• 한국안광학회지
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• 제12권2호
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• pp.79-86
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• 2007

본 연구는 mycoplasma가 오염된 배양 각막 상피세포에 anti-FAS and anti-FAS ligand antibody를 노출시킨 후 세포고사 메커니즘을 조사하기 위해 시행하였다. 배양각막 상피세포에 anti-FAS antibody 와 anti-FAS ligand antibody를 2일과 4일 동안 처리하여 주어진 기간 동안 배양하였다. 배양 중인 각막상피세포가 mycoplasma sp.에 의해 오염된 것이 밝혀졌다. mycoplasma removal agent(MRA)가 세포주로부터 세균을 제거하기 위해 이용되었다. MRA를 세포주에 첨가하여 1주일 동안 배양하였다. 그 후 각막상피 세포주는 MRA가 포함되지 않는 배양액에서 수세대 동안 배양되어 커버글라스에 계대배양하여 50-80% 채워졌을 때 MRA 제거여부를 확인하기 위한 검사 키트에 제공된 Hoechst staining을 이용하여 염색하였다. 세포고사 실험은 MRA 제거 전과 제거 후에 시행되었다. mycoplasma가 오염된 배양 각막상피세포에 대한 anti-FAS and anti-FAS ligand antibody의 영향을 알아보기 위해 Hoechst 33342 staining과 Annexin V-FITC and Propidium Iodide Staining을 이용하여 세포고사 유도를 확인하였다. 본 연구는 anti-FAS antibody가 배양각막 상피세포에서 시간과 농도에 비례하는 메커니즘으로 세포고사를 유도한다. mycoplasma가 오염된 세포주는 FAS 유도 세포고사의 민감성을 증가시키는 것으로 나타났다.

• 한국산림과학회지
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• 제99권1호
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• pp.125-130
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• 2010

식물대량증식에서 생물반응기의 이용은 규모를 대량화하고 자동화 할수 있다는 점에서 생산비를 절감할 수 있는 방법 중 하나이다. 본 연구에서는 유칼리 펠리타 선발목의 대량증식 체계를 확립하기 위해 4가지의 생물반응기 배양시스템에서 유칼리의 생장을 비교하였다. 배양기내에 지지물(net)을 설치하고 매 4시간마다 30분씩 액체배지를 공급한 TIN 배양(Temporary immersion with net)에서 식물체 생장이 가장 좋았다. TIN 시스템하에서 자란 식물체는 동일한 방식에 net가 없는 TIX 배양(Temporary immersion without net)에서 자란 식물체와 비교하여 초장이 3배 이상 증가하였다. 게다가 TIN 시스템에서 생산 된 식물체는 총 엽록소 함량, 엽록소 a/b, 그리고 건물중 등도 증가하였다. 위와 같은 결과는 기내 유칼리나무 생장에 중요한 요인이 식물체가 적당한 간격으로, 그리고 적당한 시간동안 배지에 노출되어야하고, net의 이용이 필수적임을 보여준다. TIN 시스템은 유칼리 클론묘의 대량생산을 위해 최적의 시스템으로 산업화를 위한 유칼리나무 대량생산시 유용하게 이용될 수 있을 것으로 생각된다.

• 한국자원식물학회지
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• 제36권5호
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• pp.527-539
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• 2023

고추(Capsicum annuum L.)는 전 세계적으로 재배되고 있는 채소이자 향신료 작물이다. 고추 열매는 독특한 맛과 향을 지니면서 인체 건강에 중요한 항산화제와 다양한 화합물을 제공하기에 경제적 가치가 높다. 또한 소비자의 기호에 따른 새로운 고추 품종에 대한 수요도 높다. 하지만 고추는 조직 및 기관 분화와 식물 재분화가 어려운 식물이기에 유전자재조합 및 유전자 교정과 같은 새로 개발된 기술을 사용하여 요구되는 품종 개발이 어려운 상황이다. 본 연구에서는 서울대학교 Core collection에서 분양 받은 7계통의 고추를 이용하여 조직 배양 및 재분화 조건을 조사하였다. 여기에는 서로 다른 사이토키닌과 옥신 농도로 구성된 여러 가지 배지 조성을 사용하여 캘러스와 부정아 유도, 그리고 신초 형성을 관찰하였다. 그 결과, 호르몬 조성에 따라 캘러스 유도 및 신초 형성에서 품종별 차이가 있는 것으로 확인하였으며, zeatin riboside를 함유한 배지와 유묘의 잎자루 부분을 사용한 경우 재분화율이 가장 높게 나타났다. 특히 사용된 7 계통의 고추 중에서 CMV980 계통이 다른 품종에 비해 월등히 높은 재분화 효율(약48%)을 나타냈고, Yuwolcho 계통이 그 뒤를 이었다. 따라서 본 연구는 CMV980 및 Yuwolcho 계통을 고추 형질전환에 활용될 수 있는 우수한 품종 후보로 제공하며, 이는 향후 유전자교정기술 등을 이용한 다양한 품종 개발에 기여할 수 있을 것이다.

• 대한수의학회지
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• 제26권2호
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• pp.283-292
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• 1986

Isolation and identification of Mycoplasma were performed to clarify Mycoplasma infection of mice fed by conventional feeding at two ($K_1$, $K_2$) institutes in Korea. The twenty mice to be tested were randomly sampled from each of 10 breeding colonies in respective institute. Identification of the Mycoplasma strains isolated from the nasal cavity, lung and synovia of mice was made according to the morphology of colonies, biological and biochemical properties with special reference to M. pulmonis, M. arthrotodis and M. neurolyticum. In addition, growth inhibition test was performed using hyperimmune rabbit antisera to the strain PG-22 of M. pulmonis, the strain PG-6 of M, arthritidis and the strain PG-28 of M. neurolyticum and also differentiation of isolates from L-form bacteria was dont by Dieses staining and culture method with passage of the isolates on liquid media eliminated antibacterial drug. On the other hand, a total of 13 strains out of the 44 isolated M. pulmonis from mice was investigated for their susceptibility against 16 antibiotics in vitro. The antibiotic sensitivity test was made using $3{\times}10^4$ organisms/0.3ml on each plate(90mm diameter) with antibiotic mono-or tri-disk. The results obtained are summarized as follows: 1. Out of 20 mice from 10 breeding colonies in Kl institute, mycoplasma-like strains from the nasal cavity of 16 mice(80%) and from the lung of 8 mice(40%) were isolated, while out of 20 mice in K2 institute, M-like strains were isolated from the nasal cavity of 14 mice(70%) and from the lung of 6 mice(30%). However, no mycoplasma-like organisms were isolated from the synovia of the 40 mice examined. All the 44 strains isolated were identified as the organisms of M. pulmonis. 2. Out of the 16 antibiotics tested, penicillin, oleandomycin and bacitracin showed no activity against all the 13 M. pulmonis strains. On the contrary, lincomycin, clindamycin, chloramphenicol, tetracycline, minocycline, kanamycin, gentamycin and tobramycin showed high activity with three different antibiotic concentration of tridisk, but amikasin and spiramycin showed intermediate activity. Other antibiotics such as polymyxin B and colistin showed low activity, while erythromycin showed lower activity than others.

• 식물병연구
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• 제15권2호
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• pp.130-133
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• 2009

Nano-silver 용액의 식물병원성 세균에 대한 항균 활성 검정을 하기 위해 Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis를 포함한 10가지 균주를 대상으로 실험을 수행 하였다. Nano-silver용액은 바이오 (주)플러스에서 제공된 WA-CV-WA13B, WA-AT-WB13R과 WA-PR-WB13R용액을 사용하였으며, 10 ppm, 25 ppm, 50 ppm, 100 ppm 농도로 nano-silver 용액을 배지에 첨가하여 nano-silver 배지를 제조한 후 실험대상 세균 균주를 72 h 배양 후 생장억제 정도를 관찰하기 위하여 세균의 colony 수를 세었다. 실험 결과, WA-CV-WA13B 용액의 경우 C-1에 대하여 10 ppm에서도 높은 생장 억제 효과를 나타냈고, P-6, X-1, 그리고 X-2에 대해서도 생장억제 효과를 나타냈고, WA-AT-WB13R용액의 경우 10 ppm의 농도에서 P-6에 대하여 살균효과가 나타났다. 10 ppm의 농도에서는 C-1, X-1, 그리고 X-2에 대해서 약간의 생장억제 효과가 관찰 되었다. WA-PR-WB13R용액의 경우 10 ppm 혹은 그이상의 농도가 P-5, P-6, 그리고 X-2 균주에 대하여 살균효과를 나타내었다. 실험에 사용된 3가지 nano-silver 용액 모두 25 ppm 이상에서 모든 실험대상 식물병원성 세균에 대하여 살균효과를 나타내었으며, 이러한 결과는 nano-silver 용액을 식물병원성 세균의 방제제로 활용할 수 있는 가능성을 보여주는 결과라고 판된다.

• 한국작물학회지
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• 제62권3호
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• pp.259-274
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• 2017

Platycodon grandiflorum (Bell flower) is an important plant that has traditionally been used as herbal medicine for the treatment of cough, phlegm, sore throats, lung abscesses, chest pains, dysuria, and dysentery. The present study was initiated to investigate the feasibility of inducing shoot and root organogenesis in cultured explants of P. grandiflorum in a range of culture media and through use of various plant growth regulators (PGRs). The plantlets (Stem containing one node) were isolated and cultured on different concentrations of Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with PGRs. We found that proliferation and elongation of shoots and roots could be achieved on 1/4 MS for P. grandiflorum with wild and green petals and on 1/8 MS for P. grandiflorum with double petals. The highest levels of development and elongation of adventitious shoots and roots were observed when petal explants were cultured on 1/4 MS (pH 3.8) supplemented with 5% sucrose. Increasing the agar concentration reduced shoot growth and rooting potential; nevertheless, the highest number of shoots and roots was observed on 0.6% agar. In the case of growth regulators, 1/4 MS supplemented with $1mg\;L^{-1}$ 6-benzylaminopurine (BA) was found to be best for shooting, although higher concentrations of BA tended to reduce shoot and root elongation. The highest number of shoots was achieved on $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ thidiazuron (TDZ) from double petal explants grown on 1/8 MS. However, root and shoot elongation were found to decrease when TDZ concentrations were increased. Low concentrations of kinetin, naphthalene acetic acid, indole acetic acid, and 3-indole butyric acid induced shoot and root proliferation and elongation. Taken together, our study showed that low concentrations of PGRs induced the greatest root formation and elongation, showing that the optimal concentration of PGRs for shoot proliferation was species-dependent.

• 농업생명과학연구
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• 제46권5호
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• pp.47-55
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• 2012

본 연구는 가축 체지방 감소를 위한 수동면역학적 기법의 기초자료 확보를 위해 흰쥐 지방부위별(복강 및 피하지방) 특이 다클론 항체를 개발하고자 실시되었다. 흰쥐 부위별 지방 조직에서 지방세포를 분리하고 각각 primary 배양시킨 후 개발된 복강지방(AAb) 및 피하지방 특이 다클론 항체(SAb)를 주입한 뒤 media 내 lactate dehydrogenase(LDH) 방출 수준을 조사하였다. 희석배율 1:1,000배를 기준으로 비면역 혈청은 항원-항체 결합 반응이 거의 측정되지 않았고, AAb 및 SAb는 희석배율 1:128,000배까지 각각 항원-항체 반응이 감지되었다. 부위별 지방과 비교했을 때, AAb 및 SAb는 흰쥐 타 장기들과는 특이한 반응을 나타내지 않았다(p<0.001). 본 연구에서 개발한 두 항체들은 모두 항원으로 이용된 부위의 지방세포 PMP와 가장 높은 반응을 나타내었으며, 지방세포 배양을 통한 LDH 수준 검사에서는 AAb 및 SAb 모두 비면역혈청에 비해 유의적으로 높은 세포파괴가 일어났음을 확인할 수 있었다(p<0.01). 이상의 결과를 종합할 때 본 연구에서 개발된 AAb 및 SAb는 높은 역가, 타장기 안전성 및 in vitro 지방 감소 효과가 있었다고 생각된다.

• 대한의용생체공학회:의공학회지
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• 제16권3호
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• pp.331-336
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• 1995

체내 매입후 경시적으로 분해되면서 재생골조직에 의해 치환되는 인공골복합체를 제조하고 복합체가 세포활성에 미치는 영향을 조사하였다. 복합체시편을 세포배양액에 넣고 1주일동안 $37^{\circ}C$에서 배양한 다음, 사람자궁경부암유래 HeLa S3세포와 쥐피하 L929세포를 복합체가 용해된 세포배양액에서 5일간 배양하여 세포성장율을 비교하여 세포특성을 조사하였다. 한편 HeLa S3세포를 배양중인 배양액에 ${Na_2}^{51}CrO_4$를 첨가하여 HeLa S3세포에 $^{51}Cr$를 표식한 다음, 용해된 $^{51}Cr$의 양을 $\gamma$-counter를 이용하여 측정하였다. 세포성장정도의 측정에서는 HeLa S3 세포 및 L929 세포 모두가 특이한 세포독성을 발견할 수 없었으며, 복합체가 용해된 세포배양액내의 표식된 HeLa S3 세포로 부터 용해된 $^{51}Cr$량을 측정한 결과, 세포활성을 저해하지 않은 것으로 관찰되었다.

• 대한한방내과학회지
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• 제23권1호
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• pp.99-106
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• 2002

Background : Nowadays a lot of research is based on natural substances or materials world wide since many kinds of side effects are accompanied by anti tumor chemotherapy. In Chinese medicine, Dioscorea bulbifera L is widely used to treat many kinds of cancer, but in Korea it is rarely used. Therefore, we need to scientifically identify anti tumor effects of Dioscorea bulbifera L. Objective : We aimed to identify anti tumor effects of Dioscorea bulbifera L on the stomach cancer cells through molecular biological methods. Materials & Methods : We used AGS, a stomach cancer cell from American Type Culture Collection. We injected the boiled extract of Dioscorea bulbifera L 5 ul(sample 1), 10ul(sample 2) to cultured media(ml) for 0,6,12,18,24 hours. We measured the killing effect on stomach cancer cells through Tryphan blue exclusion test and suppressive effect on viability of stomach cancer cells via MTT assay. Results : Tryphan blue exclusion test showed that each test group killed more stomach cancer cells than the controlled group with a dosage-dependent, but not significantly. MTT assay showed that each test group had a more suppressive effect on viability of stomach cancer cells than the controlled group without a dosage-independent, but not significantly. The cell cycle analysis via flow cytometry showed that the test group extended cell cycle, and there was no peak in M phase, the number of sub G1, G0, G1 phase cells increased a little, but not significantly. Conclusion : This experiment showed that Dioscorea bulbifera L. has an anti-tumor effect, but not significantly. This is in vitro experiment and basic experiment on Dioscorea bulbifera L. We hope more progressive researches on Dioscorea bulbifera L. will be conducted and its anti tumor will be more accurately identified.

• 대한한방내과학회지
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• 제24권2호
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• pp.290-299
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• 2003

Background : Nowadays many researches about it s cure are going on world widely since cancer is one of the most human health threatening diseases. In Chinese and North Korean medicine, Duchesnea india(Audra.) Foche. is practically used to treat many kinds of cancer, but in Korea it is rarely used. So, we need to scientifically identify anti-tumor effects of Duchesnea india(Audra.) Foche. Objective : We are aimed to identify anti-tumor effects of Duchesnea india(Audra.) Foche. on the stomach cancer cells through molecular biologic methods. Material & Methods : We used AGS as stomach cancer cells from American Type Culture Collection. We added the boiled extract of Duchesnea india(Audra.) Foche. $5{\mu}l$(Sample I), $10{\mu}l$(Sample II) to cultural media(ml)for 0,6, 12, 24, 48 hours. We measured the killing effect on stomach cancer cells through Tryphan blue exclusion test and the suppressive effect on viability of stomach cancer cells via MTT assay. the quantitative RT-PCR was used to examine their effect on the revelation of Bcl-2, Bcl-XL, and Bax, which are genes related to apoptosis. We measured change of mitochondria membrane permeability and membrane potential via flow cytometry. Result : 1. The killing effect on stomach cancer cells showed that each test groups killed more stomach cancer cells than the control group with a time(6 hours later) and density dependent manner, which was statistical significance. 2. The suppressive effect on viability of stomach cancer cells showed that each test groups had more suppressive effects on viability of stomach cancer cells than the control group with a time(6 hours later), which was statistical significance. 3. In the test about the revelation of genes related to apoptosis, the revelation of Bcl-2 and Bcl-XL decreased with a density manner which was statistical significance. but the revelation of Bax was not changed with statistical significance. 4. As a result of this test, Duchesnea india(Audra.) Foche. caused apoptosis by decreasing the absorbance of mitochondria with statistical significance. and also induced apoptosis by decreasing the membrane potential of mitochondria. Conclusion : This experiment showed that Duchesnea india(Audra.) Foche. has anti-tumor effect with statistical significance. This is in vitro experiment and basic experiment on Duchesnea india(Audra.) Foche. We hope more progressive researchs on Duchesnea india(Audra.) Foche. will go on and its anti-tumor effects will be more practically identified.