Jang, Young Se;Cui, Hai Yan;Lee, Eun Jung;Kim, Hae Won;Paek, Kee-Yoeup
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.20
no.6
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pp.479-486
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2012
The production of adventitious roots derived from root explant of Echinacea angustifolia and its secondary metabolite content were assessed in different types and levels of auxin. The induction of adventitious roots from root explant cultured in Murashige and Skoog solid medium supplemented with 1.0 mg/L indole -3-butyric acid (IBA) attained highest as 20.87 mg fresh weight and 3.07 mg dry weight per culture but root suspension culture at the same concentration of IBA enhanced biomass production as 3.07 g fresh weight and 0.38 g per culture after 4 weeks in culture. 3.0 mg/L ${\alpha}$-naphthalene acetic acid (NAA) treatment had similar effect on root biomass production as 3.07 g fresh weight and 0.38 g per culture with liquid suspension culture, whereas adventitious roots exposed to over 3.0-5.0 mg/L IBA or 5.0 mg/L NAA were less responsive by reducing the number of adventitious roots and/or changing root morphology such as short and thick. The content of secondary metabolites such as phenolic, flavonoids and total caffeic acid in adventitious roots cultured on MS medium supplemented with 1.0 mg/L IBA were attained highest as 27.20, 9.60. 10.67 mg/g dry weight, respectively. Overall, the best production of root biomass and secondary metabolites were given by 1.0 mg/L IBA.
We micropropagated pear (Pyrus species) using shoot tips and nodal explants from three pear genotypes. The ability to establish shoot tip cultures, proliferate shoots, induce rooting, and acclimatize the resulting plantlets are all elements of in vitro micropropagation. Shoots were induced from shoot tips on Murashige and Skoog medium (MS) with five different plant growth regulator combinations. The highest shoot formation rates were achieved for the three genotypes using MS supplemented with 1.0 mg/L N6-benzyladenine (BA) and 0.1 mg/L gibberellic acid (GA3). The maximum shoot number and shoot length for the three cultivars were recorded with 2.0 mg/L BA and 0.2 mg/L indole-3-butyric acid (IBA) in multiplication medium using nodal explants produced from microshoots. Nodal explants with one or two axillary buds cultured for three weeks initiated roots on medium supplemented with various concentrations of 1-naphthaleneacetic acid (NAA) or/and IBA in half-strength MS medium for adventitious rooting. The highest rooting response was with the combination of 0.2 mg/L NAA and 0.2 mg/L IBA. A combination of NAA and IBA resulted in a significant increase in the rooting ratio over NAA or IBA alone. In this medium, the root formation rate according to ranged from 68.9% for the BaeYun No. 3 genotype to 51.8% for the Hwanggeum genotype. We also investigated the influence of the concentration the polyamine phloroglucinol in rooting medium. For all three genotypes, the highest rooting ratio, longest root length, and greatest root number were observed in the treatments with 75-150 mg/L phloroglucinol. Most rooted plants were acclimatized successfully.
Mature embryos of five oat genotypes were cultured to develop an efficient method of callus induction and plant regeneration. Murashige and Skoog(MS) and N6 media supplemented with 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and kinetin were used for callus induction. Percentage of callus induction showed significant among the combinations of plant growth regulators. Callus induction showed high efficiency in medium containing 3 mg/$\ell$ of 2,4-D. The high frequency of callus induction was obtained in Gwiri37. For plant regeneration, calli induced from mature embryos were transferred onto MS and N6 media supplemented with combinations of 6-benzyladenine (BA) and naphthaleneacetic acid (NAA) for 5 weeks. Percentage of plant regeneration showed high in MS medium containing 0.2 mg/$\ell$ of NAA and 1 mg/$\ell$ of BA. The callus initiation medium affected the subsequent plant regeneration. Treatment with 3 mg/$\ell$ of 2,4-D, and 3 mg/$\ell$ of 2,4-D and 3 mg/$\ell$ of kinetin in callus induction media showed high frequency for plant regeneration. Plant regeneration frequency among the genotypes showed significant. Especially, Gwiri37 showed high regeneration frequency. Regenerated shoots were treated with 200, 350 and 500 mg/$\ell$ of indole-3-butyric acid (IBA) transferred onto half-strength MS medium without plant growth regulators. Treatment of shoots with IBA induced root formation rapidly.
Somatic embryos were formed from calli obtained from axillary shoots (raised from nodal segments of glasshouse-grown plants under aseptic conditions), internodal segments (from in vitro-raised plants), and root and coty-ledonary leaf segments (from in vitro-raised seedlings) after 8 weeks of initial culture. Embryo formation was the highest (97.33%) from cotyledonary leaf callus on Mura-shige and Skoog's (MS) medium containing kinetin (KN) (3 mg/L). Somatic embryo induction was lesser with different combinations of auxins while it increased to 100% in internodal segment and cotyledonary leaf calli with 6-benzyladenine (BA) (2mg/L) along with 2,3,5-triiodobenzoic acid (TIBA) (2mg/L). The shoots were induced from somatic embryos raised from root, coty-ledonary leaf and internodal segment calli grown on MS medium containing BA in combination with indole-3-acetic acid (IAA). Maximum of 66.67% cultures formed shoots on MS medium containing BA (1mg/L) in combination with IAA (2mg/L). The shoots raised from somatic embryos were rooted on MS medium supplemented with indole-3-butyric acid (IBA) (2mg/L). The plantlets transferred to the field showed 70% survival rate after one year.
Philip Robinson, J.;Jyoti, Prasad Kakati;Sebastinraj, J.;Suriya, K
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.3
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pp.343-348
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2017
Cymbidium aloifolium (L). Sw. is an exquisite epiphytic orchid of the Kolli Hills (Eastern Ghats) of Tamil Nadu in Southern India. It is fast disappearing from its natural habitats due to deforestation and low germination rate in natural habitat. In the present study, an attempt was made to germinate the seeds from un-dehisced capsule of Cymbidium aloifolium (L). Sw under in vitro condition. The seed germination and protocorm development were recorded in three different well known media namely Knudson C (KC), Half strength Murashige & Skoog (1/2 MS) and Vacin & Went (VW) media. The highest seed germination of 90% was observed KC basal media after $30^{th}$ days whereas germination percentages were 40% and 30% on 1/2 MS and VW media respectively. The well-developed protocorm were transferred to KC media supplemented with 6-Benzyl Amino Purine (BAP) and Naphthalene acetic acid (NAA) where BAP (1.0 mg/l) and NAA (1.0 mg/l) together were found to be optimum for the highest shoot formation. About 90% of the shoots found to be well rooted after transfer to the KC medium differently supplemented with 1.5 mg/l Indole-3-acetic acid (IAA) and 1.0 mg/l Indole-3-butyric acid (IBA). Though rooting also took place in the two basic media but the duration was longer when compared with the hormone-supplemented media. The rooted plantlets were hardened and kept under greenhouse conditions which can be relocated in natural habitats.
A simple, high-frequency and reproducible protocol for induction of adventitious shoot buds and plant regeneration from leaf-disc cultures of Jatropha curcas L. has been developed. Adventitious shoot buds were induced from very young leaf explants of in vitro germinated seedlings as well as mature field-grown plants cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with thidiazuron (TDZ) ($2.27{\mu}M$), 6-benzylaminopurine (BA) ($2.22{\mu}M$) and indole-3-butyric acid (IBA) ($0.49{\mu}M$). The presence of TDZ in the induction medium has greater influence on the induction of adventitious shoot buds, whereas BA in the absence of TDZ promoted callus induction rather than shoot buds. Induced shoot buds were multiplied and elongated into shoots following transfer to the MS medium supplemented with BA ($4.44{\mu}M$), kinetin (Kn) ($2.33{\mu}M$), indole-3-acetic acid (IAA) ($1.43{\mu}M$), and gibberellic acid ($GA_3$) ($0.72{\mu}M$). Well-developed shoots were rooted on MS medium supplemented with IBA ($0.5{\mu}M$) after 30 days. Regenerated plants after 2 months of acclimatization were successfully transferred to the field without visible morphological variation. This protocol might find use in mass production of true-to-type plants and in production of transgenic plants through Agrobacterium/biolistic-mediated transformation.
Montalban, I.A.;De Diego, N.;Igartua, E. Aguirre;Setien, A.;Moncalean, P.
Plant Biotechnology Reports
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v.5
no.2
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pp.177-186
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2011
This study describes for the first time in Pinus genus a plant regeneration system via a combined pathway of somatic embryogenesis and organogenesis from immature seeds of radiata pine. Somatic embryos were obtained from embryogenic line 2162 of Pinus radiata D. Don on EDM basal medium containing $60{\mu}M$ ABA and 6% sucrose. The explants used for organogenesis experiments were either freshly collected somatic embryos or somatic embryos germinated for 1 week. Germination medium was half-strength LP medium, supplemented with 0.2% activated charcoal. Different induction periods and BA concentrations were assayed for shoot induction. After induction treatments, explants were elongated on the same medium used for germination stage. Rooting medium was quarter-strength LP medium supplemented with three different auxin treatments: $1.5mg\;L^{-1}$ 1-naphthalene acetic acid (NAA), $1.5mg\;L^{-1}$ indole-3-butyric acid (IBA) and $1mg\;L^{-1}$ IBA with $0.5mg\;L^{-1}$ NAA (MIX). The effect of the photon flux ($120mmol\;m^{-2}\;s^{-1}$ and darkness) in the first week of the explants in the rooting media was also tested. This methodology could offer an alternative to overcome some problems associated with somatic embryogenesis such as the seasonality of embryogenic tissue (ET) initiation or a low embryo production from the ET, a particularly important issue in the case of genetically transformed ETs.
To establish in vitro nodal culture conditions of Echinosophora koreensis Nakai, one of rare and endangered species famous for beautiful flowers in the Korean Peninsula, the influence of plant growth regulators (PGRs) on shooting and rooting from in vitro shoots was investigated. In shoot multiplication, addition of 6-benzylaminopurine (BA) to the half-strength Driver and Kuniyuki's media in the range of 2.22 to 8.88 ${\mu}M $induced 2.5 to 2.7 shoots per axillary bud; and addition of 2.27 ${\mu}M $ thidiazuron (TDZ) produced 3.2 shoots, during 4 weeks of culture, while zeatin and isopentenyl adenine (2ip) were not effective on shoot multiplication as observed from several combination treatments of BA with other PGRs. Shoots established were smaller than 2 cm in length, in most of the treatments. while in BA 8.88 ${\mu}M $ treatment more than 30% of shoots were longer than 2 cm and shorter than 4 cm. In rooting, naphthalene acetic acid (NAA) from 5.37 to 21.48 ${\mu}M $ showed the rooting rate from 40.0 to 62.5%. Indole butyric acid (IBA) addition had little effect on rooting (<10%), although some roots in IBA-containing media were longer than those in NAA. Micropropagation from axillary buds of nodular explants was applicable and promising to multiplication and conservation of Echinosophora koreensis Nakai.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2020.12a
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pp.60-60
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2020
To establish in vitro axillary bud culture conditions of Echinosophora koreensis Nakai, one of Korean endemic endangered species famous for beautiful flowers, we tested the influence of plant growth regulators (PGRs) in shooting and rooting stage from in vitro plants. In shoot multiplication, addition of 6-benzylaminopurine (BA) to the media induced 2.5 to 3 shoots per bud during 4 weeks of culture. And media including 0.5 mg L-1 thidiazuron (TDZ) produced 3 to 4 shoots per bud. However, zeatin and isopentenyl adenine (2-ip) were not successful to increase shoot number, and the combination treatments of BA with other PGRs were also not effective. Shoots were smaller than 2 cm in length, in most of the treatments. In rooting, naphthalene acetic acid (NAA) treatments in the range of 0.5 to 4.0 mg L-1 appeared to increase rooting rate by 10% to 60% approximately when compared with the control but roots developed with callus clusters. Indole butyric acid (IBA) addition had little effect on rooting (below 10%), while some roots were longer than in NAA treatments and some shoots were longer on high IBA concentrations (4.0 to 8.0 mg L-1). It is suggested that micropropagation is a highly applicable and promising to multiplication and conservation of rare and endangered endemic species.
A protocol is described for rapid multiplication of Zanthoxylum piperitum DC. (Rutaceae), an important aromatic and medicinal plant, through shoot-tip explant cultures. Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with various concentrations of N-6-benzyladenine (BA), N-6-benzylaminopurine (BAP) and thidiazuron (TDZ), in single or in combination with ${\alpha}-naphthaleneacetic$ acid (NAA), was used to determine the rate of shoot proliferation. N-6-benzyladenine (BA) used at 0.5mg/l, was the most effective in initiating multiple shoot proliferation at the rate of 23 microshoots per shoot-tip explants after 40 days of culture. Shoot multiplication increased 1.2-fold in each successive subculture. Induction of rooting (98%) was achieved by transferring the shoots to the same basal medium containing 2 mg/l indole-3-butyric acid (IBA). Plantlets went through a hardening phase in a controlled growth chamber, prior to in vivo transfer. These results represented that possible application for the mass production of plantlets through in vitro culture system of Zanthoxylum piperitum DC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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