• 미생물학회지
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• 제12권3호
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• pp.101-114
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• 1974

The fine structure of HeLa cells treated with several mycotoxin-producing fungi (Aspergillus flavus ATCC 15517, Aspergillus parastiticus RIB 1037, Penicillium toxicarium RIB 4002, Penicillium cirinum SWU)238, Penicillium islandicum IFO 5235, Penicillium tadum IFO 5787 and Pencillium brunneum RIB 1172) has been examined and some details have been descried. The normal HeLa cell have numerous microvilli, large ovoid nucleus, pleomorphic mitochondria, electron-dense body, Golgi complex, mid-body and endoplasmic reticulum etc. Certain specific structural changes induced by culture filtrates of several mycotoxin-producing fungi have been noted. These alterations induced disappearance of Golgi complex, rER vacuolization, nucleolus attachment to the nuclear envelope nad appearance of certain vacuoles. There were not any changes by the treatment of culture filtrates of non-toxic fungi and only cell debris of some specimens can be observed by the injury of culture filtrates. The experimental animals treated with mycotoxin-producing fungi (Aspergillus flavus ATCC 15517, Aspergillus parasilicus RIB 1037, Penicillum citrinum SWU 238, Penicillium toxicarium RIB 4002, and Penicillium islandicum IFO 5235) were mal cells treated with culture filtrates.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제36권1호
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• pp.28-33
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• 2008

Streptomyces griseus trypsin (SGT)을 코드하는 sprT 유전자와 그 하류에 존재하는 두 개의 조절 유전자 rsgtR1 및 sgtR2를 동시에 갖고 있는 재조합 벡터 pWHM3-TR1R2를 S. lividans TK24 및 S. griseus IFO 13350에 도입하여, 트립신의 생산성을 더욱 증대시킬 수 있는 배지를 조사하였다. S. lividans TK24/pWHM3-TR1R2의 경우 배양 5일을 기준으로 R2YE에서 가장 높은 생산성(0.74 unit/mL)을 나타냈고, C5/L. (0.66 unit/mL), Livid (0.08 unit/mL), NDSK(0.06 unit/mL) 순으로 나타났다 S. griseus IFO 13350/pWHM3-TR1R2의 경우에는 전반적으로 배양 7일에 트립신 활성이 가장 높았으며, C5/L (1.518 unit/mL), R2YE(1.284 unit/mL), NDSK (0.932 unit/mL), Livid (0.295 unit/mL) 순으로 나타났다. S. griseus IFO 13350/pWHM3-TR1R2를 C5/L 배지에서 7일간 배양한 배양액으로부터 $25%{\sim}60%$ ammonium sulfate 침전, CM-sepharose 및 Sp-sepharose column chromatography를 통하여 트립신을 고순도로 정제할 수 있었다. 최종 purification fold는 6.5배, 순수 정제된 트립신의 specific activity는 69,252 unit/mg, 회수율은 1.4%이었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제37권9호
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• pp.1208-1213
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• 2008

콩 기질에 대한 홍국균의 접종 발효는 원료 콩에 함유된 GABA와 유리아미노산의 함량을 강화시키는 유효한 발효 기법으로 나타났다. 선별된 5가지 균주(M. pilosus IFO 480, M. anka IFO 873, M. kaoliang ATCC 592, M. purpurea IFO 482, M. kaling ATCC 598)로 발효시킨 홍국 발효콩은 비발효콩에 비해 GABA의 함량이 2배 이상 증가되는 것으로 나타났으며, 가장 활성이 강한 균은 Monascus pilosus IFO 480으로 나타났다. Monascus pilosus IFO 480으로 $30^{\circ}C$에서 30일간 발효시킨 홍국 발효콩의 발효기간 중 GABA(발효 20일)와 유리아미노산(발효 10일) 함량의 최대 변화는 비발효콩에 비해 각각 2.5배와 5.6배 증가되었다. 특히 발효 20일 경에 GABA의 생성량은 건조 발효콩 100 g당 78.5 mg으로 나타나 비발효콩의 31.5 mg에 비해 149% 증가된 것으로 비교되었다. 또한 홍국 발효콩에 함유된 필수아미노산의 함유율은 비발효콩에 비해 3.6배 증가되었으며 특히 threonine, leucine, lysine 등의 증가율은 비발효콩에 비해 $12{\sim}24$배까지 두드러져 홍국 발효콩은 이들 아미노산의 강화에 매우 유효한 발효기법으로 나타났다. 따라서 GABA와 필수아미노산의 함량이 강화된 홍국 발효콩은 다양한 약리학적 소재뿐 아니라 영양학적 소재류에서도 매우 활용가능성이 높은 복합기능성의 신소재로 평가할 수 있다.

• 한국식품과학회지
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• 제20권1호
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• pp.28-33
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• 1988

Rhodotorula marina IFO 0879의 균체생산과 균체 내 유지생산을 위한 최적배양조건에 관하여 조사하였다. 균체량과 유지생산량은 $30^{\circ}C$, pH $6.0{\sim}7.5$에서 최고량을 나타내었다. $30^{\circ}C$에서 8일간 진탕배양하는 동안 질소성분이 어느정도 소모되어 균체가 증식한 후 지방질의 생성이 시작되었으며, 이때 최대균체량은 9.82g/l이고 세포내 지방질은 효모균체에 대하여 최고 35.4%까지 축적하였다. 탄소원으로서 유당(乳糖)과 포도당을, 질소원으로서 ammonium sulfate를 사용하였을 때 균체량과 지방질 함량이 가장 많았다. 배양액의 질소농도가 높을수록 균체 지방함량은 감소하고 균체량이 증가하였으며, 농도가 낮을수록 반대로 되었다. 배양액에 주기적으로 당을 첨가했을 때 초기에는 균체량과 지방질생성량이 대조구보다 적었으나 후기에는 더 많았다. 생산된 지방질의 주지방산은 palmitic acid(20.3%), oleic acid(46.6%) 및 linoleic acid(16.2%)이었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제17권1호
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• pp.81-88
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• 2007

The sprC gene encodes Streptomyces griseus protease C (SGPC), a bacterial chymotrypsin-like serine protease. Because the published data on sprC was not complete, we cloned and analyzed a new DNA fragment spanning downstream to upstream of the sprC gene from S. griseus IFO13350. The cloned 2.3-kb DNA fragment was placed on a high-copy number plasmid and introduced into Streptomyces lividans TK24. Chymotrypsin activity of the transformant was 8.5 times higher than that of the control after 3 days of cultivation and stably maintained until 9 days of cultivation, which dearly indicated that the cloned 2.3-kb fragment contained the entire sprC gene with its own promoter. When the same construct was introduced in the S. griseus IFO13350 (wild strain) and its two mutant strains in the A-factor regulatory cascade, ${\Delta}adpA$ and HO1, the chymotrypsin activity increased fivefold only in the ${\Delta}adpA$ strain. Transcriptional analysis based on RT-PCR revealed that the sprC gene is normally transcribed in both strains; however, earlier transcription was observed in the wild strain compared with the ${\Delta}adpA$ strain. A gel mobility shift assay showed that the AdpA protein did not bind to the promoter region of sprC. All these data clearly indicate that the expression of sprC is not dependent on the AdpA protein, but is distinctly regulated from other chymotrypsin genes composing an AdpA regulon. Earlier morphological differentiation was observed in S. lividans TK24, and S. griseus IFO13350 and HO1, transformed with the expression vector. The transformant of S. griseus ${\Delta}adpA$ formed markedly larger colonies. Antisense repression of sprC resulted in severe decrease of chymotrypsin activity, down to one-third of the control, and delayed morphological differentiation. All these data suggest that SGPC is related to normal morphogenesis in S. griseus.

• Applied Biological Chemistry
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• 제31권4호
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• pp.376-381
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• 1988

Rhodotorula glutinis IFO 0559에 의한 transcinnamic acid와 암모니아로부터 L-Phenylalanine 생산의 최적 조건을 검토하였다. L-phenylalanine 생산은 반응액으로 200mM transcinnamic acid, 4M $NH_4OH$, 250mM$(NH_4)_2SO_4$, 0.005% cetylpyridiniurn chloride (pH 10.5), 50mg/m1건조균체를 사용하였을 때 최대 생산량을 나타내었다. 비수용성 유기용매중에서 petroleum ether가 가장 효과적인 유기용매이였으며 반응액에 50% 첨가시 가장 효과가 좋았다. 최적 반응조건하에서 12시간 반응후 L-phenylalanine이 21.19생성되었으며, 이때의 trans-cinnamic acid의 전환율은 63.9%이었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제33권1호
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• pp.164-169
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• 2004

최근 콜레스테롤 합성을 억제하는 효능을 가진 것으로 알려진 홍국균 대사생성물의 일종인 monacolin K를 이용한 건강식품의 개발에 대한 관심이 높아지고 있다. 이에 본 연구에서는 monacolin K를 이용한 건강식품의 개발을 위한 기초연구로 monacolin K의 생산 효율성을 높이고자 미동정된 1종의 홍국균을 포함해 29종의 홍국균을 수집하여 monacolin K를 대량생산하는 균주를 탐색하였다. 홍국은 PDA배지에서 배양한 흥국균을 침지ㆍ증자한 백미에 5%가 되도록 접종 후, 3$0^{\circ}C$에서 10일간 배양하여 제조하고 이를 건조, 분말로 하여 사용하였다. 그 결과 색소생성량이 많은M. purpureus ATCC 16457, M. puypureus IFO 32316, M. purpureus IFO 32228, M. kaoliang ATCC 46595, M. kaoliang ATCC 46596 등의 균체를 배양한 홍국에서 monacolin K 생성량도 높았다. 그러나 색소와 monacolin K 생산량은 미동정된 홍국균이 가장 많은 것으로 나타나 형태학적 관찰과 ITS 및 28S rRNA부분 유전자 염기서열분석을 실시한 결과, M. purpureus CBS 281.34인 것으로 동정되었다.

• KSBB Journal
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• 제10권2호
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• pp.131-136
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• 1995

본 실험에서는 인간 전과립 세포를 회분배양 조건 에서 10%의 혈청을 포함하는 배지로 배양하였다. 이 와같은 조건에서 세포의 비성장율은 0.374C1/day) 이고 세포내 존재하는 살균활성을 가진 목적 단백질 의 생산성은 0.435(mg/10' viable cells)으로 나타났 다. 세포내 존재하는 목척 단백질의 순수 분리를 위 해 sephadex G-75, sephadex G-100, Bio→Rex70 을 이용해 분리하였다. 정제된 목적 단백질은 감수성 균주, E. coli IFO 13168과 St. aureus IFO 3060 을 표준 균주로 살균 측정을 하였을 때, 기존의 항생 물질은 균주에 대해 40~701땅1m!에서 활성을 나타 낸 반면, 정제된 목적 단백질은 G(+)균(St. aureus IFO 3060)에서는 $0.5\mu\textrm{g}$/ml이고, G(-)균(E. coli IFO 13168)에서는 $0.4\mu\textrm{g}$/ml에서 살균 활성을 보였다. 따라서 AMF가 기존 항생물질보다 살균 활성이 강력한 단백질임을 알 수 있다. 해당 분자량을 측정 하기 위해 SDS-PAGE로 측정한 결과 약 15,000 Dalton의 분자량을 갖고 있음이 확인됐다.

• 한국식품과학회지
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• 제25권4호
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• pp.366-372
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• 1993

본 연구는 미림 제조시 미림의 품질을 높이기 위한 방법의 하나로 세포 원형질체의 융합체 의해 ACPase 활성이 높은 균주를 얻으려고 시도하였다. 돌연변이 방법으로 acid carboxypeptidase(ACPase) 활성이 높은 A. oryzae 9-12와 A. shirousamii IFO 6082-60을 선별하여 사용하였다. A. oryzae 9-12와 A. shirousamii IFO 608260의 원형질체의 형성조건은 chitinase (10mg/ml), cellulase(10mg/ml) 및 zymolase(20T(5mg/ml)등의 효소 혼합용액에서 $30^{\circ}C$에서 4시간 반응시켰을 때 가장 높았으며, pH6.0일 때, 안정제로서는 0.6M KCl 및 무기 염류로서는 0.01M $CaCl_2\;2H_2O$가 가장 높았고, 30% PEG 6,000이 가장 좋았다. 이때의 융합빈도는 0.71%였다. 융합주의 ACPase의 활성은 F-50이 20,800unit/g으로 변이주보다 1.4배 높았다.

• 공업화학
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• 제5권3호
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• pp.501-508
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• 1994

방출조절성 약제를 개발하기 위한 방법으로 1-ethyl-6-fluoro-1, 4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)quitoline-3-carboxylic acid의 $C_3$ 위치를 Vilsmeier reagent로 chlorination하여 이를 dextran과 반응시켜 1-ethyl-6-fluoro-1, 4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazlnyl) quinoline-3-carboxylic acid-dextran 중합체약을 합성하였다. 중합체약에 대한 최소발육저지농도(MICs)로서 Gram 양성세균 Bacillus subtillis ATCC 6633, Staphyloccus aureus ATCC 25923, Mycrobacterium phlei IFO 3158 및 Salmonella typhimurium KCTC 1925에 대해서 각각 $5{\mu}g/ml$의 농도로 균의 발육을 억제하였다. Micrococcus luteus ATCC 9341에 대해서는 $80{\mu}g/ml$로 약한 활성을 보였을 뿐, Gram 양성세균들에 대하여 전반적으로 강한 저항성을 보여주었다. Gram 음성세균인 Escherichia coli KCTC 1039, Escherichia coli ESS, Klebsiella puenmouiae KCTC 1560 및 Psendomonas aeruginosa IFO 13130 균주들에 대해서도 각각 $5{\mu}g/ml$로 대조물질과 유사한 항균성을 보여주었다. 한편, quinolone계 항균제가 진균류에 대하여 감수성을 보이지 않는 것처럼 중합체약도 진균인 Candida albicans ATCC 10231에 대해서는 감수성을 보여주지 않았다.