• 제목/요약/키워드: ITS region sequence

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도열병균(Magnaporthe grisea)의 Ribosomal DNA의 ITS II 부위 핵산 염기서열을 이용한 균주간 근연관계 비교 (Comparison of Relationships in Infraspecies of Magnaporthe grisea Using DNA Sequence of Internal Transcribed Spacer II Region in Ribosomal DNA)

  • 배신철;이신우;이인구;예완해;류진창
    • 한국식물병리학회지
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    • 제12권1호
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    • pp.91-98
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    • 1996
  • 벼도열병균 14개 균주와 벼 이외 화본과 식물 도열병균 12개 균주를 대상으로 rDNA의 ITS II 부위를 증폭하여 그들의 핵산 구조 차이를 분석함으로 도열병균 균주간 분류를 시도하였다. 5.8S rDNA의 3`-말단 부위와 28S rDNA의 5`-말단 부위의 sequence 중 5`-CCCGGGAATTCGCATCGATCGATCGAATGAAGA-ACGCAGC-3`와 5`-CCCGGGATCCTCCGCTTATT-GATATGC-3`를 이용하여 PCR 증폭을 하였을 때 벼도열병균 14개 균주는 동일한 길이의 단일 밴드를 형성하였으며 벼 이외 화본과 식물 도열병균에서는 레드톱 식물로부터 분리한 도열병균만이 나머지 균주보다 38bp가 더 큰 길이를 가진 밴드를 형성하였다. PCR로 증폭된 DNA를 HaeIII와 MspI 제한효소로 절단하였을 때 벼도열병균 레이스간에는 제한효소 절단에 의한 전기영동 밴드 형태 차이를 관찰할 수 없었으나, 벼 이외 화본과 식물 도열병균 12개 균주는 3군으로 구분할 수 있었다. 벼도열병균 90=054와 강아지풀에서 분리한 도열병균 G90-5, 기장에서 분리한 G88-4, 바랭이에서 분리한 G88-5 그리고 레드톱에서 분리한 RT 균주의 ITS II 부위의 DNA 염기서열 비교 분석에 의하면 G88-4와는 다른 HaeIII와 MspI 제한효소 위치를 가지고 있었기에 제한효소 절단에 의한 전기영동 형태가 상이하였다. 또한 RT균주는 HaeIII와 MspI위치가 존재하지 않았다.

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PCR-RFLP and Sequence Analysis of the rDNA ITS Region in the Fusarium spp.

  • Min, Byung-Re;Lee, Young-Mi;Choi, Yong-Keel
    • Journal of Microbiology
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    • 제38권2호
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    • pp.66-73
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    • 2000
  • To investigate the genetic relationship among 12 species belonging to the Fusarium section Martiella, Dlaminia, Gibbosum, Arthrosporiella, Liseola and Elegans, the internal transcribed spacer(ITS) regions of ribosomal DNA (rDNA) were amplified with primer pITS1 and pITS4 using the polymerase chain reaction(PCR). After the amplified products were digested with 7 restriction enzymes, restriction fragment length polymorphism (RFLP) patterns were analyzed. The partial nucleotide sequences of the ITS region were determined and compared. Little variation was observed in the size of the amplified product having sizes of 550bp or 570bp. Based on the RFLP analysis, the 12 species studied were divided into 5 RFLP types. In particular, strains belonging to the section Martiella were separated into three RFLP types. Interestingly, the RFLP type of F. solani f. sp. piperis was identical with that of isolates belonging to the section Elegans. In the dendrogram derived from RFLP analysis of the ITS region, the Fusarium spp. examined were divided into two major groups. In general, section Martiella excluding F. solani f. sp. piperis showed relatively low similarity with the other section. The dendrogram based on the sequencing analysis of the ITS2 region also gave the same results as that of the RFLP analysis. As expected, 5.8S, a coding region, was highly conserved, whereas the ITS2 region was more variable and informative. The difference in the ITS2 region between the length of F. solani and its formae speciales excluding F. solani f. sp. piperis and that of other species was caused by the insertion/deletion of nucleotides in positions 143-148 and 179-192.

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Complete Chloroplast Genome Sequence of Korean Endermic Species, Pseudostellaria longipedicellata

  • Kim, Yongsung;Heo, Kyeong-In;Lee, Sangtae;Park, Jongsun
    • 한국자원식물학회:학술대회논문집
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    • 한국자원식물학회 2018년도 춘계학술발표회
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    • pp.40-40
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    • 2018
  • Pseudostellaria Pax (Caryophyllaceae) is a small genus distributed in temperate region. It consists of 25 species presenting high diversity in Asia. Pseudostellaria longipedicellata S. Lee, K. Heo & S. C. Kim was first announced as new species in 2012. Morphological characters of P. longipedicellata are closely related to those of Psedusotellaria palibiniana and Psedusotellaria okmotoi. These are distinguished from P. longipedicellata by shorter pedicel and puberulent pedicels, respectively and by being distributed allopatically between P. longipedicellata and rest of species. The complete chloroplast genome of P. longipedicellata was successfully rescued from raw reads generated by HiSeq2000. Its total length is 149,626 bp consisting of four regions: large single copy (LSC) region (81,292 bp), small single copy (SSC) region (16,984bp), and inverted repeats (IRs; 25,765 bp per each). It contained 126 genes (81 coding DNA sequence (CDS), eight rRNAs, and 37 tRNAs); 18 genes (seven CDS, four rRNAs, and seven tRNAs) are duplicated in inverted repeat regions. The overall GC content of P. longipedicellata is 36.5% and in the LSC, SSC, and IR regions were 34.3%, 29.3%, and 42.4%, respectively. Based on phylogenetic analysis of chloroplast genomes of P. longipedicellata and relatives species presents clear phylogenetic positions of Pseudostellaria genus. This chloroplast genome will be an important sequence resources for further researches of Pseudostellaria genus.

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Staphylococcus aureus DH1에서 분리된 R-plasmid pSBK203의 복제조절 유전자 cop의 Cloning, 염기서열 결정 및 상동성 분석 (Cloning, Base Sequence Determination and Homology Analysis of Replication Controlling cop Gene of R-plasmid pSBK203 Isolated from Staphylococcus aureus DHI)

  • 박승문;변우현
    • 미생물학회지
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    • 제32권2호
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    • pp.115-119
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    • 1994
  • Staphylococcus aureus DH1에서 분리된 R-plasmid pSBK203상의 복제개시 인자인 rep 유전자산물의 발현이 어떻게 조절되는가를 밝히기 위해 관련 부위를 확인하고 cloning한 후 그 염기서열을 결정하였으며 이를 같은 계열에 속하는 pT181족 plasmid들의 서열과 그 상동성을 비교 분석하였다. 복제 조절 관련 부위에 염기 삽입 및 염기 결손을 유도함으로써 얻어진 변이체들의 copy수를 측정하여 그 복제 조절 기능에 초래된 변화를 확인하였다.

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rDNA의 ITS II 부위의 염기서열분석에 의한 느타리버섯 종간의 근연관계 (Phylogenetic Relationships Among Pleurotus species Inferred from Sequence Data of PCR Amplified ITS II Region in Ribosomal DNA)

  • 배신철;성기영;이신우;고승주;은무영;이인구
    • 한국균학회지
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    • 제24권2호통권77호
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    • pp.155-165
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    • 1996
  • 느타리 버섯속 6종 23균주에 대한 rDNA의 ITS II 부위의 DNA 염기서 열을 비교 분석함으로서 종간 및 종내의 근연관계를 조사하였다. rDNA의 ITS II 부위를 증폭하고자 5.8S rDNA의 3'말단 부위와 285 rDNA의 5'말단 부위에 두개 프라이머를 이용하여 PCR증폭을 행하였다. 느타리버섯 6종의 게놈 DNA로 부터 ITS II 부위를 증폭한 결과 종에 따라 밴드 길이에 차이가 있었으며 ITS II 부위의 길이 차이로 느타리 버섯 6종을 구분할 수 있었다. 같은 종내 개체간 구분을 위하여 느타리 버섯 6종 23균주의 PCR 증폭 결과는 느타리버섯(P. ostreatus) ASI 2096, ASI 2025와 노랑 느타리 버섯(P. cornucopiae) ASI 2038 균주외에 동일 종내 균주의 ITS II 길이는 동일한 양상을 보였다. 느타리 버섯 6종 및 ASI 2095, ASI 2025 그리고 ASI 2038에 대한 ITS II 부위의 염기서열을 비교해 보면 염기서열의 변이가 ITS II 부위가 시작되는 부분과 말단 부분에서 주로 존재하였다. ASI 2095와 ASI 2025 균주들은 동일 종내 느타리 버섯(P. ostreatus, ASI 2001) 균주와 ASI 2038와 ITS II 부위의 DNA 염기서열에 차이를 보였다. 이들 염기서열을 기초로 하여 Neighbor program을 이용한 균주간 유연관계는 느타리 버섯(P. ostreatus), 사철 느타리 버섯(P. florida), 여름 느타리 버섯(P. cornucopiae) 그리고 맛 느타리 버섯(P. eryngii)들이, 노랑 느타리 버섯(P. cornucopiae)과 호고 느타리 버섯(P. cystidious)이 각각 서로 가까운 유연관계를 나타내었으나 ASI 2025와 ASI 2038 균주 들은 특이한 계통분지를 나타내었다.

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ITS 염기서열분석에 의한 한국산, 중국산 및 러시아산 가시오갈피의 유연관계 분석 (Comparative Analysis of Acanthopanax senticosus Harms from Korea, China and Russia Based on the ITS Sequences of Nuclear Ribosomal DNA)

  • 한효심;김두영;이갑연;박완근;조인경;정재성
    • 한국자원식물학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.54-58
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    • 2006
  • 한국, 중국, 러시아에서 자생하고 있는 가시오갈피에 대한 유전적 유연관계를 파악하기 위해 ITS (internal transcribed spacer)의 염기서열을 분석하였다. Universal primer를 사용하여 PCR로 증폭시킨 후 염기서열을 결정한 결과 ITS의 길이는 162 bp의 5.8S rRNA 유전자를 포함하여 한국산과 중국산은 608 bp 그리고 러시아산은 611 bp로 나타났다. ITS영역의 G+C 함량은 한국산과 중국산이 60.20%이고 러시아산이 60.06%였다. 한국산과 중국산의 ITS영역은 100% 동일하였으며, 러시아산은 한국산과 비교했을 때 3 bp의 염기삽입과 2 bp의 염기치환이 존재하여 99.2%의 상동성을 나타내었다. 따라서 한국산 가시오갈피는 러시아산보다 중국산과 유전적 유연관계가 더 가까운 것으로 추정된다. 또한 동일 속내에서는 오갈피나무보다는 음나무와 ITS 염기서열이 유사한 것으로 나타났다.

버섯에서 분리한 형광성 Pseudomonas spp. 의 ITS I 영역 분석에 의한 계통 분류 (Phylogeneitc Analysis of Fluorescent Pseudomonas spp. Isolated from the Cultivated Mushrooms on the Basis of ITS I Region)

  • 고승주;고승주;강희완;전명숙;류진창
    • 한국식물병리학회지
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    • 제14권4호
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    • pp.350-357
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    • 1998
  • A total of 12 strains of fluorescent Pseudomonas isolated from the cultivated mushrooms such as Agaricus bisporus and Pleurotus ostreatus were collected. They consisted of pathogenic Pseudomonas spp. and epiphytic Pseudomonas spp. of the cultivated mushroom. To analyze the phylogenetic relationship of these strains, ITS I region, the 16S-23S intergenic spacer region in the ribosomal RNA (rRNA) operon, was cloned and sequenced. The spacer regions of these strains were 495∼527 nucleotides in length and contained the genes encoding isoleucine-tRNA (tRNAIle) and alanine-tRNA (tRNAAla). The reciprocal homologies of each ITS I sequence among these strains were in the range of 84.2%∼98.8%. According to the analysis of ITS I sequences, the fluorescent Pseudomonas spp. were phylogenetically classified into three clusters. Cluster I consisted of Pseudomonas fluorescens, P. tolaasii, P. gingeri’, and P.‘reactans’(WLRO). Cluster II comprised Pseudomonas fluorescens biovar C and F. Cluster III composed P. agarici. Cluster I and II could be classified into P. fluorescens complex. P. agarici formed an independent taxon clearly separable from P. florescens complex.

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Blastobotrys illinoisensis, an Unrecorded Anamorphic Yeast Strain Isolated from the Gut of the Earthworm Eisenia fetida

  • Ji Yun Son;Myung Kyum Kim
    • 한국균학회지
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    • 제50권4호
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    • pp.373-381
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    • 2022
  • Strain E4, an unrecorded species of dimorphic fungi, was isolated from the gut of earthworms collected in Gyeonggi Province, South Korea. Nucleotide sequence analysis of the D1/D2 region of the large subunit (LSU) rRNA gene and the internal transcribed spacer (ITS) region revealed that this species is a member of the genus Blastobotrys, Blastobotrys illinoisensis. Strain E4 differed from its closest known species, B. mokoenaii and B. malaysiensis, by harboring 3-5 and 12-14 nucleotide substitutions in the D1/D2 and ITS regions, respectively. Phylogenetic analysis based on concatenated sequences of the D1/D2 region of the LSU rRNA gene and the ITS region also indicated that strain E4 belongs to the Blastobotrys clade and is distinct from other related species in the clade. The previously unreported isolate could be distinguished from closely related species by its inability to ferment carbon sources. To our knowledge, this is the first report on the isolation of Blastobotrys species from the gut of earthworms in Korea. The strain used was E4 (=KCTC 27831=JCM 33428).

개와 고양이 유래 피부사상균의 분자생물학적 계통 분석 (Molecular Phylogenetic Classification of Dermatophytes Isolated from Dogs and Cats)

  • 김두;정석영;안소저
    • 한국임상수의학회지
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    • 제23권4권
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    • pp.405-410
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    • 2006
  • 피부사상균증이 있는 개와 고양이에서 분리한 9주의 Microsporum canis와 5주의 Microsporum gypseum에서 ribosomal DNA를 추출하여 internal transcribed spacer 1 (ITS1) gene을 PCA로 증폭한 후 sequencing을 실시하여, 각 사상균의 계통학적 관계를 조사하였다. M canis 분리주 9주의 ITS1 gene의 nucleotide sequence는 100% 일치하였으며 M gypseum 분리주 5주의 nucleotide sequence도 100% 일치하였다. M canis 분리주 9주의 계통분석 결과 미국, 일본, 호주 및 유럽에서 분리된 M canis와 같은 cluster에 속하였으며 다른 Microsporum spp와는 유전적으로 다른 cluster를 형성하였다. 그러나 M canis와 M distortum, M equinum, M ferrugineum은 유전적으로 매우 가까운 위치에 있었다. M gypseum 분리주는 M canis와는 다른 cluster를 형성하였다. ITS1 gene의 분자생물학적 분석은 Microsporum spp를 확인하고 그들의 유전학적 관계를 이해하는 유용한 정보를 제공하는 것으로 생각된다.

Characterization of a Brown Rot Fungus Isolated from Dwarf Flowering Almond in Korea

  • Shim, Myoung-Yong;Jeon, Young-Jae;Kim, Seong-Hwan
    • Mycobiology
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    • 제35권1호
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    • pp.30-35
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    • 2007
  • The fruits showing brown rot symptom on dwarf flowering almond were found in Gongju, Chungchungnam-Do in Korea in July 2005. Small water-soaked lesions on the fruits were initiated, and gradually developed to soft rot covered with gray conidia. Then the diseased fruits were shrunk and became grayish-black mummies. A fungus was isolated from the diseased fruit and its morphological, cultural and molecular genetic characteristics were investigated. Typical blastospores of Monilinia spp. were observed under a light microscope both from tissues of the diseased fruits and from PDA-grown cultures. The fungus grew well at $25^{\circ}C$ and on PDA. The ITS ribosomal DNA region (650 bp) of the fungus was amplified by PCR and analyzed. Comparative data on ITS sequence homology among Monilinia spp., ITS sequence-based phylogram and morphological characteristics showed that the fungus is Monilinia fructicola. This is the first report on Monilinia fructicola causing brown rot on fruits of dwarf flowering almond in Korea.