Kim, Young-Ha;Lee, Sang-Hoon;Yoo, Yung-Choon;Lee, Jung-Lim;Park, Jong-Hwan;Park, Seok-Rae
IMMUNE NETWORK
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v.12
no.3
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pp.89-95
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2012
Immune cells express toll-like receptors (TLRs) and respond to molecular patterns of various pathogens. CpG motif in bacterial DNA activates innate and acquired immune systems through binding to TLR9 of immune cells. Several studies reported that CpG can directly regulate B cell activation, differentiation, and Ig production. However, the role of CpG in B cell growth and Ig production is not fully understood. In this study, we analyzed the effect of CpG on the kinetics of mouse B cell viability, proliferation, and Igs production. Overall, CpG enhanced mouse B cell growth and production of Igs in a dose-dependent manner. Unlike LPS, 100 nM CpG (high dose) did not support TGF-${\beta}1$-induced IgA and IgG2b production. Moreover, 100 nM CpG treatment abrogated either LPS-induced IgM or LPS/TGF-${\beta}1$-induced IgA and IgG2b production, although B cell growth was enhanced by CpG under the same culture conditions. We subsequently found that 10 nM CpG (low dose) is sufficient for B cell growth. Again, 10 nM CpG did not support TGF-${\beta}1$-induced IgA production but, interestingly enough, supported RA-induced IgA production. Further, 10 nM CpG, unlike 100 nM, neither abrogated the LPS/TGF-${\beta}1$- nor the LPS/RA-induced IgA production. Taken together, these results suggest that dose of CpG is critical in B cell growth and Igs production and the optimal dose of CpG cooperates with LPS in B cell activation and differentiation toward Igs production.
Serum immunoglobulins (Igs) from Israeli carp were purified using affinity chromatography. Fish were immunized with purified mouse IgG, and the specific fish antibodies were purified from the immune serum on a mouse IgG-immobilized agarose gel. Rabbit anti-Israeli carp Igs (R $\alpha$ I. carp Igs) antibodies were produced following hyperimmunization with mouse IgG specific carp antibodies. SDS-PAGE analysis under reducing condition showed that Israeli carp Igs were composed of two $\mu$-like heavy chains with about 82 and 50 kd, respectively, and one light chain with about 25 kd. On immunoblotting analysis, however, R $\alpha$ I. carp Igs failed to react with the light chain. When both protein A and protein G-purified normal carp Ig were compared with mouse IgG-specific Israeli carp Ig, no significant structural differences among them were observed. To investigate if there is any homology between other fish Ig molecules, cross-reactivity of R $\alpha$ I. carp Igs against Ig molecules from 6 different fish sera and mouse control serum was checked on immunoblotting analysis. As a result, R $\alpha$ I. carp Igs responded to Israeli carp, common carp, and tilapia Ig molecules. In flow cytometry study, however, R $\alpha$ I. carp Igs appeared to recognize 42.0%, 35.8% and <5% of Israeli carp, common carp and tilapia $Ig^+$ head kidney cells, respectively. The result suggests the heterogeneity between receptor Igs on B-like lymphocytes and soluble Igs in serum. It is crucial to obtain pure fish Igs to produce reagent antibodies as tools for the study on their specific immune responses.
Background : Congenital rubella syndrome (CRS) can be controlled by vaccination. Because rubella is typically a childhood disease, occurring predominantly in the 5 to 14 year age group, female school teachers nay be a high-risk population for CRS. Objectives : To determine the prevalence rate of rubella antibodies in school teachers of child bearing age. Methods : The study population consisted of primary, middle and high school teachers of child bearing age. The subjects were aged 35 years and younger, and consented to immunoglobulin (Ig) level testing using the ELISA method. Results : The positive rate of IgG was 77.9% in the study subjects (n=314). Sixty-three teachers (21.4%) were susceptible to rubella infection. Thirty-seven teachers (11.8%) had a history of rubella vaccination. Among the female teachers with no vaccination history, the proportion of negative IgM and IgG was 21.7%, and the proportion of positive IgM was 2.9%. Seventy-nine percent of the study subjects did not know that they should not become pregnant for three months after receiving the rubella vaccine. Conclusion : School teachers of child bearing age should be considered a high risk group for CRS, and should be vaccinated if they are found to be seronegative.
Small interfering synthetic double-stranded RNA (siRNA) was applied to suppress the expression of the human cytotoxic-T-Iymphocyte antigen 4-immunoglobulin (hCTLA4Ig) gene transformed in transgenic rice cell cultures. The sequence of the 21-nucleotide siRNA was deliberately designed and synthesized with overhangs to inactivate the expression of hCTLA4Ig. The chemically synthesized siRNA duplex was combined with polyethyleneimine (PEl) at a mass ratio of 1:10 (0.33 ${\mu}g$ siRNA:3.3 ${\mu}g$ PEl) to produce complexes. The siRNA complexes (siRNA+PEI) were labeled with Cy3 in order to subsequently confirm the delivery by fluorescent microscopy. In addition, the cells were treated with sonoporation at 40 kHz and 419W for 90 s to improve the delivery. The siRNA complexes alone inhibited the expression of hCTLA4Ig to 45% compared with control. The siRNA complexes delivered with sonoporation downregulated the production of hCTLA4Ig to 73%. Therefore, we concluded that the delivery of siRNA complexes into plant cells could be enhanced successfully by sonoporation.
Objective : This study was performed to investigate the effect of oral administration of Oldenlandiae Diffusae Herba (ODH) on eosinophil, immunoglobulin-E and interleukin-4 in the experimental asthma induced by ovalbumin. Methods : Asthma was induced to Balb/c mouse by i.p. injection and aerosol immunization with ovalbumin. It was observed the change of the eosinophil number in the BALF. And, it was observed the change of the concentrations of IL-4 in BALF and splenocyte, IgE in serum by ELISA. Results : 1. The number of eosinophil in BALF was significantly decreased in ODH group copared with control group. 2. Concentration of IL-4 in serum, BALF and splenocyte was significantly decreased in ODH group compared with control group, respectively. 3. Level of IgE in serum was significantly decreased in ODH group compared with control group. Conclusion : We found that the effect of ODH extract in asthma was implicated in reductions of IL-4 released from Th2 cell, and decreases of IgE from plasma cell. These findings suggest that ODH extract can produce anti-asthmatic effect, which may playa role in allergen-induced asthma therapy.
Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2000.05a
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pp.446-446
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2000
Specific polyclonal and/or monoclonal antibodies (MAbs) to immunoglobulins (Igs) and their subunits have proved to be valuable tools in immunological research and in immunological assays. In this study, we developed and characterized MAbs against flounder serum Igs. To obtain the pure flounder serum Igs, mouse IgG (mIgG) was immunized to flounder. Flounder Igs were purified by using mIgG-agarose affinity column chromatography. The structure of purified flounder Ig was observed, on denatured SDS-PAGE, to be composed of two heavy chains (77 and 72 kd) and two light chains (28 and 26 kd). MAbs were produced by fusion of myeloma cells (SP2/0) with Balb/c mouse spleen cells previously primed with the flounder Igs. Finally, three hybridoma clones, FIM 511, FIM 519 and FIM 562 were established to recognize both 2 heavy chains, 26 kd of light chain and 28 kd of light chain, respectively. On the other hand, the flounder immune sera collected on the weekly basis were tested on ELISA and immunoblot analysis whether boosting effect is present in flounder humoral immune system. As a result, the secondary immune response in flounder was ascertained on ELISA, but not on immunoblot analysis. Further, we observed an alteration of serum protein levels following immunization. Our MAbs and basic information on flounder humoral immune system obtained in this study will be helpful to control and monitor the efficiency of fish vaccines and therapeutic process of flounder diseases.
We previously examined extracts, isolated from Scutellaria baicalensis (SB), chemical mediators, and IgE by mesenteric lymph node (MLN) lymphocytes in rats. The present study was to evaluate the effects of extracts of SB on the MLN lymphocytes function of mice given orally by 20 mg/kg for 2 weeks with dextran sulfate sodium (DS)-induced colitis. Results show that IgE levels in MLN lymphocytes was low, while IgA was high, in mice given SB compared to that fed water. Concentrations of $Inteferon-{\gamma}$ and interleukin (IL)-2 of T cells by concanavalin A treatment was significantly higher in the SB fed group than the normal group. Activation-induced IL-4 and IL-10 secretion was lower in SB fed mice compared control mice after DS-induced colitis. These results suggested that SB suppresses the inflammation in DS-induced colitis through the modulation of Th1/Th2 balance to down-regulate $Th_2$ response in MLN lymphocytes.
This study was carried out to investigate the effect of dietary supplementation of red ginseng by-product (RGB) on the laying performance, blood biochemistry, and microbial population in laying hens. A total of 120 Hy-Line Brown laying hens (75 weeks old) were randomly allotted to 1 of 3 dietary treatments with 4 replicates per treatment. A commercial-type basal diet was prepared, and 2 additional diets were prepared by supplementing 5.0 or 10.0 g/kg of RGB to the basal diet at the expense of corn. The diets were fed to hens on an ad libitum basis for 4 weeks. There were no differences in feed intake, egg weight, and feed conversion ratio during 4 weeks of the feeding trial. However, hen-day egg production was significantly greater (p<0.05) for the RGB treatment groups than that for the basal treatment group. There were no differences in triglyceride, aspartate aminotransferase, and alanine aminotransferase during the 4-week feeding trial. However, RGB supplementation increased (p<0.05) the serum immunoglobulin G (IgG) and IgM content compared with basal treatment group. The total cholesterol was lower (p<0.05) in the RGB treatments groups than that in the basal treatment group. The intestinal Lactobacillus population was greater (p<0.05) for the RGB treatments groups than that for the basal treatment group. However, the numbers of Salmonella and Escherichia coli were not different among dietary treatments. During the entire experiment, there was no significant difference in egg quality among all the treatments. In conclusion, in addition to improving hen-day production, there were positive effects of dietary RGB supplementation on serum immunoglobulin and cholesterol levels in laying hens.
The object of this trial was to investigate the effect of dietary ${\beta}$-1,3/1,6-glucan supplementation on the performance and immunological response of broiler chickens. Two hundred and forty 1-day old male broilers ($39{\pm}1g$) were separated into six treatments which were given six different feeds containing 0 (control), 25, 50, 75, 100 and 125 mg/kg dietary ${\beta}$-1,3/1,6-glucan supplementation. On days 21 and 42, body weight gain, feed consumption and feed conversation rate were recorded as measures of growth performance. The levels of key cytokines in the immuno-regulating pathway: interleukin-1 (IL-1), interleukin-2 (IL-2), interferon $\gamma$(IFN-$\gamma$, tumor necrosis factor $\alpha$(TNF-$\alpha$, and the concentrations of signal molecules: peripheral blood plasma globulin, serum Immunoglobulin G (IgG) and intestinal secretary Immunoglobulin A (sIgA), were measured as indices of the immune response to determine suitable levels of dietary ${\beta}$-1,3/1,6-glucan supplementation. The results indicated that performance was elevated quadratically with dietary ${\beta}$-1,3/1,6-glucan supplementation. Maximal growth performance and an enhanced immunological response were obtained at a supplemented level of 50 mg/kg.
Objectives : The aim of this study is to investigate anti-atopic dermatitis effect using ato-tang.Methods : Ato-tang was external treatment to NC/Nga mice for 4 weeks, where atopic dermatitis was induced by DNCB at 1% and 0.4% for 3 weeks. Atopic dermatitis index score was measured using eye observation and picture evaluation. The histopathological change of dorsal skin was observed by hematoxylin and eosin (H&E) staining. Cytokines including IL-4, IL-5 and IL-13 were measured by Luminex or reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis and immunoglobulin E (IgE) was measured by ELISA reader.Results : The dorsal skin of Ato-tang group showed decrease in erythema, pruritus, dry skin, edema, excoriation, erosion and lichenification level through naked eye observations. Immunoglobulin cell infiltration and the thickness of epidermis were significantly decreased in the dorsal skin compared to control. Production of Th2 cytokines (IL-4, IL-5, IL-13) and IgE level in serum were all significantly decreased, in comparison with control. In addition, mRNA expression level of Th2 cytokines (IL-4, IL-5, IL-13) in spleen was decreased, in comparison with control.Conclusion : The results indicated that external treatment of ato was improved skin barrier function in the symptoms of atopic dermatitis disease. Also, atopic dermatitis factors where cytokine as well as immunoglobulin E in serum and mRNA expression were decreased, respectively, in comparison with control. Therefore, we suggest that ato could be effectively used as a external therapeutic drug based on atopic dermatitis factors.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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