To determine the concentration of Lactoperoxidase (LPO), an indirect enzyme-linked immunosorbant assay(ELISA) was developed. Anti-LPO egg yolk immunoglobulin(IgY) was transferred to egg yolk by immunizing of Brown hens with LPO. The titer of purified anti-LPO IgY was 1: 520,000. The immunological response of anti- LPO IgY with ${\alpha}$-lactalbumin, ${\beta}$-lactoglobulin, casein and lysozyme were evaluated, resulting that the anti-LPO IgY found to be a specific antibody toward LPO and no cross-reaction was observed against ${\alpha}$-lactalbumin, ${\beta}$-lactoglobulin, casein, and lysozyme in double immunodiffusion test and ELISA test. In indirect ELISA method, coating concentration of LPO and dilution rate of anti-LPO IgY was 0.25$\mu\textrm{g}$/mL and 1:8,000 respectively. Sensitivity in the standard curve of LPO was ranged from 0.01 to 1$\mu\textrm{g}$/mL using anti-LPO IgY.
This study was undertaken to observe the relationship between salivary IgA, IgG, agglutinin titer & dental caries. The subjects divided into two groups, an active caries group (AC group) and caries-free and treated caries group (CFTC group). The AC group consisted of 36 subjects who had one or more carious lesions and the CFTC group of 12 subjects who had no evidence of caries or had filled teeth without present carious teeth for the last six months. The IgA, IgG and IgM levels in their saliva were measured by single radial immunodiffusion method using a disposable low-level immunodiffusion plate. The salivary agglutinin titers to Streptococcus mutans were measured by microtitration system. The results were as follow; 1. The mean value of IgA concentration in saliva of AC group was slightly higher than that of CFTC group, but its difference was slight. 2. The mean value of IgG concentration in saliva of AC group was slightly lower than that of CFTC group. The IgM concentration in saliva of both groups was neither below 1.1 mg/dl nor detected on LC partigen immunodiffusion plate. 3. There was no difference in the agglutinin titer to S. mutans antigen by serotypes, but low level agglutinin to type d was measured in both groups. 4. AC group showed low correlation between IgA, IgG & DMFT, but CFTC group revealed negative correlation. 5. The relationship between salivary IgA & agglutinin titers to S. mutans was low correlation in AC group, but CFTC group showed significant positive correlation. (P<0.05) 6. There were no specific correlations among the concentrations of salivary immunoglobulins, agglutinin titers to S. mutans, and the DMF teeth. They had no close concern to induce the dental caries.
Antigenicity of Rhodotrula rubra isolated from pulmonary tissue of pulmonary tuberculosis patients was studied by means of agglutination reaction with R. rubra whole cell antiserum. And the serological reactivity of crude polyfac charide from R. frubra, Candida albicans, Candida tropicalis, Candida, glabrata, and Saccharomyces cerevisiae ATCC 26603 with antiserum to R. rubra whole cell was studied by means of immunodiffusion test. R. rubra showed stationary phase after 48h when it was cultured in GYEP broth. While agglutinogen titer was 1:64 at lag phase, agglutinogen titer was 1 :256 after 20h. After growth of R. rubra on different 11 media, nutritional environment showed similar agglu-tination reartivity. The agglutinogen titer of C. albicans, C. tropicalis, C. giabrata, which were isolated from patient's expectoration, to R. rubra antiserum by means of agglutination reaction were 1:16, respectively. But, Sacch. cervisiae ATCC26603 was negative. Those results were lower than that of R. rubra agglutinogen titer 1:256. As a result of immu-nodiffusion test with crude polysaccharide extracted from cell wall of R. rubra, C. albicans, C. tropicalis, C. glabrata, Sacch. cervisiae ATCC26603, precipitin line was found only with R. rubra, of which antibody titer was 8.
We surveyed the antibody titers in the slaughtered pigs by enzyme immunodiffusion method for the epidemiological distribution of Aujeszky's disease in Korea. And also we observed the clinical symptoms, histopathological findings and antibody titers by serologic neutralization test in experimental animals infected with Aujeszky's disease virus(ADV) isolated from Korea. The results of the experiments were summarized as follows. 1. We detected 2 pigs infected with ADV of 1000 in 1990 and 1 of 600 in 1991 by enzyme immunodiffusion method. 2. In histopathological findings of experimental animals inoculated ADV, the typical characteristics of Aujeszky's disease were not observed in pig, but edema and degeneration in the epidermis were observed in rats, vasculoendotheriosis, perivascular cuffing and cellular infiltration in the cerebrum were appeared in rabbits and perivascular cuffing and forcal infiltration of glial cells in the cerebrum were appeared in mice. 3. The increasing antibody titers(1 : 64) in the serological neutralization test were ascertained in 2 carrier pigs inoculated ADV. 4. Rabbits, mice and rats died all about 5 days after inoculation, but pigs and chickens didn't die. 5. In 1 cat and 2 rabbits inoculated with the Aujeszky's disease virus(ADV), the typical clinical findings of Aujeszky's disease were observed in rabbit, but not in cat and so we slaughtered without any signs of Aujeszky's disease.
Total 51 calves born from both 28 seropositive and 23 seronegative dams were subjected to study both prenatal and postnatal infections of bovine leukemia virus (BLV), and the duration of passive colostral antibody by means of immunodiffusion (ID) test. All calves were tested for precolostral and postcolostral periods by 16 months of age. The results were as follows: 1. Of 28 precolostral sera of the calves born from infected dams, one appeared positive, indicating in utero BLV infection from the dam. 2. BLV-antibody test for the postcolostral sera of the calves born from seropositive or seronegative dams showed that the colostral antibody of the calves disappeared from 2 to 6 months of age, and the increase of the number of seropositive calves initiated from 3 to 4 months of age indicated postnatal infection.
The changes in antigenicity during cultivation of streptomycetes were determined by immunodiffusion assay and indirect ELISA. New precipitin lines in immunodiffusion assay began to appear in the growth period of the soluble pigment production and became thickened thereafter. The increase in the antigenicity was also confirmed by ELISA. The antigenic development was relatively weak for S. lavendulae and S. viridochromogenes while that was strong for S. lavendulae and S. viridochromogenes. The results indicated that Streptomyces strains, even though not proved for some strains, changed the compositions of cell envelope during submerged growth and this could be estimated quantitatively by serological method.
Since bovine leukosis caused considerable economic loss to the dairy industry, seroepidemiologi-cal survey on bovine leukosis was carried out for the dairy herds in Kyunggi province. 1. When compared the results of immunodifussion test with those of enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for 94 dairy herds sera, the relationship between the immunodifussion test and ELISA were showen high corresponding rate with sensitivity(97.5%) and specificity(92.6%). 2. In immunodiffusion test for bovine leukosis virus (BLV) antibody in 570 dairy cattle from 30 herds, mean positive rate for BLV antibody was 28.2%. The positive rate by districts were 16.5% in central, 35.4% in east, 17.3% in west, 29.1% in south, 31.6% in north, 43.7% in northeast. 3. When the results of serological studies was analyzed by age groups, the number of positive was increased gradually with the advanced in age of herds. The highest positive rate was found in the age over 6 years. 4. Of 30 dairy herds examined, 5 herds(16.7%) have no reactions against BLV antigen while 15 herds (50%) showed the range of 1∼5 positive cattle and 5 herds(16.7%), the rang of over 11 positive cattle.
This investigation is designed to illustrate the clinical features '||'&'||' preoperative diagnosis, surgical role in the management of pulmonary aspergilloma, '||'&'||' compare with the previous study. We reviewed 42 cases of surgically treated pulmonary aspergillosis from Jan. 1984 to July 1992. The peak age incidence laid in the 2nd '||'&'||' 3rd decade of 25 cases[59.5%]. The 41 cases[97.6%] had a history of treatment with anti-tuberculous drugs under impression of pulmonary tuberculosis. The most common complaint was hemoptysis in 28 cases[66.7%]. The 21 cases showed so called "Air-meniscus sign" on the preoperative chest X-ray. As a preoperative diagnostic modality, the positivity was 30.0%, 57.8%, 88.5% on the fungus culture of sputum for Aspergillus, Chest CT, serum immunodiffusion test for A. fumigatus, respectively. The 37 cases[88.1%] can be diagnosed as pulmonary aspergillosis pre-operatively by any diagnostic method. The anatomical location of aspergilloma was mainly upper lobe in 17 cases[40.5%] '||'&'||' the majority of cases were managed by lobectomy. The postoperative pathologic findings showed that 18 cases[41.0%] were combined with tuberculosis '||'&'||' 15 cases[34.1%] were not combined with any other disease[Pr imary Aspergillosis]. The 6 cases showed postoperative empyema including 4 cases of bronchopleural fistula, 3 cases showed postoperative bleeding. One case was died postoperatively due to respiratory failure. In conclusion, when the patient who has longstanding history fo pulmonary tuberculosis '||'&'||' hemoptysis, must be suspected fungal super infection. The resectional surgery is the treatment of choice for symptomatic localized disease. And compare with the previous study, preop. chest CT '||'&'||' immunodiffusion test were more commonly available '||'&'||' showed high positivity.
A new method developed for simultaneous purification of enterotoxin A and C from Staphylococcus aureus strain L 350/1 consisted of chromatography on carboxymethyl (CM)-cellulose using a buffer of variable pH, gel filtration on Ultro gel, and fast protein liquid chromatography(FPLC) using a buffer of variable pH. The enterotoxin A and C were purified by three steps: batchwise adsorption from culture supernatant on Amberlite CG-50; chromatography on CM-cellulose using a buffer of constant pH and molarity; and gel filtration on Sephadex G-75. The purified enterotoxin appeared homogeneous by gel diffusion and polyacrylamide gel electrophoresis. Upon treatment with CM-cellulose using a elution of variable pH, enterotoxin A and C were so close that they were not separated completely. After elution from gels, the enterotoxins appeared as a single peak at the same position. Gel filtration gave a reaction of complete identity to enterotoxin A and C in Ouchterlony immunodiffusion. In FPLC using a CM-cellulose, enterotoxin A and C were simultaneously separated at pH 8.6 and 6.8. When each fraction was performed to gel immunodiffusion, at peak of enterotoxin A and C were not detected each other. In a method of elution by pH-gradient was to be more efficient as a simultaneous separation method in terms of speed, yields and simplicity. The purified toxin A and C were identical to type A and C reference enterotoxin on both disc electrophoresis and Ouchterlony gel diffusion.
These experiments were carried out to isolate SIgA from human and bovine milk. The immunochemical properties of SIgA from human and bovine milk were examined by Gel filtration, DEAE and SDS-PAGE. Double Immunodiffusion, and Immunoelectrophoresis. The results obtained are as follows: 1. Human SIgA was purified from colostrum of Korean women by repeated gel filtration on Sephadex G-200 and Sepharose 6B, but bovine SigA was not cleary purified from bovine colostrum of Holstein cows by anion exchange chromatography using DEAE-Sephadex A-50 and gel filtration on Sephadex G-200 and Sepharose 6B. 2. The immunochemical properties of fractions from gel filtration on the Sephadex G-200 and Sepharose 6B column as assessed by Immunoelectrophoresis and double Immunodiffusion to identify the presence of IgM in first peak fraction, and the presence of pure SIgA in second peak fraction. However, Bovine SigA rich fraction from bovine colostrum of Holstein cows contained a large amount of $IgG_1$-dimer in addition to SIgA. 3. The fragments of reduced bovine colostrum SIgA rich fraction were estimated to have molecular weights of secretory component, heavy chain and light chain (75,000-80,000, 50,000-60,000, 25,000-27,000 daltons) by SDS-PAGE, respectively. Those were similar to the molecular weight of reduced SIgA from human milk.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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