• 대한본초학회지
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• 제23권3호
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• pp.11-18
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• 2008

SunBangHwalMyungEum (SBH) has the effects of subduing swelling, resolving masses and alleviating pain in traditional oriental medicine. Recent studies showed that SunBangHwalMyungEum produced anti-cancer, anti-metastasis and immuno-modulatory effects. However there is lack of studies regarding the effects of SBH on the immunological activities. The present study was conducted to evaluate the effect of SBH on the regulatory mechanism of cytokines and nitric oxide (NO) in Raw 264.7 cells. Methods : After the treatment of SBH, cell viability was measured by MTT assay, NO production was monitored by measuring the nitrite content in culture medium. Inducible nitric oxide synthase (iNOS) was determined by immunoblot analysis, and levels of cytokine were analyzed by sandwich immunoassays. Results : Results provided evidence that SBH inhibited the production of NO, iNOS, $interleukin-1{\beta}$ ($(IL-1{\beta})$), IL-6, and the activation of phospholylation of inhibitor ${\kappa}B{\alpha}$ in Raw 264.7 cells activated with lipopolysaccharide. Conclusions : These findings suggest that SBH can produce anti-inflammatory effect, which may play a role in adjunctive therapy in Gram-negative bacterial infections.

• Korean Journal of Acupuncture
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• 제27권3호
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• pp.109-118
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• 2010

Objectives : The purpose of this study is to investigate the effect of Bacillus-fermented Scutellariae Radix acupuncture solution (SB) on chemokine and growth factor production in RAW 264.7 mouse macrophages stimulated by lipopolysaccharide (LPS). Methods : Productions of chemokine and growth factor were measured by High-throughput Multiplex Bead based Assay with Bio-plex Suspension Array System based on xMAP$^{(R)}$ technology. Firstly, cell culture supernatant was obtained after treatment with LPS (1 ${\mu}g$/mL) and SB for 24 hours. Then, it was incubated with the antibody-conjugated beads for 30 minutes. Detection antibody was then added and incubated for 30 minutes. After incubated for 30 minutes, strepavidin-conjugated phycoerythrin (SAPE) was added. After another 30 minutes incubation, the level of SAPE fluorescence was analyzed in Bio-plex Suspension Array System. Results : The results of the experiment are as follows. 1. SB significantly inhibited the LPS-induced production of vascular endothelial growth factor (VEGF), interferon-inducible protein (IP)-10, and granulocyte-colony stimulating factor (G-CSF) at the concentration of 25, 50, 100, and 200 ${\mu}g$/mL in RAW 264.7 cells (P < 0.05). 2. SB significantly inhibited the LPS-induced production of Eotaxin at the concentration of 25, 100, and 200 ${\mu}g$/mL in RAW 264.7 cells (P < 0.05). 3. SB significantly inhibited the LPS-induced production of MIP-$1\alpha$ at the concentration of 25 and 100 ${\mu}g$/mL in RAW 264.7 cells (P < 0.05). Conclusions : These results suggest that SB has immuno-modulatory property related with its inhibition of VEGF, IP-10, G-CSF, and Eotaxin production in macrophages.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제15권5호
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• pp.749-753
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• 2008

청도반시 추출물로부터 라디칼 소거활성, T-bet promoter 활성, IL-4 발현 활성의 상관관계를 분석하고자 7월부터 10월까지 감을 시기별로 수확하여 분자염증 활성 여부를 확인하였다. 감의 무게는 시기가 경과할수록 무거워지면서 항산화 활성에 있어서는 감이 미숙과일수록 항산화활성이 우수하였다. 4가지의 용매로 추출한 감의 항산화 활성도 유사한 양상을 보였다. T-bet promoter 활성은 추숙이 될 수록 억제되는 양상을 보였는데, 이에 반하여 IL-4의 발현 정도는 숙성함에 따라 증가하는 것을 알 수 있었다. 이로 미루어 보아 수확시기에 따라 이러한 분자염증에 관련한 일련의 활성의 억제 효과는 감이 미숙과일수록 활성이 상승하였다.

• 한국약용작물학회지
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• 제15권6호
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• pp.405-410
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• 2007

인간 정상 폐세포인 HEL299을 이용한 세포 독성을 살펴본 결과, 각 추출물은 1.0 $mg/m{\ell}$의 농도에서 최고 19.5%의 세포독성을 나타내었다. 또한 항암활성 효과를 살펴보기 위하여 2가지의 암세포를 이용하였는데, AGS, A549, MCF-7, Hep3B에서 수피 추출물의 경우 1.0 $mg/m{\ell}$의 농도에서 55% 이상의 높은 억제활성을 나타내었고, 또한 암세포의 생육활성에 대한 정상 세포의 세포독성 비로 나타낸 선택적 사멸도는 고농도에서는 모두 3이상으로 나타났다. B cell과 T cell을 이용한 면역세포의 생육 촉진 실험에서는, BT cell 은 배양 5일째 수피 추출물이 각각 $7.5{\times}10^4cells/m{\ell}$, $8.2{\times}10^4cells/m{\ell}$로 가장 높은 세포농도를 나타냈다. 면역세포를 이용한 cytokine의 분비량 측정실험에서는 수피 추출물이 배양 시간에 따른 cytokine의 분비가 가장 높게 나타나는 것을 확인할 수 있었다. 각 세포의 $TNF-{\alpha}$의 분비량은 6일째 최고의 분비량을 나타내었고, 수피 추출물의 경우 대조군에 비해 7-8 배가량 정도 더 높은 분비량을 나타낸 것을 확인하였다. IL-6의 경우 6일째 최고의 분비량을 나타내었고, 수피 추출물에서 가장 높은 분비량을 나타내었다. 또한 우산고로쇠 수피 추출물을 첨가한 배지에 의한 NK cell의 면역활성을 측정하였으며, 모든 추출물에서 배양 시간에 따라 유의적으로 증가하는 것을 확인하였다. 그 중 우산고로쇠 수피 추출물에서 B cell의 경우 $18.0{\times}10^4cells/m{\ell}$, T cell의 경우 $17.2{\times}10^4cells/m{\ell}$으로 가장 높은 생육 활성을 나타내었다. 본 실험 결과를 통하여 고로쇠와 우산고로쇠의 기능성 소재로서의 가능성을 확인하였으며, 유용성분 분리와 생리활성에 대한 연구가 보다 다각적으로 가져야 할 것으로 생각된다.

• 동의생리병리학회지
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• 제18권3호
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• pp.880-886
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• 2004

Phellinus igniarius has been clinically used for the treatment of hemorrhoidal fistula, dysmenorrhea and the prevention of cancer in traditional oriental medicine. Recent studies showed that Phellinus igniarius produced anti-cancer, anti-metastasis and immuno-modulatory effects, There is lack of studies regarding the effects of Phellinus igniarius on the immunological activities. The present study was conducted to evaluate the effect of Phellinus igniarius on the regulatory mechanism of cytokines and nitric oxide (NO) for the immunological activities in Raw 264,7 cells. After the treatment of Phellinus igniarius water extract, cell viability was measured by MTT assay, NO production was monitored by measuring the nitrite content in culture medium. COX-2 and iNOS were determined by Immunoblot analysis, and levels of cytokine were analyzed by sandwich immunoassays. Results provided evidence that Phellinus igniarius inhibited the production of nitrite and nitrate (NO), inducible nitric oxide synthase (iNOS), interleukin-1β (IL-1β) and interleukin-6 (IL-6), and the activation of phospholylation of inhibitor κBα (p-IκBα) in Raw 264.7 cells activated with lipopolysaccharide (LPS). These findings suggest that Phellinus igniarius can produce anti-inflammatory effect, which may play a role in adjunctive therapy in Gram-negative bacterial infections.

• 한국식품과학회지
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• 제50권4호
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• pp.437-443
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• 2018

본 연구는 꿀벌 꽃가루 열수 추출물(BPW)의 면역 활성에 관하여 알아보기 위하여, 선천면역과 적응면역에서 중심 역할을 수행하는 큰포식세포에 BPW를 처리하여 세포 생존율, NO 분비능, 사이토카인($TNF-{\alpha}$, IL-6, $IL-1{\beta}$) 분비능과 메커니즘 분석을 통한 신호전달에 관하여 관찰하였다. BPW를 큰포식세포에 처리하여 면역활성에 관하여 알아봤을 때, 큰포식세포 면역활성의 대표적인 바이오마커인 NO, 사이토카인의 분비능과 iNOS의 세포내 발현이 BPW 처리구에서 유의적으로 증가되는 것으로 관찰되었다. 또한 활성화된 탐식 세포의 세포 표면에서 발현되는 CD80과 CD86의 발현과 탐식세포의 항원제시에 밀접한 관련이 있는 주조직적합성 복합체(MHC class I과 II)의 발현이 BPW 처리구에서 유의적으로 증가되는 것으로 관찰되었다. 기전분석 결과, BPW의 처리는 MAPKs의 인산화와 $NF-{\kappa}B$의 핵 내 이동성을 증가시켜 면역활성을 증가시키는 것으로 관찰되었다. 따라서 BPW의 처리는 큰포식세포의 활성을 유도시켜 면역활성을 조절하는 것으로 관찰되었다.

• 한국약용작물학회지
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• 제26권1호
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• pp.72-81
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• 2018

Background: Polysaccharides are the most important functional constituent in Astragalus membranaceus. The purpose of the present study was to evaluate the effect of polysaccharides isolated from the aboveground parts of A. membranaceus (AMA) and polysaccharides isolated from the roots of A. membranaceus (AMR) immune function by modulated cytotoxic T cell and Th1- and Th2-related cytokines kinetics. Methods and Results: Sprague-Dawley rats were randomly divided into exhaustive exercise case groups and non-exercise case, AMA and AMR samples were administered orally for 30 days (500 mg/kg/day and 10 mg/kg/day, respectively) and were compared to those rats in the groups fed commercial sports drink (SPD) and vehicle. Both exhaustive exercise groups and non-exercise groups had a lower ratio of $CD4^+$ and $CD8^+$ cells in the spleens of the rat fed AMA and AMR compared to those in the rats fed SPD and vehicle group. These results suggested that AMA and AMR promote an increase in the proportion of cytotoxic T cells. The IL-4-producing T lymphocytes decreased significantly in the AMR (10 mg/kg/day) group compared to SPD and vehicle, whereas the AMA group increased the IL-4 concentration more than the SPD and vehicle in exhaustive exercise group. However, the populations of IFN-${\gamma}$-producing T lymphocytes of AMR and AMA increased. AMA decreased the concentration of IFN-${\gamma}$ to inhibit the Th1 response and thereby increased the concentration of IL-4 to induce a Th2 response that was related to humoral immunity in the non-exercise group. Conclusions: These results showed that, in addition to Th1/Th2 regulation, AMR and AMA played an important immuno-modulatory role after exhaustive exercise-induced Th1/Th2 lymphocyte imbalance, which might be correlated with cytokine producing immunoregulatory cells.

• 한국약용작물학회지
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• 제15권3호
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• pp.162-169
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• 2007

여러 가지 추출조건을 통해 얻은 오미자 추출물과 전통발효공정을 통해 얻은 오미자 발효액의 면역증진 활성을 비교하였다. 오미자 발효액이 B cell과 T cell에서 시료를 첨가하지 않은 대조군과 비교하여 각각 30%와 22%이상의 수치를 나타내며 가장 좋은 활성을 나타내었다. B, T cell의 cytokine 분비량 측정을 통한 실험에서도 오미자의 전통발효액이 생육증진과 유의적으로 가장 많은 분비량을 나타내었다. 대식세포를 이용한 NO$^-$ 생성능 측정에서 오미자 발효액 및 추출물의 활성이 LPS와 비교해 비슷하거나 높은 것을 확인하였다. 또한 시료를 LPS와 같이 첨가하였을 때 시료만을 첨가했을 때보다 높은 활성을 나타내어 농도에 따른 유의적 활성 증가가 이루어질 것으로 사료된다. NK cell의 활성측정에서 모든 시료 조건에서 6일 동안 생육이 증가하였으며 오미자 발효액을 첨가한 것이 아무것도 첨가하지 않은 대조군과 비교하여 약 1.4배의 생육도 증진을 나타내어 1.2배의 생육도 증진을 보인 100$^{\circ}$C에서 초음파를 병행한 물 추출물보다 높은 활성을 나타내었다. HPLC를 이용한 추출물들의 성분 분석에서 전통발효 공정을 통해 추출공정에서 확인할 수 없었던 특정 성분의 생성 및 기존 성분의 용출 증진이 이루어지는 것을 확인하였고, 이에 따라 면역활성의 증진이 이루어지는 것으로 추정할 수 있었다. 이상의 결과에서 오미자는 면역활성을 가지는 성분을 함유하고 있으며 전통발효 공정을 통해 생성되는 대사산물이 면역실험에서 유효활성 증진을 나타내는 것을 확인하였다. 이는 전통발효 공정을 통해 생성된 성분의 활성으로 세포독성이 감소하고 세포활성이 증가하기 때문인 것으로 생각된다. 이상의결과는 기존에 면역활성 증진 효과를 나타내는 초음파병행 공정 보다 높은 증진 효과로 전통발효 공정 및 활성성분에 대한 다각적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

• 한국산림과학회지
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• 제99권1호
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• pp.16-23
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• 2010

본 연구에서는 인간 면역 세포인 B 세포와 T 세포 그리고 그들의 cytokinedml 분비에 대해서 조사하였다. 또한 일일 경구 투여량을 30 mg/mL 그리고 100 mg/mL의 농도로 조절하여 암컷 ICR 마우스에 투여하여 혈청에서의 항체 생성량을 조사하였다. 인간 정상 폐세포에 대한 세포독성 결과 모든 추출물이 24.15% 이하의 독성을 나타내었다. 인간 면역 세포인 B 세포와 T 세포 모두 초고압 추출공정에 의해 40% 이상 생육이 증진하였다. 인간 면역 세포인 B 세포와 T 세포에서 분비되는 cytokine(IL-6, TNF-${\alpha}$)의 양은 일반 열수 추출 공정과 비교하여 약 20-50% 증가하였다. 또한 고로쇠 추출물의 투여로 인해 총 항체 생성량도 증가하였다. 이와 같은 결과에서 고로쇠의 효과적인 최적의 추출 조건은 일반적인 공정 보다 $100^{\circ}C$이하의 온도에서 높은 압력과 함께 용매 추출공정을 이용하는 것이다.

• 한국축산식품학회:학술대회논문집
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• 한국축산식품학회 2001년도 임시총회 및 제28차 추계학술발표회
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• pp.43-56
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• 2001

Colostrum contains various kinds of cytokines including TGF-${\beta}$ which is known to be multifunctional in immune response and act as an anti-inflammatory agent. First, we measured the amount of TGF-${\beta}$ in bovine and human colostrum. Expression pattern of TGF-${\beta}$ isotypes was dramatically different between human and bovine colostrial samples. Bovine colostrum collected on day 1 post-delivery retained $41.79{\pm}16.96ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 1 and $108.4{\pm}78.65ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 2 while in human, $284{\pm}124.75ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 1 and $29.75{\pm}6.73ng/ml$ of TGF-${\beta}$ 2. Thus, TGF-${\beta}$ is the predominant TGF-${\beta}$ isotype in bovine colostrum and vice versa in human colostrum. Both TGF-${\beta}$ isotypes diminished significantly in human and bovine colostrum with time. Next, biological activity of colostrial samples was examined in vitro. Both human and bovine colostrum increased IgA synthesis by LPS-activated mouse spleen B cells, which is a typical effect of TGF-${\beta}$ on the mouse B cell differentiation. Futhermore, we found that anti-proliferative activity in MV1LU cells by colostrum samples disappeared by addition of anti-TGF-${\beta}$ 1 and anti-TGF-${\beta}$ 2 antibody. In conclusion, there are substantial amounts of biologically active TGF-${\beta}$ 1 and TGF-${\beta}$ 2 in bovine and human colostrum. The results that the colostrum can increase IgA expression has important implications since IgA is the major Ig class produced in the gastrointestinal tract. We have previously shown that the stimulatory effect of Bifidobacteria bifidum on spllen B cells was quite similar to that of LPS which is a well-known polyclonal activator for murine B cells. In the present study, we further asked whether B. bifidum regulate the synthesis of IgA by mucosal lymphoid cells present in Peyers patches (PP) and mesenteric lymph nodes (MLN). B. bifidum alone, but not C. perfringens, significantly induced overall IgA and IgM synthesis by both MLN and PP cells. This observation indicates that B. bifidum possesses a modulatory effect on the mucosal antibody production in vivo. We, therefore, investigated the mucosal antibody prodduction following peroral administration of B. bifidum to mice. Ingested B. bifidum significantly increased the numbers of Ig (IgM, IgG, and IgA) secreting cells in the culture of both MLN and spleen cells, indicating that peroally introduced B. bifidum enhances mucosal and systemic antibody response. Importantly, however, B. bifidum itself does not induce the own specific antibody responses, implying that B. bifidum do not incite any unwanted immune reaction. Subsequently, it was found that excapsulation of B. bifidum further augments the total IgA production by increasing the number of IgA-secreting cells in the culture of both MLN and spleen cells. Finally, we found that the immuno-stimulating activity of B. bifidum is due to its cell wall components but not due to any actively secreting component(s) from bacteria. Thus our data reveal that peroral administration of B. bifidum can enhance intestinal IgA production and that encapsulation of B. bifidum further reinforces the IgA production.