본 연구에서는 참당귀 현탁세포배양에 의한 면역 증강성 ECP의 생산을 증진시키기 위하여 배지교환식 배양을 수행하였으며, ECP의 분비를 촉진하는 초음파 처리와 Pluronic F-68의 영향을 조사하였다. 참당귀의 현탁세포배양시, 최대 세포생장은 6일째에 16.8 g DCW/L였고, ECP의 생산은 세포생장과 함께 증가하다가 8일째에 최고 0.9 g/L가 생산되었다. 식물세포 고농도배양법인 배지교환식 배양을 적용해, 초기 당 농토를 높이고 접종 후 5일부터 연속적으로 배지교환을 해주어 23.8 gDCW/L의 고농도의 현탁세포를 얻을 수 있었다. 초음파 처리 및 Pluronic F-68의 첨가는 참당귀 세포의 세포막의 투과성을 증진시켜 ECP의 생산성을 높임과 동시에 세포 내의 다당의 배지로의 배출을 유도한 것으로 판단된다.
고정화 배양계를 이용하여 감 즙으로부터 식초생산을 효율적으로 행하기 위하여 Saccharomyces cerevisiae의 고정화 형성조건을 검토하였다. 고정화를 위한 최적 Na-alginate의 농도는 2%이었다. 담체의 농도를 1-4%로 변화시키면서 gel beads로부터 누출되는 효모 균수를 검토한 결과, 1%의 농도에서는 배양 8시간째부터 배양액의 탁도가 흐려지는 것이 관찰되어 배양 20시간째에 0.82의 흡광도를 나타내었다. 그러나 2-4%에서는 거의 변화가 없었다. 배양이 끝난 후, 전자현미경으로 gel beads내부의 균주 생육상태를 관찰한 결과 고정화한 효모는 Na-alginate의 농도에 관계없이 왕성하게 생육하였다. Gel beads의 크기는 2-3mm정도가 최적이었고, 효모의 최적 접종량은 약 33mg이었다. 효율적인 에탄을 생산을 위한 산소공급 시간을 검토한 결과, 배양초기부터 12시간까지는 면전으로 호기적 배양을 행하고, 그 이후부터는 check valve가 부착된 실리콘 plug를 사용하여 혐기적 배양을 행하는 것이 효과적이었다.
Norovirus has become the most common cause of human gastroenteritis in developed countries. Detection procedures of foodborne viruses from foods require several steps. The concentration step using polyethylene glycol (PEG) is time-consuming and the detection efficiency of reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) is affected by inhibitors from food components. In this study, a rapid detection method based on buoyant density centrifugation was developed to replace the time-consuming chloroform-polyethylene glycol-Tris Tween method. Feline calicivirus that belongs to the family Caliciviridae was used as a surrogate model for norovirus. After artificial inoculation of feline calcivirus (FCV) to oyster and lettuce, 830 ${\mu}L$ of homogenized sample suspension was layered on the top of 670 ${\mu}L$ 20% percoll and centrifuged. Then RNA extraction step was proceeded with the supernatant. By varying several physical conditions, the detection limits were lowered to $2.4{\times}10^2$ PFU per 1 g in oyster and $2.4{\times}10^0$ PFU per 1 g in lettuce. The protocol obtained in this study could be used to develop new detection method for norovirus in foods.
In traditional mixotrophic cultures of microalgae, all the inorganic nutrients and organic carbon sources are supplied in the medium before inoculation. In this study, however, an alternative approach was adopted in Haematococcus pluvialis Flotow, a microalga capable of growing mixotrophically on sodium acetate (Na-Ac). First, the cells were grown under 75 ${\mu}Mol$ photons $m^{-2}s^{-1}$ phototrophically without Na-Ac until the stationary phase and then exposed to five different light regimes by the addition of Na-Ac (e.g., dark, 20, 40, 75, and 150 ${\mu}Mol$ photons $m^{-2}s^{-1}$). Dry weight (DW), pigments, and especially cell number in alternative mixotrophy (AM) were higher than traditional mixotrophy (TM). Cell number in AM almost doubled up from 21.7 to $42.9{\times}10^4$ cells/ml during 5-day exposure to Na-Ac, whereas the increase was only 1.2-fold in TM. Maximum cell density was reached in 75 ${\mu}Mol$ photons $m^{-2}s^{-1}$ among the light intensities tested. We propose that Na-Ac in TM of H. pluvialis can not be utilized as efficiently as in AM. With this respect, AM has several advantages against TM such as a much higher cell density in a batch culture period and minimized risk of contamination owing to the shorter exposure of cells to organic carbon sources. In consequence, this method may be used for other strains of the species, and even for the other microalgal species able to grow mixotrophically.
인삼 뿌리에 발생하는 적변현상을 구명하기 위하여 적변삼표피의 형태적 특성, 세균의 밀도 및 무기물 함량의 변화를 조사한 결과, 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 적변삼의 표피는 건전삼에 비하여 두꺼웠으며, 세포벽이 분해되어 심하게 파괴되어 있었다. 그러나 건전삼의 경우에는 세포가 장방형의 일정한 형태를 유지하고 조직의 파괴도 전혀 발생하지 않았다. 2. 파괴된 적변삼의 표피조직에는 막대모양의 세균이 다수 존재하였으며, 세균밀도는 2.9$\times$$10^{6}$-3.5$\times$$10^{7}$ CFU/g(fresh weight)으로 많은 세균이 분리되었다. 건전삼표피조직에서는 세균이 거의 관찰되지 않았으나, 세균밀도는 4.7$\times$$10^2$-1.2$\times$$10^3$ CFU/g(fresh weight)으로 적변삼에 비하여 매우 낮게 나타났다. 3. 인공적으로 분리세균을 접종하여 적변을 유발시킨 표피조직에서도 자연발생 적변삼에서와 동일한 표피조직의 파괴양상을 보였으며, 다수의 세균이 관찰되었다. 4. 적변삼의 표피조직에서는 Al, Si 및 Fe의 함량이 높았으나, 건전삼에서는 K의 함량이 높게 나타나 적변현상의 발생은 표피조직에서 무기물 함량의 변화를 유발하였다
The production of antibiotic substances by Serratia plymuthica A21-4 was greatly enhanced by modifying components of a growth medium. When the minimal medium containing $K_2HPO_4$ 0.7%, $KH_2PO_4$ 0.2%, $(NH_4)_2SO_4$ 0.1%, $MgSO_4$ 0.01% was used as basal medium, the best carbon source for antibiotic production was glycerol and the most favorable nitrogen source was ammonium sulfate. The modified medium for antibiotic production also increased colonization ability of A21-4 on pepper root and in the rhizosphere soil. When the cells of A21-4 were suspended in modified medium, the population density of A21-4 on pepper root was 10-100 times higher than that suspended in 0.1 M $MgSO_4$. The population density of A21-4 on root did not decrease under $10^6$ cfu/groot up to 21 days after treatment although the inoculum of A21-4 was reduced to $10^7$ cell/ml. Similar tendency was also observed in the rhizosphere soil. Consequently, Phytophthora blight of pepper was successfully controlled by A21-4 with $10^7$ cell/ml suspended in the modified buffer solution instead of $10^9$ cfu/ml suspended in 0.1 M $MgSO_4$.
본 연구는 산성광산배수를 유발하는 광미를 연료전지 기술에 적용하여 유용하게 활용할 수 있는지 알아보기 위해 수행하였다. 황철석 성분을 함유한 광미와 철산화를 촉진하기 위한 철산화균을 포함한 토착세균을 사용하여 미생물연료전지를 구성하여, 광미 내 황철석 함량이 높을수록 연료전지의 전기적 효율이 향상됨을 확인하였다. 또한, 광미를 활용한 연료전지에서 토착세균 주입을 통해 전류밀도와 전력밀도를 각각 3배, 10배 정도 향상시켜, 철산화에 관여하는 미생물의 주입이 광미를 이용한 연료전지 효율 향상에 도움이 됨을 확인하였다. 본 연구는 광산 지역 토착세균의 생태학적 기능을 연료전지 기술과 활용해 광미로부터 오염유발 우려물질을 저감함과 동시에 전기 생산이 가능함을 확인하여, 광미를 활용한 미생물연료전지 기술이 광미의 무해화 및 전기 생산을 위한 기술로 사용될 수 있음을 보여준다.
Korean pine (Pinus koraiensis Sieb. et Zucc.), a five-needle pine, has recently been suffering pine wilt disease caused by non-native pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus. Three-year-old Korean pine seedlings were inoculated with 10,000 pathogenic nematodes in a greenhouse to investigate disease development, water content and the density of nematodes in stems. Needle dehydration, xylem drying and pith browning started 20 days after inoculation (DAI). There were significant differences between seedlings inoculated with nematodes and control seedlings in the relative water content of stems and leaves at 20 and 30 DAI. At 60 DAI, all remaining seedlings inoculated with nematodes had died, but control seedlings all remained alive. The average number of nematodes recovered from stems of Korean pine dramatically increased from 10 to 20 DAI, and then decreased at the end of the experiment at 60 days. This study suggests that the relative water content of stems and leaves in current-year branches could be used as a useful physiological indicator for early diagnosis of pine wilt disease.
A method of spawn making procedures through the application of fermented sawdust for the purpose of avoiding contamination by undesirable fungi in the course of Pleurotus ostreatus mycelial growth was evaluated. Of three kinds of supplements, rice bran was the most effective to raise temperature up to $70^{\circ}C$. Mycelial activity and density was more considerably improved in the case of using fermented sawdust supplemented with rice bran than the case of non-fermented sawdust. Primordia of Pleurotus ostreatus were formed on fermented sawdust. The substrate of fermented sawdust showed potential to prevent the growth of Trichoderma sp. which caused a symptom on mushroom mycelium, whereas there was nothing to inhibit the growth of Trichoderma sp. during 30 days after inoculation in non-fermented sawdust.
The effects of heavy metals on the growth rate and phosphate metabolism of Chlorella elliposidea cells were investigated. Chlorella cells were cultured in the media treated with Hg(0.3, 0.7, 0.9 ppm), Cd(1, 5, 15ppm), and Zn(1, 5, 50ppm) for 6days. Aliquots cells were taken out at the inoculation and at intervals during the culture, and measured packed cell vlolume and optical density. The inhibitions of heavy metals on the growth rate and chlorophyll contents were traced. Also after 6 days culture, the amounts of inorganic phosphate and organic compounds of various fractions in Chlorella cells were observed. The turbid effects of heavy metals on the growth rate and chlorphyll contents of Chlorella cells were in order of Hg>Cd>Zn. Because heavy metals depressed the biosynthesis of inorganic polyphosphates and nucleic acids and turn over of inorganic phosphates, the amounts of various phosphate compounds were decreased. The inhibitory effect of photosynthesis by heavy metals resulted in lower contents of carbohydrate. Due to the turbidity of biosynthesis of amino acids by heavy metals, contents of protein were reduced in comparison with those of control. It is suggested conciusively that the minimum concentrations affected by heavy metals on the growth rate and phosphate metabolism of Chlorella cells were 0.7 ppm Hg, 15ppm Cd, 50ppm Zn.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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