Kim, Yesol;Shukla, Shruti;Ahmed, Maruf;Son, Seokmin;Kim, Myunghee;Oh, Sejong
한국축산식품학회지
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제32권6호
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pp.706-712
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2012
The present study was aimed to produce a chicken polyclonal antibody against Cronobacter muytjensii and to develop an immunoassay for its detection. Purification of anti-C. muytjensii IgY from egg yolk was accomplished using various methods such as water dilution and salt precipitation. As a result, sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis produced two bands around 30 and 66 kDa, corresponding to a light and a heavy chain, respectively. Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (IC-ELISA) was performed to determine the effectiveness of the chicken IgY against C. muytjensii. The optimum conditions for detecting C. muytjensii by indirect ELISA and checkerboard titration of the antigen revealed an optimum average absorbance at the concentration of 18 ${\mu}g/mL$, having ca. $10^8$ coated cells per well. The anti-C. muytjensii IgY antibody had high specificity for C. muytjensii and low cross-reactivity with other tested pathogens. In this assay, no cross-reactivity was observed with the other genera of pathogenic bacteria including Escherichia coli O157:H7, Salmonella Typhimurium, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Enterobacter aerogenes, Salmonella Enteritidis and Listeria monocytogenes. In addition, detection of C. muytjensii in infant formula powder showed a low matrix effect on the detection curve of IC-ELISA for C. muytjensii, with similar detection limit of $10^5$ CFU/mL as shown in standard curve. These findings demonstrate that the developed method is able to detect C. muytjensii in infant formula powder. Due to the stable antibody supply without sacrificing animals, this IgY can have wide applications for the rapid and accurate detection of C. muytjensii in dairy foods samples.
He-Ne, IR Laser가 급성 화농성 슬관절염 치유에 미치는 효과를 알아보기 위해 Sprague-Dawley계 흰쥐를 포도상 구균으로 화농성 슬관절염을 유발 4일 후 부터 1일 1회 4분 및 10분 동안 7일간 레이저로 점조사를 하였다. 레이저 점조사를 한 동물 혈액의 효소활성과 IgG의 변화를 분석하여 얻은 결과는 다음과 같다. ALT활성은 대조군과 각 실험군이 비슷한 수준을 보였다. ALT활성은 관절염군에 비해 10분 레이저군은 유의한 증가를 보였으나 4분 레이저군은 유의하게 감소하여 대조군과 비슷하였다. LDH활성은 대조군에 비하여 10분 레이저군은 유의하게 증가하였으나 관절염군과 4분 레이저군은 유의한 감소를 보였다. ALP활성은 대조군에 비하여 관절염군, 4분 및 10분 레저군이 유의하게 감소되었으나, 그러나 관절염군에 비해 10분 레이저군은 유의한 증가를 보였다. CK활성은 대조군과 관절염군이 비슷하였으나, 관절염군에 비하여는 10분 레이저군은 유의하게 증가하였고, 4분 레이저군은 유의하게 감소되었다. IgG의 변화는 관절염군에 비해 10분 레이저군은 유의한 증가를 보였으며 4분 레이저군은 비슷한 수준을 보였으나 대조군에 비하여 각 실험군이 유의한 증가를 보였다. 이상의 결과를 종합해볼 때 레이저 치료로 근육에 많이 함유하고 있는 효소들이 염증이 있는 관절염군에 비하여 10분 레저군에서 AST, LDH, ALP 및 CK활성과 IgG 농도는 유의하게 증가하였으나,4분 레이저군에서는 AST, LDH, 및 CK활성이 관절염군에 비해 유의하게 감소된 것으로 봐 화농성 슬관절염 치유에 효과가 있는 것으로 생각된다. 앞으로 화농성 관절염에 대해 얻어질 수 있는 레이저 치료효과와 치유기전, 그리고 적절한 조사시간에 대해서는 더 연구되어야 할 것으로 생각된다.
HGJT has been used for the treatment of general weakness, digestive organ disease and so on. This study was carried out for the purpose of knowing the inhibitory effect on the Type I hypersensitivity and Inflammatory reactions of Hwanggigunjungtang(HGJT). The reasults were obtained as follows: HGJT(0.1. 0.5. 1, 2mg/g) concentration of dependently inhibited compound48/80 induced anaphylaxis reaction in mice. HGJT(2mg/g) also inhibited permeability of evans blue into peritoneal cavity in mice. HGJT reduced IgE, CRP. WBC and Platelets on egg albumin induced hypersensitivity. But serum NO was grown. According to above results, HGJT may be beneficial in the type I hypersensitivity and Inflammatory reactions by inhibition of histamine release from mast cells.
젖소에서 progesterone과 testosterone의 측정을 위하여 solid phase 효소면역분석법(酵素免疫分析法)를 개발하였다. 1차 항체로서 $11{\alpha}$-hemisuccinate-progesterone bovine serum albumin과 4-androsten-$17\;{\beta}$-ol-3-one-carboxymethyloxime bovine serum albumin에 대한 토끼 혈청(血淸)을 각각 항혈청(抗血淸)으로 사용하였고, 2차 항체로서 면약 IgG를 사용하였다. Conjugates로서는 각각 progesterone-$11\;{\alpha}$-hydroxy-hemisuccinate-horseradish peroxidase와 4-androsten-$17\;{\beta}$-ol-3-hemisuccinate-horseradish peroxidase를 사용하였다. Progesterone과 testosterone에 대한 최저측정치(最低測定値)는 각각 6.7 pg/well과 1.0 pg/well이었다.
본 논문에서는 수용성의 CdSe/ZnS 양자점을 합성하고 이에 항체기능성을 도입하여 lateral flow immunoassay (LFIA) 플랫폼에 융합하여 폐암 질병진단에 활용 가능한 단백질 바이오마커[예: 인간 혈청 아밀로이드 A-1 (hSAA1)]의 농도 분석에 적용하고자 한다. 면역분석법 센서 스트립은 니트로셀룰로오즈 막에 테스트라인과 대조라인으로 각각 항hSAA1 단일클론항체(10G1)(anti-hSAA1)와 항chicken IgY (anti-chicken IgY)를 스프레이하여 제작하였다. 이와 함께, 유기상에서 합성된 CdSe/ZnS 양자점은 카르복실기로 변형된 알케인티올기를 이용한 리간드 교환방법으로 수용성으로 전환하였으며, 이에 타겟 단백질인 hSAA1에 특이적으로 결합 가능한 항체인 항hSAA1 단일클론항체(14F8)로 컨쥬게이션하여 형광검출용 입자[QDs-anti hSAA1 (14F8)]로 사용하였다. 제작된 LFIA 스트립 위에 순차적으로 다른 농도의 hSAA1과 QDs-anti hSAA1 (14F8)의 복합체를 흘려주면, 테스트라인에 anti hSAA1 (10G1)/hSAA1/QDs-anti hSAA1 (14F8) 샌드위치 복합체가 형성되어 양자점에 의한 발광신호가 검출됨을 측정하였다. 최적화된 측방흐름이 가능한 완충용액 조건에서 100 nM 농도의 hSAA1 단백질의 유무를 5 min 안에 눈으로 확인 가능하였다.
수은이 마우스의 세포성 및 체액성 면역반응에 미치는 영향을 밝히고자 실험을 통해 얻은 결과를 다음과 같이 요약하는 바이다. $10^{-2}mM$이상의 농도에서 수은은 시험관내의 마우스 비장세포에 대한 명백한 독성 작용(toxic effect)을 나타냈다. 수은에 의한 마우스 생존을(survival rate)은 0.8mg(per 100g body weight) 이하의 농도에서는 100%생존율을 나타냈으며, 0.9mg 이상의 농도에서는 5일 이내에 100% 치사율을 나타냈다. Subtoxic 농도의 수은 투여에 따른 Arthus 및 DTH반응의 결과는 $Arthus(T_3)$반응에 있어서 수은 투여군과 대조군 사이에 유의한 차이가 나타나지 않았던 반면, $T_{24},\;T_{48}$의 DTH반응은 수은 투여군이 대조군에 비하여 억제되었다. 수은 투여 마우스의 면양적혈구(SRBC)에 대한 항체반응을 측정한 결과 면양적혈구에 대한 총응집소가는 수은 투여 농도에 의존적으로 대조군의 값에 비해 억제되었다. 시험관 내에서 마이토젠에 대한 비장세포의 증식 반응은 수은 농도에 의존적으로 억제되었다. 수은 투여군의 IgE 생산은 농도 증가에 따라 $1.7\sim2.0$배의 수준으로 증가하였으며, $IgG_1$의 경우도 증가의 경향을 보였으나 대조군에 비해 큰 차는 아니었다. 이상의 결과를 살펴볼 때 수은 중독시 출현할 수 있는 면역반응의 변화로서, 초기에는 세포성 면역반응의 감소가 현저할 것으로 사료되나 중독이 진행됨에 따라 Ig농도의 상승을 제외한 체액성 면역반응의 전반적인 감소가 수반될 것으로 예측된다.
Yu, I.T.;Lin, J.;Wu, J.F.;Yen, H.T.;Lee, S.L.;Yang, T.S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제15권1호
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pp.79-83
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2002
The growth and immune responses to endotoxin lipopolysaccharide (LPS) challenge ( $20{\mu}g/kg$) of piglets with and without a iron dextran injection (Fe, 200 mg/head) two days after birth are compared. Sixty-four newborn piglets from eight litters were allocated randomly to one of four treatments. The control received no iron dextran and only saline (Sal) injection on the second and fifteenth day after birth (Sal-Sal). The remaining three groups received Fe-Sal, Sal-LPS, Fe-LPS treatments respectively. On fifteen days of age, blood samples of piglets were taken at 0 h, 1 h, 2 h and 4 d after saline or LPS injection to determine immune functions and blood characteristics. The trial terminated when the pig reached 56 days and the average daily gain of piglets was then measured. Daily gain, serum immunoglobulin G (IgG) concentration and red blood cell counts did not vary significantly among the four groups at any measuring times. Serum tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) concentration increased sharply 1 h after LPS injection. However, iron injection did not change TNF-${\alpha}$ concentration responds to LPS injection. White blood cell counts of two LPS injection groups were significantly lowered 1 h following the injection. In contrast, serum lactoferrin concentration had increased significantly 1 and 2 h postinjection. Furthermore, iron injection produced no further effects on these two criteria. Iron injection increased the hemoglobin (Hb) concentration of piglets at any measuring time, and LPS injection lowered Hb concentration. In conclusion, a 200 mg/head of iron dextran injection on the second day after birth increased Hb concentration, had no detrimental effect on the immune responses and growth of piglets. Moreover, if creep feed (175 mg Fe/kg feed) is provided from d 7 after birth, the Fe-injection does not contribute to overall performance of piglets and may not be a necessity in practice.
Objectives : Allergic disease has been well known as an IgE-dependent immunologic response. Recently, interest about the late inflammatory reaction has grown up as well as early allergic reaction characterized by IgE and mast cell. The purpose of this study was to find the anti-inflammatory effect of Gamiyunjo-tang(GMYJT) in allergic reaction. Methods : The experiment was performed using Raw 264.7 cells pretreated with GMYJT extracts. In this study, we observed the toxicity of cells by MTT analysis and measured the production of LPS-induced NO, $PGE_2$, IL-$1{\beta}$, IL-6 and TNF-${\alpha}$ at a concentration of 50, 100, 200 and $400{\mu}g/ml$. Results : No toxicity of GMYJT (50, 100, 200, $400{\mu}g/ml$) on RAW 264.7 cells was found after 24 hours incubation. LPS-induced NO production was reduced after treatment with GMYJT (100, 200, $400{\mu}g/ml$)(P<0.05). $PGE_2$ was reduced after treatment with GMYJT (100, 200, $400{\mu}g/ml$)(P<0.05). IL-$1{\beta}$ did not decrease at any dose. IL-6 decreased at 200, $400{\mu}g/ml$(P<0.05). TNF-${\alpha}$ production decreased only at $400{\mu}g/ml$(P<0.05). Conclusions : These data suggest that GMYJT has anti-inflammatory effects in late allergic reaction.
1. ETEC F41 균주로부터 분리한 섬모항원의 분자량은 29.5 kDa으로 나타났으며, western blot을 통하여 섬모항원임을 확인하였다. 2. 분리한 섬모항원의 농도를 50 ${\mu}g$/$m\ell$, 200 ${\mu}g$/$m\ell$, 600 ${\mu}g$/$m\ell$로 조정 후 산란계에 접종하였다. 이 후 ELISA법을 이용하여 난황의 항체역가를 측정한 결과 최고치가 320,000(antigen 50${\mu}g$/$m\ell$), 450,000(antigen 200${\mu}g$/$m\ell$), 320,000(anti- gen 600${\mu}g$/$m\ell$)으로 나타났다. 3. F41난황항체와 K88, K99, 987P 섬모항원과의 교차반응을 ELISA법을 이용하여 조사해본 결과 난황항체를 30,000배 희석 시 교차반응이 없었다. 4. 실험실조건하에서 난황항체의 항원결합능력을 조사한 결과, 동결건조한 WSF을 2${\sim}$4 mg/$m\ell$ 첨가 시 균체의 농도가 $10^9$ CFU/$m\ell$에서 $10^5$ CFU/$m\ell$로 급격하게 감소하였다.
본 연구는 오골계에 있어서 성장에 따른 gamma -globulin, lipoprotein 및 중량변동과, Fabricius 낭과 흉선의 적출시 발생 5일령부터 150일령까지의 혈청 protein 농도와 Ig, 백혈구수 및 림프구수의 변동을 조사하고자 수행하였다. 1. 재래계와 오골계의 성장에 따른 gamma-globulin 농도는 발생 당일로부터 5일령까지는 각각 0.41$\pm$0.01~0.85$\pm$0.05 mg/㎗ 와 0.50$\pm$0.01~0.98$\pm$0.08 mg/㎗ 로 증가하였으나 10일령부터 감소하여 낮은 치를 나타내다가 재래계는 100일령부터 오골계는 발생 50일령 이후부터 증가된 수준을 나타냈다. 2. 오골계의 성장에 따른 혈청 alpha-lipoprotein, beta-liporptein 및 gamma -lipoprotein 농도는 각각 74.1$\pm$6.8~240.2$\pm$9.7 mg/㎗, 89.7$\pm$5.7~225.8$\pm$11.3 mg/㎗ 및 87.6$\pm$4.7~220.3$\pm$10.2 mg/㎗ 수준이었다. 오골계의 성장에 따른 혈청 alpha-lipoprotein 농도는 점차적으로 큰 감소를 나타냈다. 3. 오골계의 Fabricius 낭과 흉선 적출후 성장에 따른 백혈구 및 림프구수는 10일령부터 100일령까지 증가경향을 나타냈으며, 흉선 적출군의 백혈구 및 림프구수는 대조군에 비해 낮게 나타났다. 4. 오골계의 Fabricius 낭과 흉선 적출후 성장에 따른 혈청 Ig 농도는 Fabricius 낭 적출군의 경우 대조군에 비해 큰 차이가 없었으나 50일령 이후에는 증가하기 시작하여 100~150일령에서는 5일령에 비해 높은 치를 나타냈으며, 흉선적출군은 성장에 따른 유의한 증가경향을 나타냈다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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