본 연구는 쑥 추출물의 항염 활성이 prostaglandins 합성의 저해 및 pro-inflammatory cytokine의 억제기전과 관련이 있을 것으로 예상되어짐에 따라, 큰비쑥(A. fukudo)을 대상으로 80% EtOH로 추출하고 추출물을 극성에 따라 용매분획을 실시하여, 큰비쑥 에탄올 추출물 및 용매분획물들이 염증반응의 주체가 되는 대식 세포 계열인 RAW 264.7 세포에서 LPS 로 유도된 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$ 그리고 IL-6와 같은 pro-inflammatory cytokine과 NO의 생성억제효과, 그리고 iNOS와 COX-2의 단백질 발현 억제효과 및 $PGE_{2}$ 생성 억제효과 등을 통해 알아보았다. 대식세포 계열인 RAW 264.7 세포에 LPS로 자극을 주고 큰비쑥 추출물을 처리하여 확인해본 결과, 추출물 및 분획물들이 다소 차이는 있었지만 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$ 그리고 IL-6에서 생성억제 효과를 나타났다. 또한 헥산, 디클로로메탄 및 에틸아세테이트 분획물에서 NO의 생성억제 효과가 강하게 나타났으며, 헥산과 디클로로메탄 분획물에서는 iNOS, COX-2 및 $PGE_{2}$ 생성 억제 효과가 다른 분획물에 비해 강하게 나타났다. 이러한 결과는 큰비쑥에서 유효성분 추출을 통한 항염증 물질의 연구 또는 예방하거나 치료할 수 있는 염증 억제 성분의 분리 및 그 작용기전 연구에 중요한 기초 자료가 될 것이라 사료된다. 또한 큰비쑥 추출물로부터 염증억제 성분을 도출하고자 활성분획인 헥산과 디클로로메탄 분획물에 대하여 활성성분의 분리가 진행 중이다.
The inhibitory effect of Chung-Jang-Hwan (C-mix) consisted of Geranium nepalense subsp. thunbergii, Saururus chinensis, and Rubus coreanus were investigated in dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitic mice by microarray analysis. Treatment with Cmix improved colitic symptoms, including colon shortening and myeloperoxidase activity. Treatment with DSS alone upregulated the expression levels of inflammation-related genes, including IL-$1\beta$, IL-6, CCL2, CCL4, CCL5, CCL7, CCL8, CCL24, CXCL1, CXCL2, CXCL5, CXCL9 and CXCL10, and other colitis-related genes such as COX-2, PAP, MMP family, S100a8, S100a9 and DEFA1 in mice. However, treatment with C-mix inhibited the expression levels of inflammation-associated genes induced by DSS. The increased expression levels of COX-2 and IL-$1\beta$, representative inflammatory genes, were confirmed by a quantitative realtime polymerase chain reaction analysis. These results indicate that C-mix may ameliorate colitis by the inhibitory regulation of inflammation-associated genes.
Purpose : This study was carried out to investigate the effects of Gagamdokhwalgisang-Tang on the morphometric changes of femur, and on the hormones and cytokines associated with bone metabolism in overiectomized rats. Methods : Twenty-four female Sprague-Dawley rats were divided into sham operated group(normal) ovariectomized group(control), and treated with extract of GD group(treated). Each group was evaluated the changes of body weight at 0, 3, 6, 8 weeks after ovariectomy. Morphometric analysis(femur weight, femur/body weight ratio, femur ash weight femur ash/body weight ratio cross sectional area of compact bone and concellous bone of femur) and histopathological examination were performed at 8 weeks after ovariectomy. Estrogen, Alkaline Phosphatase(ALP) and cytokine(Tumor necrosis $factor-{\alpha}$, $Interleukin-l{\beta}$, Inerleukin-6) assay were performed at 8 weeks after ovariectomy. Results : 1. The body weight of control and treated group was significantly increased(p<<0.001) compared with the normal group at 8 weeks. 2. The femur weight and femur/body weight ratio of treated group were significantly increased(p<<0.05, p<<0.01) compared with the control group at 8 weeks. 3. The femur ash weight showed no significantly different changes, but femur ash/body weight ratio of treated group was significantly increased(p<<0.05) compared with the control group at 8 weeks. 4. In the cross sectional area of cancellous bone of femoral body, the treated group was significantly increased(p<<0.001) compared with the control group at 8 weeks. 5. The serum estrogen level of treated group showed no significantly different changes compared with the control group at 8 weeks. 6. The serum ALP activity of treated group was significantly decreased(p<<0.01) compared with the control group at 8 weeks. 7. The serum Tumor necrosis $factor-{\alpha}(TNF-{\alpha})$ level of treated group was significantly decreased(p<<0.05) compared with the control group at 8 weeks. 8. The serum $Interleukin-l{\beta}(IL-1{\beta})$ level of treated group was significantly decreased(n<<0.001) compared with the control group at 8 weeks. 9. The serum Interleukin-6(IL-6) level of treated group was significantly decreased(P<<0.01)compared with the control group at 8 weeks. Conclusion : These results indicate that GD inhibits bone resorption in ovariectomized rats. And the major inhibitory mechanism may be related to the inhibitory effects of GD on the secretion of $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$ and IL-6 in the pathogenesis of osteoporosis in estrogen deficient rats.
본연구는 콜라비 추출물의 항산화 및 항염 효능을 조사하기 위하여 수행하였다. 콜라비는 70% 에탄올을 이용하여 조추출한 후 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올을 이용하여 용매 극성에 따라 순차적으로 분획하였다. 항산화 활성은 총폴리페놀 함량 측정과 ABTS 라디칼 소거활성을 측정하여 평가하였다. 에틸아세테이트 분획물이 총폴리페놀 함량($27.33{\pm}0.26mg\;GAE/g$)과 ABTS 라디칼 소거활성($IC_{50}\;172.9{\pm}1.6{\mu}g/mL$)이 가장 높게 측정되었다. 항염 활성은 RAW 264.7 세포를 이용하였으며, 에틸아세테이트 분획물이 가장 높은 항염 활성을 보였다. 에틸아세테이트 분획물의 LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에서 전염증성 매개인자들에 대한 저해효과를 농도별로 측정하여 확인하였다. 콜라비 에틸아세테이트 분획물은 NO, $PGE_2$ 생성과 iNOS와 COX-2 및 TNF-${\alpha}$, IL-6, IL-$1{\beta}$와 같은 전염증성 사이토카인들의 단백질 발현을 농도의존적으로 저해하였다. 이러한 결과들은 콜라비가 항산화 및 항염 효능을 가지는 소재로서의 개발 가능성이 있음을 시사한다.
These days there is a constant possibility of exposure to UV radiation which can cause abnormal production of melanin and result in skin disease such as hyperpigmentation and melanoma. Many materials were investigated for skin whitening and protection against UV radiation. In this study, we assessed the melanogenesis inhibitory activities of Korean Red Ginseng (KRG, Ginseng Radix Rubra) and Ginkgo (EGb 761 Ginkgo Biloba) in an attempt to develop a new skin whitening agent derived from natural products. B16F10 melanoma cells were treated for 48 hr with KRG and EGb 761. The inhibitory effect on melanogenesis was measured and related cytokines and proteins expression were also investigated by RT-PCR and Western blotting. In addition, we also assessed the effects of these substances on the skin of C57BL/6 mice. Cell growth, melanin content and tyrosinase activity were inhibited effectively in B16F10 melanoma cells treated with KRG and EGb 761. Moreover, tyrosinase mRNA expression was inhibited clearly and melanogenesis related proteins (MRPs) containing tyrosinase, TRP1 and TRP2 were also reduced by KRG and EGb761, while cytokines such as IL-$1{\beta}$ and IL-6 were induced. In the case of UV irradiated mice, we observed induction of cytokine mRNA levels and reduction of MRPs mRNA expression. In addition, a decrease in pigmentation from treatment with KRG and EGb 761 on the skin of mice was observed. These results indicate that KRG and EGb 761 inhibit melanogenesis in B16F10 cells and have display protective activities against UVB. Therefore, we suggest that KRG and EGb 761 are good candidates to be used as whitening agents and UVB protectors for the skin.
Objectives : YangHyulEum Gami-Bang(YHEG) is a hair care extracts which is composed of fourteen plant extracts used in oriental medicine. The purpose of this study is to investigate the effect of YangHyulEum Gami-Bang(YHEG) on the alopecia and hair growth.Methods & Results : The herbal extracts from YangHyulEum Gami-Bang(YHEG) was tested using in vivo and in vitro test models. 1. The YHEG extracts showed effect on the DNA proliferation of the hair dermal papilla cells measured by [3H]thymidine incorporation. 2. YHEG showed promoting on the expression of growth factors such as IGF-1, KGF-1 and inhibiting on the expression of inhibitory hair growth factor such as TGF-β1, BMP-2 estimated by qPCR. 3. The YHEG extracts showed effect on the activation of β-catenin in the dermal papilla cells. 4. YHEG showed inhibitory effects of NO synthesis at 0.2% concentrations. 5. YHEG showed effects in the expression of IL-1β, TNF-α, IL-6, COX-2 and iNOS gene in the LPS stimulated RAW 264.7 cells. 6. The hair growth index of the YHEG extracts ranked at over 2 when compared to control group which was ranked at 0. 7. The hair follicle number, length and size of the experimental group were remarkably higher than the control group in the histological observation.Conclusions : These results suggest that YangHyulEum Gami-Bang(YHEG) has hair growth promoting activity and it can be used as a potent treatment agent for preventing hair loss and stimulating hair growth for treatment of alopecia.
The purpose of this study was to examine the effects of Angelica gigas Nakai on ulcerative colitis. Mice were divided into 5 groups: Control group, DSS group, 5-ASA group, 50mg/kg Angelica gigas Nakai group, 100mg/kg Angelica gigas Nakai group. Four groups, excluding the control group, were fed a 5% solution of dextran sulfate sodium(DSS) in water for 7days to induce ulcerative colitis. Each water extract was administrated orally for 7 days in 5-ASA group, 50mg/kg Angelica gigas Nakai group and 100mg/kg Angelica gigas Nakai group. 5 groups were evaluated by weight, length of intestine, weight of spleen, disease activity index(DAI), amount of cytokine IL-6 production, thickness of bowel wall and degree of inflammatory cell infiltration and intestinal tissue damage. Comparing to DSS group, 100 mg/kg Angelica gigas Nakai group showed significant suppressive effect of weight loss until 4th day of experiment while 50 mg/kg Angelica gigas Nakai group showed no significant effect of suppression. Decrease of intestinal length, enlargement of spleen, intestinal tissue damage and thickening of bowel wall were significantly suppressed in both 50 mg/kg and 100mg/kg Angelica gigas Nakai group. Also disease activity and cytokine IL-6 production were inhibited significantly. Based on this result, Angelica gigas Nakai seemed to have anti-inflammatory effect and also seemed to suppress histological changes and aggravation of ulcerative colitis.
Coumaroyl dipeptide amide, Coumaric acid-LG-$NH_2$, was prepared successfully using the solid-phase method, and its efficacy as a skin whitening agent was studied. Coumaric acid-LG-$NH_2$ was prepared with Rink-amide resin, and 96.354% of purity was obtained. Using MTT assay and LDH release assay, we found that it exhibited very low cytotoxicity. And, we found that Coumaric acid-LG-$NH_2$ inhibited tyrosinase activity dose-dependently and showed superior tyrosinase inhibitory activity to well-known whitening agent, arbutin. $IC_{50}$ value of Coumaric acid-LG-$NH_2$ was 182.4 ${\mu}M$, and $IC_{50}$ value of arbutin was 384.6 ${\mu}M$. Also, in measurement of melanin contents using B16F1 melanoma cell lines, Coumaric acid-LG-$NH_2$ reduced melanin production induced by ${\alpha}$-MSH statistically significant, and showed superior melanin inhibitory activity to p-coumaric acid or arbutin. In addition, Coumaric acid-LG-$NH_2$ reduced MC1R mRNA expression level. Thus, we concluded that MC1R pathway is the significant pathway of Coumaric acid-LG-$NH_2$, and Coumaric acid-LG-$NH_2$ has great potential to be used as novel whitening agents.
Jakyaktang(芍藥湯; JYT) exhibits potent anti-inflammatory activity in widely intestinal disease, but its mechanism was undisclosed. To elucidate the molecular mechanisms of JYT on pharmacological and biochemical actions in inflammation, we examined the effect of JYT on pro-inflammatory mediators in phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) plus A23187-induced mast cell and lipopolysaccharide (LPS)-stimulated macrophages. The investigation focused on whether JYT inhibited pro-inflammatory cytokines such as interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8), tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) in PMA plus A23187- induced HMC-1 cells and inflammatory madiators such as nitric oxide (NO), TNF-${\alpha}$, IL-6, iNOS, COX-2 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. We found that JYT inhibited LPS-induced NO, TNF-${\alpha}$ and IL-6 productions as well as the expressions of iNOS and COX-2. These results suggest that JYT has inhibitory effects on mast cell-mediated and macropage-mediated inflammation.
Methods: Intravenous administration of Platycodon grandiflorum was performed 2 days before tumor inoculation, then mice were killed 14 days after tumor inoculation, then number of tumor colonies were counted. Methanol extracts of Platycodon grandiflorum was added to colon26-M3.1 carcinoma cells, L5178Y-R lymphoma cells and Hela cells, and then cell growth was counted. To observe the immunomodulating effects of Platycodon grandiflorum, production of IL-6, IL-10, IL-12 and TNF-$\alpha$ were measured with ELISA assay and the cell growth of macrophage were also counted. Furthermore, antimetastatic experiment after depletion NK cells by injection of anti-asialo GM1 serum was also administered. Results: Intravenous administration of Platycodon grandiflorum significantly inhibited metastasis of colon26-M3.1 carcinoma cells. In an in vitro cytotoxicity analysis, Platycodon grandiflorum affected tumor cell growth above specific concentration. As compared with control, the production of IL-6, IL-10, IL-12 and TNF-$\alpha$ were incresed. And depletion NK cell completly abolished the inhibitory effect of metastasis. Conclusion: Platycodon grandiflorum appears to have considerable activity on immunomodulating effects and inhibit the metastasis of tumor. Further evaluation is needed for settling this.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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