Gonadosomatic index (GSI) of the crucian carp (Carassius auratus) was investigated to clarify annual reproductive cycle from February in 1992 to October in 1994. The values of GSI were high with individual variation from April to July which period was coincided with the breeding season of fish. The GSI was very low in August and September, when follicular atresia developed in the ovaries. GSI value began to increase in October and reached a peak around the following March, which indicated that ovarian follicles may grow during this period. Human chorionic gonadotropin (HCG 10 IU), $17\alpha$, 20\beta-dihydroxyprogesterone\;(1-100{\mu}g/ml)$ and phorbol 12-myristate-13-acetate (TPA, protein kinase C activator, 0.1-10${\mu}M$) induced germinal vesicle breakdown (GVBD), but $4\alpha-phorbol$ 12, 13- didicanoate ($4\alpha-PDD,\;phorbol\; ester\;analogue,\;25{\mu}M$) did not induce germinal vesicle breakdown in the follicular oocytes. Prostaglandin $F_{2\alpha}$$(0.1-10 {\mu}g/ml)$ and TPA $(0.1-10 {\mu}M$ induced ovulation of the oocytes, but $4\alpha-PDD$$(25{\mu}M)$ did not induce ovulation of the follicles. $17\alpha-hydroxyprogesterone$ production was examined from the isolated follicles to investigate the steroid production ability in the crucian carp ovaries. HCG (1 lU, 10 lU) and forskolin (adenylate cyclase activator, 0.1-10 ${\mu}M$) stimulated $17\alpha-hydroxyprogesterone$ production. The time course of HCG (10 lU) and forskolin $(10\;{\mu}M)$ stimulated $17\alpha-hydroxyprogesterone$ production within 3 hours, the elevated levels were maintained during the rest of the culture period. The data indicates that cyclic AMP and protein kinase C may play important roles in the oocyte maturation and ovulation in crucian carp.
The objective of this study was to investigate the effects of abnormal ovarian cycles after superovulation treatment of Holstein Donor Cows. CIDRs were inserted into the vaginas of twenty two head of Holstein cows, regardless of estrous cycle. Superovulation was induced using folliclar stimulating hormone (FSH). For artificial insemination, donor cows were injected with $PGF_2{\alpha}$ and estrus was checked about 48 hours after the injection. Then they were treated with 4 straws of semen 3 times, with 12-hour intervals. Embryos were collected by a non-surgical method 7 days after the first artificial insemination. The cows were considered to have resumed ovarian cyclicity on the day of ovulation if followed by regular ovarian cycles. Seventy two point seven percentage of the cows(16/22) had normal resumption of ovarian cyclicity(resumption within 40 days after superovulation), and 27.3%(6/22) had delayed resumption(resumption did not occur until>40 days after superovulation). Delayed resumption Type II(first ovulation did not occur until ${\geq}40$ days after superovulation, i.e. delayed first ovulation 13.6%) were the most common types of delayed resumptions. The mean numbers of total ova from < 10 and $10{\leq}$ of corpora lutea(CL) was $7.8{\pm}1.8$ and $12.7{\pm}2.7$, respectively. The number of transferable embryos differed between < 10 and $10{\leq}$ CL was $5.4{\pm}1.3$ and $8.1{\pm}3.4$, respectively. Four point five percentage of the cows(1/22) did not resumption their ovarian cyclicity until 60 days after superovulation treatment. Diverse researches on the superovulation treatment method that is suitable for high-producing Holstein donor cows would contribute to preventing ovarian cyclicity disorder, as well as to the early multiplication of cows with superior genes by increasing the utilization value of donor cows.
This study investigated the correlationship between artificial maturation season and reproduction coefficient of cultured eel Anguilla japonica from May (spring) to next January (winter). The brood stock, female eels ($400{\sim}600\;g$) were artificially matured by weekly intramuscular injections of salmon pituitary extracts (SPE, 20 mg/fish) to induce a completion of vitellogenesis. After completion of vitellogenesis, final oocyte maturation and ovulation was induced by injection of $17{\alpha}$, $20{\beta}-dihydroxyprogesterone$ (DHP) at about $2\;{\mu}g/g$ body weight. Most fish ovulated $15{\sim}18\;h$ following the DHP injection. The ovulated fish were induced to natural spawning or artificial fertilization by the dry method. Males ($200{\sim}350\;g$) were received weekly intramuscular injections of human chorionic gonadotropin (HCG) at a dosage of 1 IU/g body weight to induce testicular maturation and spermiation. Seasonal reproduction coefficient which includes the rate of ovulation, buoyancy, fertilization and hatching of eggs in the artificially matured eel during spring to summer ($May{\sim}July$) were significantly higher than the other season, while there were no significant difference among spring and summer (P<0.05). Furthermore, the number of eggs spawned and larvae hatched in the artificially maturated eel during spring to summer ($May{\sim}July$) were significantly higher than the other season, while there were no significant difference in spring and summer (P<0.05). These results indicate that artificial maturation by hormone treatment of A. japonica was successful only during spring to summer, which is the maturation period in the wild stock in nature. Consequently, it is possible to determine the period of artificially induced sexual maturity by the reproduction coefficient which includes the rate of ovulation, buoyancy, fertilization and hatching of eggs in the cultured eel A. japonica.
The relative effectiveness of C21-steroids and human chorionic gonadotropin(HCG) on maturation and ovulatin was investigated in vitro using the isolated oocytes or ovarian fragments from the sea bass, Lateolabrax japonicus. ${\alpha}$-hydroxy, 20${\beta}$-dihydroprogesterone(17${\alpha}$20${\beta}$OHP : 5, 50, 500, 1000ng/ml), 17${\alpha}$-hydroxy, 20${\alpha}$-dihydroprogesterone(17${\alpha}$20${\alpha}$OHP : 5, 50, 500, 1000ng/ml) and HCG (5, 50, 500IU/ml) were effective in inducing oocyte maturation, GVM (germinal vesicle migration) or GVBD(germinal vesicle breakdown), compared to control except 17${\alpha}$20${\beta}$OHP and 17${\alpha}$20${\alpha}$OHP at 5ng/ml. 17${\alpha}$20${\beta}$OHP showed the greatest effect on oocyte maturation at 50ng/ml. A combination of 17${\alpha}$20${\beta}$OHP(50ng/ml) and HCG(500IU/ml) led to a significant increase (p<0.05) in GVBD when compared with 17${\alpha}$20${\beta}$OHP or HCG alone. These findings suggest that the two in combination acts synergistically to induce GVBD. 17${\alpha}$20${\beta}$OHP (1~1000ng/ml) and HCG(1~500IU/ml) also induced ovulation in ovarian fragments at all concentrations used ; more effective at lower concentrations(1~50ng/ml or IU/ml). It was shown that HCG was more potent in inducting ovulatin than 17${\alpha}$20${\beta}$OHP.
Estrus was induced in 13 anestrus Korea Jin-do bitches by intramuscular injection of pregnant mare serum gonadotropin (PMSG) in a dose of 500 lU once daily for ten consecutive days, followed by an additional single intraveneous injection of 1,000 lU of human chorionic gonadotropin (hCG) on the tenth day. Day-changes of vaginal epithelial cells during the hormone treatment were investigated in each experimental bitches and compared with the those of spontaneous estrus bitches. The first days of vulval bleeding and male acceptance after PMSG treatment were on Day 6.0$\pm$ 1.5 (mean$\pm$ SD) and Day 9.0$\pm$ 1.9, respectively. And in all of 13 bitches, vulval swelling and perineal reflex were shown. The mean durations of proestrus and estrus were 2.9$\pm$ 1.4 (mean$\pm$ SD, range ; 1-6) and 11.5: 1.7 (range ; 8-14) days, respectively, that is, duration of proestrus was significantly shorter than that of the spontneous estrous bitches but duration of estrus was longer than that of the spontaneous estrous bitches. Characteristic features of vaginal cytology during the estrous cycle were the high proportions of large intermediate cell, superficial cell, anuclear cell and erythrocyte in proestrus, superficial cell and anuclear cell in estrus and parabasal cell, small intermediate, large intermediate cell, and leukocyte in diestrus, respectively. The comification index (Cl) was significantly high proportion in proestrus and estrus, when Day 0 was timed from the first day of male acceptance, the Cl was first increased above 80% on Day 0 and maintained above 80% until Day 0 to Day 5 during 6 days and showed a peak on Day 2. Also it was maintained above 90% until Day 2 to Day 3 during 2 days. These results indicated that all 13 ekperimental bitches showed positive estrus detection by the estrus behavior and vaginal smear test after treated with PMSG and hCC. It suggested that vaginal cytology was used to estimate the optimal mating and ovulation time, in consideration of the day when the Cl was maintained above 80% in estrus-induced Korea Jin-do bitches.
Prolactin (PRL) surge in cycling rats at proestrous afternoon has previously been reported as an inducer of apoptotic cell death of luteal cells. This death-inducing action of PRL seeins unusual, because PRL can he categorized as a cell-survival factor, if other known physiological functions of PRL are taken into account. In this study, the apoptotic action of PRL was assessed in cultured cells prepared from rat luteal tissue and underlying molecular /cellular mechanism of PRL-induced luteolysis was analyzed. The latest crop of corpora lutea (CLs) were enucleated from rat ovaries at 18:00 h on the proestrous day before the next ovulation. Donor rats were pretreated with CB154, a dopamine agonist, in order to he exempted from the endogenous PRL surge. The harvested GLs were dispersed and cultured with or without PRL (2$\mu$g /ml) for 24 or 48 h. An addition of PRL to the culture medium changed the parameters indicative of cell death via apoptosis: a decrease in cell viability (MTT) and an increase in chromatin condensation. Most of the DNA breakdown in nuclei induced by PRL occurred in steroidogenic cells which were identified by 3$\beta$-HSD activity staining, and the number of 3$\beta$-HSD-positivecells were significantly decreased. Interestingly, most of the cells with an apoptotic nucleus adhered to one or more intact and seemingly non-steroidogenic cells. Because the expression of Fas has heen shown to be abundant in murine ovary, and Fas is known to have an exact physiological role in occurrence of apoptotic cell death, the membrane form-Fas ligand (rnFasL) was quantified in the cell lysate. An addition of PRL increased expression of mFasL. Moreover, an addition of concanavalin A (ConA), a T-cell specific activator, in place of PRL, enhanced the apoptotic parameters. Cumulatively, the apoptotic PRL action was addressed to cells unknown than steroidogenic lute~ cells. The most prohable candidate for the direct target cells is Tcells in the luteal tissue that can express mFasL in response to PRL.
Purpose: This study was designed to investigate the effects of Gaeullijin-Tang(GIT) on the progression of the estradiol valerate(EV)-induced polycystic ovaries(PCO) in rats. Methods: PCO was induced by single intramuscular injection with estradiol valerate(EV)(4mg) in female rats. Normal group(n=8) were injected with sesame oil and orally administrated distilled water for sixty days. PCO control group (n=8) were injected with EV and orally administrated distilled water for sixty days. GIT treated group(n=8) were injected with EV and orally administrated GIT for same duration. At the end day of experiment, we measured weights of body, ovaries, adrenal glands, uterus and contents of serum androsternedione (ADD) and total estrogen. The histomorphometrical changes of ovaries were also evaluated. And we observed the NGF and CRF expression by immunohistochemistry. Results: The results were as follows - The weights(mg) of ovaries in GIT treated group($75.5{\pm}4.3$) were significantly increased(p<0.001) compared with PCO control group($54.3{\pm}4.5$). - The numbers of mature follicles in GIT treated group($5.3{\pm}1.2$) were significantly increased(p<0.05) compared with PCO control group($3.5{\pm}1.2$). - The numbers of corpora lutea in GIT treated group($1.8{\pm}1.3$) were significantly increased(p<0.05) compared with PCO control group($0.3{\pm}0.7$). Conclusion: From the above results, we concluded that Gaeullijin-Tang(GIT) contributes to stimulating normally ovulation by decreasesing ovarian NGF concentrations.
Shark populations are constantly decreasing owing to environmental destruction and overfishing; thus, sharks are now at risk of extinction, with 30.5% of species classified as endangered on the International Union for Conservation of Nature's Red List. Sharks are apex predators and keystone species in balancing the marine food chain; their extinction would create an imbalance in the entire marine ecosystem. Assisted reproductive technology is a last resort for protecting animals facing extinction. Here, as a proactive effort toward building a hormone-induced artificial insemination protocol for endangered wild sharks, we identified the possibility of germ cell maturation by administration of GnRH, a commercially produced synthetic salmon gonadotropin-releasing hormone, and calculated its optimum dosage and injection timing. The experiment was conducted on one shark species, Chiloscyllium plagiosum. Injections were administered in 24 h intervals to C. plagiosum females, and 0.2 mL/kg+0.2 mL/kg were the optimal doses. These doses effectively induced maturation and, and ovulation, and oocyte release. Our results confirm that GnRH is a suitable tool for shark hormone-induced artificial insemination and indicate that this method may facilitate the conservation of endangered shark species.
This study was conducted to determine the effects of progestagen (Synchromate-B, Veramix, CIDR) and hormone (PMSG, FSH, hCG) treatments on superovulation and estrous synchronization in Korean native goats. Goats were initially superovulated by using progestagens (Synchromate-B, Veramix, CIDR) and hormones (FSH, PMSG, hCG). The progestagens were removed after 15 days of insertion and 0.88 mg of FSH was injected intramuscularly twice a day from day 12 to day 15. In addition, 150 IU of PMSG and 200 IU hCG were injected intramuscularly in the morning of day 12 and in the afternoon of day 15, respectively. Estrous synchronization was induced by the progestagen releasing devices for 13 days and intramuscular injection of 400 IU PMSG in the morning of day 11. The results were summarized as follows: 1. The responses of superovulation treated with three types (Synchromate-B, Veramix, CIDR) of progestagen were 98.6, 99.4 and 98.8%, respectively. The average ovulation rates with Synchromate-B, Veramix and CIDR were 12.58 $\pm$ 6.52, 12.91 $\pm$ 7.27 and 11.28 $\pm$ 6.33, respectively. The average ovulation rates of Synchromate-B and Veramix treatments were significantly higher than that of the CIDR treatment (P<0.05). 2. The responses of estrus synchronization treated with Synchromate-B, Veramix and CIDR were 52.9, 72.9 and 75.7%, respectively. Veramix and CIDR treatments on estrous synchronization were significantly higher than the Synchromate-B treatment (P<0.05). Among the estrous synchronized goats, the estrous ovulation rates with Synchromate-B, Veramix and CIDR were 2.11 $\pm$ 1.89, 1.35 $\pm$ 0.87 and 1.43 $\pm$ 0.96, respectively. The estrous ovulation rates of the Synchromate-B treatment were significantly higher than those of the other treatments (P<0.05). 3. The average superovulation rates were 11.76 $\pm$ 6.00 and 11.07 $\pm$ 6.46 for the PMSG treatment and control groups, showing that there was no PMSG effects for the superovulation treated with CIDR.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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