We examined nrDNA ITS sequences from 16 taxa of Polygonum sect. Persicaria(Polygonaceae) in Korea to infer relationships among the taxa within the section. A neighbor-joining tree obtained from the analysis of the ITS sequences suggest that the ITS region was useful inferring the phylogenetic relationships among the taxa. The neighbor-joining tree indicates that P.amphibium is clearly separated from the other Korean taxa. The tree also reveals the presence of five major groups in the Korean taxa of the section; 1) P. lapathifolium var. lapathifolium, 2) P. persicaria and P. viscoferum, 3) P. orientale and P. viscosum, 4) P. japonicum and 5) a group including the remaining taxa. these relationships depicted on the ITS tree are largely congruent with those inferred from morphological and anatomical characters.
Zoysiagrasses are important turf plants used for school playgrounds, parks, golf courses, and sports fields. The two most popular zoysiagrass species are Zoysia japonica and Zoysia sinica. These are widely distributed across different growing zones and are morphologically distinguishable from each other; however, it is phenotypically difficult to differentiate those that grow along the coastal line from those in beach area habitats. A combination of morphological and molecular approaches is desirable to efficiently identify these two plant cultivars. In this study, we used a rapid identification system based on DNA barcoding of the nrDNA-internal transcribed spacer (ITS) regions. The nrDNA-ITS regions of ITS1, 5.8S nrDNA, and ITS2 from Z. japonica, Z. sinica, Agrostis stolonifera, and Poa pratensis were DNA barcoded to classify these grasses according to their molecular identities. The nrDNA-ITS sequences of these species were found at 686 bp, 687 bp, 683 bp, and 681 bp, respectively. The size of ITS1 ranged from 248 to 249 bp, while ITS2 ranged from 270 to 274 bp. The 5.8S coding region ranged from 163 - 164bp. Between Z. japonica and Z. sinica, nineteen (2.8%) nucleotide sites were variable, and the G+C content of the ITS region ranged from 55.4 to 63.3%. Substitutions and insert/deletion (indel) sites in the nrDNA-ITS sequence of Z. japonica and Z. sinica were converted to cleaved amplified polymorphic sequence (CAPS) markers, and applied to the Zoysia grasses sampled to verify the presence of these markers. Among the 62 control and collected grass samples, we classified three groups: 36 Z. japonica, 22 Z. sinica, and 4 Z. japonica/Z. sinica hybrids. Morphological classification revealed only two groups; Z. japonica and Z. sinica. Our results suggest that used of the nrDNA-ITS barcode region and CAPS markers can be used to distinguish between Z. japonica and Z. sinica at the species level.
ITS DNA sequences from five individuals, representative of five groups designated according to the degree of leaf teeth and lobes from simple to palmate compound leaf in the Viola albida complex, established and further analysed in order to solve the taxonomic difficulty. A total 702 bp was sequenced at the 5.8S ribosomal DNA and internal transcribed spacer 1 and 2. The 5.8S coding region is 163 bp, and has no sequence variations. The ITS1 and ITS2 noncoding regions have a little bit sequence variations, and those were further analysed by the methods of the analysis of variance (ANOVA), the analysis of sequence divergence and the phylogenetic analysis. The result of ANOVA showed no significant differences among individuals investigated. The analysis of sequence divergence with Kimura 2-parameter distance revealed that in-groups showed much less than 0.05 in absolute value among individuals, while two out groups more than 0.05, V. grypoceras and V. orientalis. This result appeared that the sequence divergence among in-groups was not yet occurred in the species level but situated at somewhere below the species level. In the phylogenetic analysis, two outgroups formed the basal clades in order. Five individuals in-groups formed a clade. The clade was, however, not very robust as around 50% in bootstrap value, suggesting that this result was not meaningful in the phylogenetic point of views.
The taxonomy of umbel genus Sium L., Apiaceae in Korea was reviewed on the basis of molecular phylogenies derived from sequences of nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer (ITS) regions. The ITS sequence-derived phylogeny indicates that S. heterophyllum, endemic to Korea, is identical to S. tenue, which is known as endemic to Ussuri regions. Comparisons of sequence pairs across both spacer regions gave divergence values and revealed the identity between S. tenue and S. heterophyllum on Mt. Moonsoo. On the other hand, the ITS sequences support species delimitation of S. ternifolium, as reported recently as a new species that differs from other Sium species. The ITS sequence divergence values of 1.4 and 1.6% support species delimitation between S. serra and S. ternifolium.
Phylogenetic positions of Sedirea and Neofinetia were addressed using the chloroplast matK and the nuclear ITS sequences. We also evaluate the usefulness of the makers for the identification of species and localities. Sedirea and Neofinetia form an independent monophyletic genus, respectively, in both matK and nuclear ITS trees. The sister genus of the Neofinetia was Vanda in both trees. In addition, our trees support the separate recognition of the Neofinetia from Vanda rather than the inclusion of Neofinetia into Vanda. The sister group of the Sedirea was (Dimorphorchis(Pteroceras(Saccolabiun+Phalaeonopsis))) clade. The Dimorphorchis was one of the most probable sister genus to the Sedirea. The sister group relationship between Sedirea and Aerides was suggested by their similar morphology, but not supported in molecular trees. The identification of species and localities of Neofinetia was possible using our two molecular markers. However, several pseudo-gene sequences are discovered from the public data base. In addition, the horizontal gene transfer of chloroplast genomes is frequent events in orchid hybrids. Therefore, we need a careful evaluation for the data prior to systematic use. Generation of sequence data from multiple accessions of a species may helpful to reduce these types of error.
Taxa of Artemisia collected in Korea were constructed by molecular phylogenetic analysis based on the internal transcribed spacer(ITS) regions of nrDNA. The length of the ITS sequences aligned using the clustal X program was 636~643 bp, and the lengths of the ITS1 and ITS2 regions were 251~255 bp and 217~222 bp, respectively. The total number of variable sites was 95 for the entire sequence, and a parsimony- informative site represented an efficacious site in ITS1 rather than in ITS2. The maximum parsimony tree as calculated by the MEGA 4 program was clustered into five clades. The taxa(A. capillaris, A. japonica var. japonica, A. japonica var. hallaisanensis, A. japonica subsp. littoricora) degenerated ovary of clade 1 was supported as the subgenus Dracunculus by Ling's classification system. The results show that A. nakaii and A. fukudo were quite similar genetically(Boostrap 99%) and that the scientific name of Korean A. dubia should be reconsidered. A. sp. distributed in Ganghwa province was grouped with A. argyi(Boostrap 89%). These results suggest that the molecular techniques used in this study could be useful for the phylogenetic analysis of Korean Artemisia herbs having variations in their morphological characteristics.
Morphological and molecular data from the nuclear ribosomal ITS regions were examined to reevaluate the taxonomic position of the Korean endemic species, Stewartia koreana Nakai ex Rehder (Theaceae). Comparing to its morphologically closely related S. pseudocamellia Maxim, S. koreana has diagnostic characters including a larger leaf blade (10 cm length and 5.5 cm wide) and a longer pedicel (2.5 cm length). In addition, S. koreana formed a different clade from S. pseudocamellia in the ITS trees. The morphological and ITS sequence data supported S. koreana as a Korean endemic species distinct from the closely related species, S. pseudocamellia.
Several isolates were collected from apple, pepper, strawberry, cucumber and tomato having typical gray mold symptoms. All the isolates were identified as Botrytis cinerea by using morphological characteristics and PCR-RFLP method. It was difficult to analyze the phylogenetic relationship of these isolates by using ITS region, HSP60 and G3PDH because these genes were highly homologous in their nucleotide in inter-species of B. cinerea and intra-species of genus Botrytis. However, phylogenetic analysis using combined sequences (RPB2, HSP60 and G3PDH genes) clearly showed that all isolate of B. cinerea were different from Botrytis spp. Furthermore, it was also confirmed that strawberry isolate was distantly related to apple, pepper, cucumber and tomato isolates that were closely related to each other in nucleotide level.
Cowpea (Vigna unguiculata (L.) Walp.) is recognized as a potential source of protein and other nutrients. The genus Vigna includes 100 wild species of plants. Especially, Vigna unguiculata includes annual cowpeas (ssp. unguiculata) and ten wild perennial subspecies. DNA sequence of internal transcribed spacer (ITS) region was determined for Vigna sinensis, one of native plant, which was found in recent but thought to have gone extinct in Korea. The seeds of Vigna sinensis used in this study were donated from Dong-Young Jo. The DNA sequence of ITS-5.8S-ITS2 for Vigna sinensis obtained from this study was deposited as Vigna sinensis AY195581 on GenBank of NCBI (National Center for Biotechnology Information). We investigated the sequence-based phylogenetic relationships of plants related and clarified its taxonomical position. DNA similarities among subspecies including Vigna unguiculata showed the range 98 to 100% in sequence-based phylogenetic analysis using total 507 base pairs of ITS1, 5.8S and ITS2. Vigna unguiculata and subspecies were grouped independently as one cluster from other Vigna species used in the phylogenetic analysis. In this study, based on the phylogenetic analysis using the ITS1-5.8S-ITS2 sequence of Vigna sinensis, it may be concluded to be classified to one of Vigna unguiculata substrains.
한국산 미나리아재비속 미나리아재비(Acris Schur)절에 속하는 미나리아재비(Ranunculus japonicus)와 근연종인 산미나리아재비(R. acris var. nipponicus) 및 바위미나리아재비(R. crucilobus)의 실체와 분류학적 한계를 파악하기위해 속, 종간 규명에 많이 이용하고 있는 핵리보좀(ribosomal) DNA의 internal transcribed spacer 구간의 염기서열을 분석하였다. 본 연구는 6개의 군외군을 포함하여 총 18개의 DNA 재료(accessions)의 정열된 염기서열들을 바탕으로 bootsrap을 포함한 maximum parsimony와 maximum likelihood 분석법에 의한 계통수로 평가하였다. 연구 결과 Acris절에 속하는 미나리아재비, 산미나리아재비 및 바위미나리아재비는 단계통군으로 나타났으며 특히 미나리아재비(R. japonicus)와 산미나리아재비(R. acris var. nipponicus)는 같은 분계조를 형성하였다. 이와 달리 바위미나리아재비는 미나리아재비와 산미나리아재비에서 분지된 결과를 보여, 한라산 해발 1500m이상의 높은 지역에 분포하는 바위미나리아재비는 미나리아재비의 아종(R. japonicus Thunb. subsp. chrysotrichus (Nakai) Y. N. Lee, comb. nud.)으로 처리하기보다는, 독립된 고유종인 R. crucilobus H. L$\acute{e}$v.으로의 처리를 지지하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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