Kim, Poong Ho;Park, Yong Soo;Park, Kunbawui;Kwon, Ji Young;Yu, Hong Sik;Lee, Hee Jung;Kim, Ji Hoe;Lee, Tae Seek
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.49
no.4
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pp.454-459
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2016
Pre- or post-harvest processing is required to mitigate the risk of norovirus infection mediated by shellfish or seafood. We investigated the environmental resistance of human norovirus (HuNoV) under various conditions of temperature, salinity, and pH in seawater. Male-specific coliphage (MSC) was as the reference virus for all tests. At 4℃, HuNoV GII4 spiked into seawater was continually detected by RT-PCR for 35 days, regardless of salinity or pH level. It maintained nearly stable concentrations, meaning HuNoV can sustain a viral population in seawater long enough to be accumulated by shellfish and other filter feeders during winter. MSC was also stable at 4℃ although viral infectivity dropped sharply after 28 days. The effects of salinity and pH on MSC were indistinct. At 25℃ the detectable period of HuNoV GII4 by RT-PCR in seawater decreased to about one-third or half of the period at 4℃. High salinity (32 psu) and alkaline pH (8.5) were also unfavorable for sustaining HuNoV abundance at 25℃ in seawater. The resistance patterns of MSC to high temperature, high salinity, and alkaline pH were more dramatic and viral infectivity decreased over time, almost in direct proportion to experimental days. MSC was undetectable after 12 days under all salinities and pH levels at 25℃.
An experimental study was performed to observe the infectivlty of sparganum (plerocercold of Spirometra erinncel) treated by prazlquantel, gamma-irradiation and mechanical cutting. The spargana were obtained from the naturally Infected European grass snake, Rhabdophis tigrina, or from the expenmentally infected mice. A total of 83 mice (ICR straine were divided Into 3 experimental groups by the source of the damage, fed each UH 5 spargana, and sacnaced 1 month later for worm recovery. In the praziquantel group, the worms were incubated In the concentration of 10㎍/ml (control: Tyrode for 4 hours) for 0.5. 1.2 and 4 hours at 36℃. and fed to mice. The recovery rate from mice in prazlquantel group was not different from that (80%) of control poop and in the range of 76-100%. In the gamma-Irradiation group, the worms were irradiated by 10-1000 Gy with Csl37. The average recovery rates of 69-100% were not different from that of control up to 100 Gy. The rate was 56% under 150 Gy, and 5% by 1000 Gy. In the mechanical cutting group, the worms were cut at 0.5, 1, 2 and 3 m from the anterior end of the scolex. The average recovery rates In each group were 70-90% and that of control was 90%. The present folding suggests that the sparganum be highly resistant to prazlquantel, gamma- irradiation and mechanical cutting. The vitality center of the sparganum must be at the anterior end of Its scolex.
The development of Echinestcma cinetorchis in several snail species reared in laboratory aquaria was observed. The eggs from adult cukes collected from the intestine of rats were cultivated to miracidia, and exposed to Hippeutis sp. snails. Observations were made for cercarial shedding from the exposed snails. The cercariae shed from the snails were again exposed to several species of fresh water snails in order to observe metacercarial formation in the snails and their infectivity to final hosts. The results obtained in this study were as follows: 1. Twenty miracidia were exposed to each snail of Hippeutis sp. About 58.3% of the above snails (7 out of 12) were dead before shedding the cercariae, anti the remainder shed the cercariae for a period of 7 to 9 days before death. 2. Cercarial shedding from the infected snails started from the 25th day after the exposure to mi.acidia, and the total number of cercariae shed per snail was 684 in average (range; 482-904). 3. The sixte of refine developed in the infected Hippeutis sp. snails was 1$, 242{\times}214{\;}{\mu}m$ in average, and the number of rediae per snail was 350 in average (range; 120-510). 4. About 40 to 50 cercariae shed from the Hippeutis sp. snails were each exposed to several species of snails reared in the laboratory. The metacercarial formation was confirmed by dissecting the infected snails, 12 to 16 days after the infection. The infectivity to each snail species was 100% in Hippeutis sp. (recovery rate; 56.7%) and Radix auricuzaria coreana (recovery rate; 66.4%), 66.7% in Physa acute (recovery rate; 37.5%), and 50% in Cipangopaludina sp. (recovery rate; 8.0%), respectively. 5. The swimming cercariae attached first at the cephalo-podial part of the snails and then migrated to the mantle, internal organ s and hemocele areas to form the metacercariae. 6. Adult worms of E. cinetorchis were obtained from the rats infected with the metacercariae encysted in the experimental snails. Summarising the above results, it is suggested that the mud-snail (Cipangopaludina sp.) may play an important role as a source of human infection with E. cinetorchis in Korea, and that several species of fresh water snails are involved in the life cycle as a second intermediate host.
An experimental study was carried out to observe the effects of radiation on the infectivity of metacercariae of Gymnophalloines seoi to C3H mice. Oysters, the second intermediate host, were collected from an endemic area, and non-irradiated control, metacercaria-irradiation, and oyster-irradiation groups were prepared . One hundred metacercariae were infected orally to each mouse, and worm recovery rate was compared by groups at 7th day post-infection. In the metacercaria-irradiation group, the worm recovery rate was significantly reduced at radiation doses higher than 200 Gy, and the number of intrauterine eggs significantly reduced at doses over 50 Gy. In the oyster- irradiation group, 50 Gy significantly reduced both the worm recovery rate and number of uterine eggs. In the two groups, no worm was recovered at 1,000 Gy irradiation. Conclusively, irradiation of oysters with 200-1,000 Gy was effective to control infectivity of metacercariae to C3H mice, and could be adopted as a control measure for gymno-phalloidiasis.
This experiment was conducted on the fowl pox embryo vaccine for the production immunity, and stability, using an attenuated fowl pox virus (Nakano strin). Burnet's window method was applied, that is, 0.1 ml. of seed virus was inoculated on the chorioallantoic membrane of 12-day old chicken embryos, and incubated for 5 to 6 day, and then the result were read. Four kinds of suspensions of different embyo tissue were prepared and tested for the infectivity in chickens. Finally the suspension of chorioallantoic membrane was used as the vaccine throughout the experiment. Results obtained in this experiment are summarized as follows: (1) Of embryo tissue infected with the vaccine virus, chorioallantoic membrane had the highest virus titer of $10^{-5.4}$$EID_{50}$, and albumen the lowest titer of $10^{-0.7}$$EID_{50}$. (2) Suspensions of infected whole embryo with or without saline, and de-embryonated whole egg had about the same virus titer of $10^{-4.4}$$EID_{50}$, whereas the chorioallantoic membrane had $10^{-5.7}$ EID 50 or higher. The virus titer droped one log from $EID_{50}$ when inoculated into chickens. Takes were observed 35.6% of 500 chickens by stick method and 89% of 500 chickens by brush method. (3) The chorioallantoic membrane conferred almost perfect immunity for chickens by 10 days after vaccination. (4) Satisfactory immunity was observed in the chickens when eruption in a single follicle. (5) Eight of 10 vaccinated chickens revealed durable immunity for 307 days following vaccination. (6) The vacuum-dried vaccine maintained its infectiviy for 899 days at $5^{\circ}C$ or below and maintained the vius titer of $10^{-3.6}$$EID_{50}$. On the other hand, non-desiccated wet vaccine maintained the titer of $10^{-3.0}$$EID_{50}$ for 50 days of preservation period at $5^{\circ}$. However, in 50% glycerin-saline the infectivtiy of the same wet vaccine dropped to $10^{-1.5}$$EID_{50}$ (7) The vartation of virus titer of the vaccine before and after desiccation was $10^{-0.5}$$EID_{50}$ on the average. (8) As suspending media, 0.85 per cent saline and distilled water showed nearly the same effect on the infectivity of the vaccine by retaining the titer $10^{-3.0}$$EID_{50}$ after 50 days of preservation both at $5^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$, while 50 percent cent glycerine-saline dropped the titer to $10^{-2.5}$ EID and $10^{-1.5}$$EID_{50}$ respectively at $5^{\circ}C$ and $2^{\circ}C$ after the same period.
Park, Hyun-Rho;Ryu, Young-Hyun;Yeon, Il-Kyen;Nam, Sung-Hee;Kim, Dong-Geun;Han, Myung-Sae
Korean journal of applied entomology
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v.53
no.1
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pp.27-34
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2014
Entomopathogenic fungi were isolated from Bemisia tabaci in an Oriental melon field, and their growth characteristics, factors related to a natural outbreak, and infectivity against Bemisia tabaci, Tetranychus urticae, and Frankliniella intonsa were investigated. The isolates had erect conidiophores bearing whorls of 4-6 phialides with a swollen base where cylindrical conidia of $3.0-3.4{\mu}m$ were attached. The isolates were identified as Isaria fumosorosea on the basis of morphological characteristics and an ITS sequence with 99% similarity. I. fumosorosea IFs-08 grew well on Sabouraud dextrose agar+yeast extract medium(3.2 mm/day/$24^{\circ}C$); it grew better at $35^{\circ}C$ than at $15^{\circ}C$. The isolates of I. fumosorosea-IFs were highly infective and killed 93.9-96.7% B. tabaci, 84.9-92.0% T. urticae, and 81.5-84.4% F. intonsa in bioassay, whereas three isolates (Isaria tenuipes, Isaria farinosa, and Isaria fumosorosea) from KACC showed a low infectivity of 10-20%. To the best of our knowledge, this is the first report of I. fumosorosea isolated from B. tabaci in Korea.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.3
no.1
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pp.105-108
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2001
The wild entomopathogenic fungi, Cordyceps militaris, were collected at the Whawang mountain, Korea. The pupae of the silkworm, Bombyx mori, were used as infecting hosts for the production of the silkworm-mili-taris dongchunhacho, silkworm vegetable wasps and plant worms with C. militaris. Three inoculation methods in terms of injection, spray and immersion were tested against the silkworm pupae. The three inocu1ation methods revealed 100% infectivity to the silkworm pupae tested. Of the three inoculation methods, the injection method was highly effective in the reduction of the period required for the endosclerotium and the completion of fruiting body formation. These results indicate that the silkworm pupae are very effective host insects for the production of C. militaris.
The Herpes simplex virus type 1 (HSV-1) glycoprotein B (gB) gene in the pHLA-21 plasmid was inserted into a baculovirus (Hyphantria cunea nuclear polyhedrosis virus) expression vector (lacZ-HcNPV) to construct a recombinant virus gB-HcNPV expressing gB. Spodoptera frugiperda cells infected with this recombinant virus synthesized and processed gB of approximately 120 kDa, which cross-reacted with the monoclonal antibody to gB. The recombinant gB was identified on the membrane of the insect cells using an immunofluorescence assay. Antibodies to this recombinant raised in mice recognize the viral gB and neutralized the infectivity of the HSV-1 in vitro. These results show that the gB gene has the potential to be expressed in insect cells. They also demonstrate that it is possible to produce a mature protein by gene transfer in eukaryotic cells, and indicate the utility of the lacZ-HcNPV-insect cell system for producing and characterizing eukaryotic proteins. Furthermore, the neutralizing antibodies would appear to protect mice against HSV. Accordingly, this particular recombinant protein may be useful in the development of a subunit vaccine.
A method for the rapid detection and quantification of Newcastle disease virus (NDV) produced in an animal cell culture-based production system was developed to enhance the speed of the NDV vaccine manufacturing process. A SYBR Green I-based real-time RT-PCR was designed with a conventional, inexpensive RT-PCR kit targeting the F gene of the NDV LaSota strain. The method developed in this study was validated for specificity, accuracy, precision, linearity, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), and robustness. The validation results satisfied the predetermined acceptance criteria. The validated method was used to quantify virus samples produced in an animal cell culture-based production system. The method was able to quantify the NDV samples from mid- or late-production phases, but not effective on samples from the early-production phase. For comparison with other quantifiable methods, immunoblotting, plaque assay, and tissue culture infectious dose 50 ($TCID_{50}$) assay were also performed with the NDV samples. The results demonstrated that the real-time RT-PCR method is suitable for the rapid quantification of virus particles produced in an animal cell-culture-based production system irrespective of viral infectivity.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.11
no.2
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pp.81-86
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2005
The mode of transmission, effect on fecundity, hatching and tissues specificity of a microsporidian $(Lb_{ms})$ recovered from Lamerin breed of the silkworm Bombyx mori L. was studied and compared with standard strain Nosema bombycis. Peroral inoculation of $Lb_{ms}$ or N. bombycis to zeroday of $4^{th}$ instar larvae of silkworm was the most suitable method for producing information on development of stage specific mortality, pupation and obtaining infected adults for transovarial transmission studies. It was observed that pupal mortality, the percentage of moths emerged and the percentage of moths infected were significantly high in N. bombycis infected batches as compared $(Lb_{ms})$ in all the three tested breeds of the silkworm. However no significant difference was observed in larval mortality. The fecundity and hatchability was not affected significantly in $(Lb_{ms})$ infected adults, however significant reduction in egg production, fecundity, hatchability and increased egg retention was observed in mother moths infected with N. bombycis. The $(Lb_{ms})$ is transmitted both horizontally and vertically at lower rate due to its low rate of proliferation. The trans ovarial transmission of $(Lb_{ms})$ to the $F_1$ progeny generation through eggs averaged only $61.33\pm5.10\%$ whereas N. bombycis was transmitted at $100\%$. The $(Lb_{ms})$ had low oral infectivity and low transovarial transmission in silkworm B. mori.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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