 유사 성장 호르몬 1과 2 (IGF-1 & IGF-2)는 착상 전 초기배아 발생을 조절하는 중요한 요소이다. 생쥐 착상 전 초기배아에서 IGF-1의 역할에 관한 연구를 위해, IGF-1과 IGF-1 수용체의 전사물의 존재 여부를 난자와 착상 전 초기배아에서 조사하였다. 새로이 고안된 IGF-1 primer를 이용하여 난자에서 전사물을 검출하였다. 그리고, PCR 산물을 제한효소인 Msp I으로 절단하여 확인하였다. 이 실험에서 IGF-1과 IGF-1 수용체의 전사물이 난자와 착상 전 초기배아에서 모두 검출됨을 보였다. GV-난자에 다량 존재하는 mRNA는 4- 혹은 8-세포기까지 지속적으로 감소하다가 이후에 다시 증가하는 양상을 보였다. GV-난자에서 IGF-1과 IGF-lR 전사물이 존재한다는 것은 초기배아에 존재하는 전사물이 모계유래 산물임을 암시한다. 또한, 난자와 착상 전 초기배아에 IGF-1과 IGF-1 수용체 전사물이 존재하는 것으로 보아 착상 전 초기배아에서 IGF-1은 자가 분비되어 IGF-1 수용체의 신호전달 경로를 통하여 배아발생에 작용하는 것으로 사료된다.
The objectives of this study were to characterize the changes occurring in the levels of insulin-like growth factors (IGF-I and IGF-II) in bovine milk during a one-year lactation period, and to determine the parameters affecting IGF content in bovine milk. Milk was collected individually from lactating Holstein cows (n=70), and IGF-I and -II levels were determined via radioimmunoassay, using 125I after acid-ethanol treatment. The proximate compositions of the milk samples were determined using a near-infrared milk analyzer. The data were analyzed by the GLM and CORR procedures using SAS software to determine significant differences (p<0.05) occurring within groups (dairy farms, lactation periods, season, and parity). We noted an approximately six-fold reduction in the IGF-I concentration (from 2,462.7 to 353.0 ng/ml) and a three-fold drop in the IGF-II concentration (from 929.1 to 365.7 ng/ml) in the bovine colostrum, between 6 h after parturition and 18 h after parturition. IGF-I and -II content, measured at the early, middle, and late stages of lactation did not change significantly throughout the entirety of the lactation period. Interestingly, parity did not significantly affect IGF-I content, but did significantly affect IGF-II content between the primiparous and multiparous cows. We also found there were no significant relationships between IGF-I and total protein content or somatic cell counts (p<0.05).
The polymorphism of insulin-like growth factor I receptor (IGFIR) gene in 12 pig breeds (total n = 593) was detected by PCR-SacII-restriction fragment length polymorphism and allele A (379 bp) or allele B (235 bp and 144 bp) observed. In the studied breeds, it was found that European pigs principally carried allele A, while Chinese native pig breeds principally carried allele B. In addition, the role of pig IGFIR was investigated in 156 Wanbai pigs and 212 Large Yorkshire pigs. Growth related variables including body weight at birth, 2-, 4- and 6-mo of age and backfat thickness and lean percentage estimated by ultrasonography at 6-mo of age were recorded in analyzing the association between IGFIR gene polymorphism and growth traits. AA-genotype pigs exhibited greater (p<0.05) body weights (BW) at birth, 2- and 6-mo of age, but not at 4-mo of age, than those of the BB-genotype in Wanbai and Yorkshire breeds. Moreover, in the Yorkshire breed, AA-genotype pigs had less backfat thickness (p<0.05) and greater lean percentage (p<0.01) than the BB genotype. Based on these results, it is necessary to do more studies on IGFIR before introducing the IGFIR locus into breeding programs.
인체의 다양한 기능을 증진시키는 작용을 하는 것으로 알려진 IGF-I의 생체내 분비를 촉진시키기 위해 천연 생약재성분으로 구성된 YGF251을 개발하였고 YGF251의 효능을 측정하였다. 이중 맹검 시험 방식으로 40세에서 70세 사이의 성인 남녀 31명을 대상으로 IGF-I을 비롯하여 체중, 혈압, 간기능 검사 및 신장기능 검사를 실시하였다. YGF251 및 위약 투석 후의 IGF-I 함량변화에 대한 대응표본 검정결과는 YGF251 투여군에서 투여 전에는 245.6 ng/mL 이었는데 1개월 투여 후에는 269.3 ng/mL, 2개월 투여 후에는 275.6 ng/mL으로 유의하게 증가하였다 (p<0.05). 한편 위약 투여군에서는 투여 전에는 280.0 ng/mL이었으나 1개월 투여 후에는 239.2 ng/mL, 2개월 투여 후에는 230.2 ng/mL으로 유의하게 감소하는 결과를 보였다(p<0.05). 혈중 insulin함량은 실험군의 경우 YGF251 을 1개월 투여후 평균치로써 2배 정도의 증가를 보였으며 위약 투여군에서는 36% 정도 감소된 것으로 나타났다. 또한 YGF251투여에 의한 체중 및 혈압의 변화는 거의 나타나지 않았다. YGF251 투여에 의해 나타날수 있는 간기능 및 신장기능 변화를 관찰 하기 위해 여러 항목들의 수치는 측정 오차 범위내에서의 변화만을 나타내었다.
치주조직재생에 중요하게 생각되는 요건으로는 치근면의 상태, 전구세포의 증식, 치유 부의 상피조직배제, 치유부의 안정화를 들 수 있으며 이중 가장 중요한 요건중의 하나가 치유부에 치주조직재생을 도모할 수 있는 전구 세포가 실수부로 이주하여 부착과 증식, 분화를 통하여 교원질섬유를 포함한 결체조직의 부착과 백악질, 골조직을 재형성하는 것이다. 최근에 이러한 전구세포들을 자극하고 원치 하는 세포들을 저지하기 위한 방법으로 성장 인자에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다 골조직을 조절하는 인자로 알려진 인슐린유사성장인자- I (Insulin-like growth factor-I)는 폴리펩타이드계 성장인자로서 골세포의 증식, 기질합성 등을 촉진시킨다고 보고되고 있으나, 치주조직 재생에 대한 IGF- I 의 영향을 잘 규명되어 있지 않으므로 배양된 치주인대세포에 IGF- I 을 농도별로 주입하여 세포의 증식능, 교원질 및 단백질 합성능, 알카린인산효소활성도를 측정해 보므로써 IGF- I 이 치주인대세포의 활성에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 교정치료를 위해 내원한 환자로부터 건강한 제일소구치를 발거하여 치주인대세포를 분리, 배양하여 IGF- I 을 주입시키지 않은 군을 대조군으로 하고, IGF- I 을 각각 0.1, 1, 10, 100 ng//ml로 주입시킨 군을 실험군으로 하여 DNA합성능, 총단백질과 교원질 합성능 및 알카린인산효소활성도를 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. DNA 합성능에 미치는 IGF- I 의 효과는 농도가 증가함에 따라 0.1ng/ml를 제외하고는 DNA 합성능이 증가하는 경향을 보였고, 대조군에 비해 10, 100ng/ml투여군에서 통계적으로 유의한 차이(P<0/05)를 나타내었다. 치주인대세포의 총단백질 합성양에 미치는 IGF- I 의 효과는 농도가 증가함에 따라 총단백질 합성양이 증가하는 경향을 보였으며, 대조군에 비해 1, 10, 100ng/ml 투여군에서 통계학적으로 유의한 차이(P<0.001)를 나타내었다. 총단백질을 교원질(collagenase digestible protein : CDP)과 비교원성 단백질(non-collagenous protein : NCP)로 분류하여 비교하였을때 IGF- I 의 농도가 증가함에 따라 비교원성 단백질 합성양과 교원질 합성양이 증가하는 경향을 보였으며, 비교원성 단백질 합성양이 교원질 합성양보다 약간 높게 나타났고, 대조군에 비해 1, 10, 100ng/ml 투여군에서 통계적으로 유의한 차이(P<0.05, P<0.001)를 나타내었다. 총단백질에 대한 교원질합성의 상대적 비율은 농도가 증가함에 따라 각 군당 별차이를 보이지 않았으며, 대조군에 비해 통계적으로 유의한 차이 (P>0.05)를 나타내지 않았다. 알카린인산효소활성도에 미치는 IGF- I 의 효과는 모든군에서 7일째보다 14일째에서 약간 높은 알카린인산효소활성도롤 나타내었으며, 7, 14일 모두 농도가 증가함에 따라 효소활성도가 증가하였으며, 7일째 대조군에 비해 100ng/ml 투여군에서 통계적으로 유의한 차이(p<0.05)를 나타내었다.
Protein kinase C는 세포의 신호전달계에 관여하는 중요한 조절효소로서 여러 가지 세포의 분화와 증식과도 밀접한 관련이 있다. 신생아의 포피 keratinocyte를 농도 200 ng/ml의 human recombinant epidermal growth factor (hrEGF)와 human recombinant insulin-like growth factor-1 (hrIGF-1) 그리고 hrEGF와 hrIGF-1의 혼합액을 각각 첨가하여 24시간 배양한후 세포질과 세포막의 PKC단백질을 추출하여 그 농도를 측정하고, Western blot analysis를 이 용하여 각 growth factor들의 PKC isoenzyme에 대한 영향을 분석하였다. 세포질의 총 PKC 단백질의 농도는 hrIGF-1을 처리한 keratinocyte에서 가장 높았으며, 세포막에서는 대조군의 단백질 농도가 가장 높게 나타났다. EGF를 처리한 keratinocyte의 세포질에서 는 PKC-$\beta$II, -$\delta$, -$\theta$가 막성분에서는 PKC-$\alpha$, -$\beta$I, -$\delta$, -$\Im$, -$\theta$가 증가하였다. IGF-1을 처리한 군의 세포질성분에는 PKC-$\beta$I, -$\Im$, -$\theta$, 막성분에서는 PKC-$\alpha$, -$\beta$I, -$\delta$, -$\Im$, -$\varepsilon$, -$\theta$가 증가하였다 EGF와 IGF-1의 혼합처리 군에서는, PKC-$\alpha$, -$\beta$I, -$\Im$, -$\theta$이 세포질에서, PKC-$\alpha$, -$\delta$, -$\Im$, -$\varepsilon$, -$\theta$은 세포막에서 증가하였다.
인삼은 전통적으로 항당뇨 효과가 있는 것으로 보고되고 있다. Insulin-like growth factor (IGF)-I 역시 당뇨병성 신증의 발병 초기에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이에 본 연구에서는 신장 근위세뇨관 세포에서 고포도당에 의한 IGF-I 분비에 대한 ginsenoside의 차단 효과 및 이와 관련된 신호전달계를 알아보았다. 결과는 다음과 같다. 고포도당에 의해 증가되었던 IGF-I분비 촉진 작용은 GTS, PD 및 PT 처리 시 차단되었으며, 세포 성장 작용 (세포 비대)에서도 같은 효과를 볼 수 있었다. 아울러 고포도당에 의한 cAMP 및 PKC 활성은 GTS 처리시 현저하게 차단되었으며 PD 및 PT 처리 시 역시 부분적으로 억제되는 것으로 나타났다. 이상의 결과를 볼 때 신장 근위세뇨관 세포에서 ginsenoside는 cAMP 및 PKC 활성 경로를 억제하여 고포도당에 의한 IGFs 분비 작용을 차단하는 것으로 나타났다.
자궁은 임신에 필수불가결한 기관으로, 에스트로겐(E2)과 프로게스테론(P4)은 태아와 자궁 사이의 상호 신호전달을 적절하게 조절하여, 임신을 확립하게 하는 필수적 요소이다. 임신 초기 E2는 배아의 안정적인 착상을 위하여 자궁의 성장을 촉진하는 역할을 담당한다. 이 시기 자궁에서 분비되는 인슐린유사 성장인자-I(IGF-I)와 E2/P4 간의 상호 신호전달이 임신 확립에 있어서 매우 중요한 역할을 한다. E2는 에스트로겐 수용체(ER)에 의해 그 작용이 결정되어지는데, 임신 돼지 자궁에서는 ER-${\alpha}$만이 발현됨을 증명하였다. 자궁에서 ER-${\alpha}$의 발현은 임신 중기나 말기보다 임신 초기 단계에서 높게 발현됨이 관찰되었다. 이는 배아에서 분비되는 E2가 ER-${\alpha}$의 발현을 증가시키는 역할을 함을 보여주는 결과이다. IGF-I이 E2 표적 유전자임을 증명하기 위하여 난소를 제거한 쥐에 E2/P4를 처리한 후 IGF-I의 발현을 측정한 결과, E2를 처리한 샘플에서는 IGF-I의 발현이 크게 증가하였으나, P4를 처리한 샘플에서는 큰 영향을 받지 않는 것으로 나타났다. 이 결과는 E2가 자궁에서 IGF-I의 발현을 증가시키는 역할을 수행함을 직접적으로 증명하였다. 임신한 돼지의 자궁에서 임신 시기별로 IGF-I 유전자의 발현을 조사한 결과 임신 초기에 가장 높은 발현을 보였고, 이 양상은 ER-${\alpha}$의 발현 형태와 아주 유사한 패턴을 나타내었다. 이는 임신 자궁에서 ER-${\alpha}$와 IGF-I의 발현이 상호 연관되어 있으며 ER-${\alpha}$와 IGF-I은 E2에 의해서 조절되어지는 유전자이며, 임신초기 배아에서 분비되는 E2가 자궁에서 ER-${\alpha}$의 발현을 증진시키고, 나아가서 이 ER-${\alpha}$가 자궁에서 IGF-I 유전자의 발현을 증가시키는 역할을 함을 보여주는 결과이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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