Phyllanthus urinaria was an important species in Korea and distributed in all around of Korea. The roots and stems of this plant have been used for natural medicine for the treatment of diabetes, the hepatitis B virus and disturbances of the kidney and urinary bladder. Production of adventitious roots in P. urinaria by in vitro cultures could be used as alternatives materials. Shoot and root segments from P. urinaria seedling were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 3.0 mg/L IBA and 30 g/L sucrose. After 4 weeks of culture, the highest induction of adventitious roots was obtained from the shoot part. Frequency of adventitious root formation on medium with various kinds of auxins (IAA, NAA, 2,4-D, and IBA) and various concentrations of IBA (0, 0.1, 0.5, 1.0, 3.0, and 5.0 mg/L) was tested. The maximun induction of adventitious root was obtained on medium with 0.5 mg/L IBA. In liquid culture, growth of root was best on medium supplemented with 30 g/L sucrose. Adventitious roots were cultured in 5 L bioreactor containing 1/2 MS medium supplemented with 0.5 mg/L IBA and 30 g/L sucrose and mass-production of adventitious roots was successfully achieved. These results revealed the first attempt for the production of adventitious roots in P. urinaria.
This study was conducted to determine the effect of a light-emitting diode (LED) on in vitro shoot growth and rooting in teak (Tectona grandis L.). In the experiments with apical bud explants, the greatest shoot elongation (3.2 cm) occurred when they were cultured on DKW medium under 50% blue and 50% red LED mixture (BR), whereas no differences in growth were observed in different light sources (florescent light [F] or BR) or media (MS or DKW). The highest number of shoot multiplication (2.4/explant) or elongation (4.94 cm) was achieved with 0.5 or 1.0 mg/L 6-Benzyladenine (BA) treatment under BR. In addition, the best rooting rate (93.8%) or root length (1.3 cm) was recorded with 0.5 mg/L indole-3-butyric acid (IBA) treatment under BR, and the highest root induction (3.1/explant) was observed in 0.2 mg/L IBA under BR. The in vitro rooted plantlets were hardened and survived well on soil.
Iris dichotoma Pall. is an important endangered plant belonging to the family Iridaceae. A method was developed for the rapid micropropagation of I. dichotoma through plant regeneration from leaf, rhizome, and root explant-derived calli. Leaf, rhizome, and root segments were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D; $0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$) for callus induction. Callus production was highest at $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D, where 73.8% and 45.5% of cultured rhizome and root cuttings, respectively, produced calli. The viable calli were maintained at an induced concentration of 2,4-D ($3.0mg{\cdot}L^{-1}$). They were then transferred to MS medium supplemented with various concentrations of 2,4-D ($0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$) in combination with 6-benzyladenine (BA: 0, 1.0 and $3.0mg{\cdot}L^{-1}$) for adventitious shoot regeneration. The addition of a low concentration of 2,4-D into BA-containing medium significantly increased the frequency of shoot regeneration in leaf, rhizome, and root-derived calli. The highest number of adventitious shoots (26.4 per callus) formed at $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D and 1.0 mg/l BA. For rooting of the shoots, half- strength MS medium supplemented with different concentrations of indole 3-butyric acid (IBA) $0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$ was tested. The optimal results were observed using half-strength MS medium supplemented with $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ IBA, on which 98% of the regenerated shoots developed roots with an average of 3.5 roots per shoot within 45 days. The plantlets raised in vitro were acclimatized and transferred to soil with 95% success. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation and mass propagation of this endangered plant.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2022.09a
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pp.63-63
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2022
Pear (Pyrus spp.) is a typical fruit and grown in the temperate climate regions throughout the world. Development of appropriate methods for in vitro propagation and root induction are important to increase the production rate and plant quality rapidly. This study was conducted to find the most appropriate media conditions for in vitro propagation and rooting of three pear cultivars, 'Barttlett', 'BaeYun No.3' and 'Oharabeni'. In vitro propagation was induced on Murashige and Skoog medium (MS) with 2.0 mg/L N6-benzyladenine (BA) and 0.2 mg/L indole-3-butyric acid (IBA) medium. For root induction of these cultivars, the shoot explants of the propagated plants were cultured on two different media containing 1/2 MS medium containing 0.2 mg/L IBA with 15 g/L Sucrose (Rooting Medium 1, RM1) and 1/4 Linsmaier and Skoog medium (LS) medium containing 1 mg/L IBA and 1 mg/L NAA hormone with 7.5 g/L glucose (Rooting Medium, RM2) and after 2 weeks, the plants on the RM2 medium are transferred on RM1 medium (RM2 condition). After nearly seven weeks, percentage of rooting formation were 22.2% in RM1 and 30% in RM2 conditions for Barttlett and 70% in RM1 and 60% in RM2 conditions for Oharabeni cultivars. No differences in these cultivars were observed between RM1 and RM2 conditions. However, BaeYun No.3 cultivar was observed 0% in RM1 and 72.7% in RM2 conditions. This study will help to propagation and root induction of in vitro plants for various pear cultivars.
This study was conducted to establish practical micropropagation of jujube cultivars ('Geumsumg', 'Bokjo') by axillary bud culture. The results are summerized as follows : 1. Addition of activated charcoal to half-strength Murashige and Skoog(MS) medium supplemented with 0.5mg/l benzylaminopurine(BAP) enhanced shoot and root growth. At 500mg/l activated charcoal level 'Geumsung' showed best result, and shoot length and the number of multiple shoot were 6.4cm and 10.0, respectively. At 1,000mg/l activated charcoal level 'Bokjo showed best result, and shoot length and the number of multiple shoot were 7.5cm and 12.4, respectively. 2. As indole-3-butyric acid(IBA) concentration increased, rooting and callus growth of microshoot were enhanced. The optimum IBA concentration for shoot elongation and multiplication was 1.0mg/l. 3. Growth responses of shoot-tip and axillary bud segments between two jujube cultivars were different. 'Geumsung' showed that axillary bud explants were about twice better than shoot-tip explants for shoot multiplication, but 'Bokjo' showed that shoot-tip explants mere better than axillary bud explants for shoot elongation and multiplication. 4. In acclimatization processes of plantlets produced in vitro, the survival of plantlets with only root primordia in soil medium was better than that of plantlets with several routs resulting in 97.8%. 5. In cutting of in vitro-derived microshoot, paclobutrazol was more effective than IBA, naphth-aleneacetic acid(NAA) and $Rooton^{(R)}$ in rooting and root growth.
Iris koreana (Iridaceae) is an endangered plant native to Korea. In order to develop an in vitro propagation method, we investigated the effect of 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) and a-naphthalene acetic acid (NAA) on callus induction in different I. koreana tissues. In addition, we also investigated the effect of 2,4-D and Benzyl aminopurine (BA) treatments on adventitious shoot induction in viable calli and the effect of indole-3-butyric acid (IBA) on root formation in viable shoots. We found that callus production was highest with 1.0 mg/L NAA (94.4% cultured rhizome explants), and adding low concentrations of 2,4-D to BA containing media significantly increased the frequency of shoot primordial formation. The best rooting results were obtained with 1.0 mg/L IBA, on which 98% of regenerated shoots developed roots and produced an average of 7.4 roots within 45 days. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation, as well as for mass propagation.
Yun, Ayoung;Kim, Tae Dong;Kim, Ji Ah;Lee, Na Nyum;Cheong, Eun Ju;Kim, Yong Wook
Journal of Plant Biotechnology
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v.49
no.1
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pp.82-89
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2022
In vitro techniques were developed for propagating Vaccinium oldhamii using shoots with apical buds. Explants having an apical bud were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1.0, 2.0, and 5.0 mg/L of each zeatin, thidiazuron, 6-benzylaminopurine (BA), and 6-(γ,γ-dimethylallylamino)purine (2-iP) in order to induce multiple shoots. Among the tested treatments, the 2.0 mg/L of 2-iP proved to be most suited for the multiplication and growth of shoots; the multiple shoot induction rate was 100.0%, the average number of shoots was 7.4 per explant, and the average shoot length was 51.7 mm. The in vitro elongated shoots were rooted on half-strength MS medium containing various concentrations of indole-3-butyric acid (IBA) and 1-naphthaleneacetic acid (NAA). However, overall callus overgrowth was observed in all treatments and resulted in necrosis and abnormal shoot growth in root formation. A low concentration (0.5 mg/L) of IBA was appropriate for normal root development and the in vitro rooting rate was 30%. Ex vitro treatments on root formation using various concentrations of IBA with Talc powder and two types of rooting substrates (Flexi-Plugs or Horticultural soil) were examined. The ex vitro rooting rate (80%) and length of roots (32.9 mm) were obtained when the cut ends of the shoots were treated with 1.0 mg/L IBA and cultivated in Horticultural soil for 2 months. These findings suggest that ex vitro rooting is the more effective method for improving root formation in Vaccinium oldhamii than in vitro rooting.
Cho, Kang Hee;Han, Bong Hee;Han, Jeom Hwa;Park, Seo Jun;Kim, Se Hee;Lee, Han Chan;Kim, Mi Young;Kim, Myung-Su
Journal of Plant Biotechnology
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v.45
no.4
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pp.382-391
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2018
The objective of this study was to determine the most effective medium condition of shoot proliferation and root formation for the efficient in vitro micropropagation of M.26 (Malus pumila Mill). Simple sequence repeat (SSR) markers were used to analyze the genetic diversity of micro-propagated and greenhouse grown M.26. Shoot proliferation was carried out in MS (Murashige and Skoog) containing benzyladenin (BA, $0.5{\sim}5.0mg{\cdot}L^{-1}$) and thidiazuron (TDZ, $0.01{\sim}0.1mg{\cdot}L^{-1}$). The highest number of shoots (10.67 shoots per explant) was induced by adding BA at a concentration $1.0mg{\cdot}L^{-1}$. TDZ treatments caused higher hyperhydricity rate in cultured explants than in BA treatments. There was no significant effect of both BA and auxin on shoot proliferation, and the optimum proliferation medium for M.26 was MS medium containing $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ BA. To find a suitable medium composition for shoot rooting, we tested different concentrations indole-3-butyric acid (IBA) and ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid ($0.5{\sim}5.0mg{\cdot}L^{-1}$), MS medium (1/4-1), sucrose ($0{\sim}30g{\cdot}L^{-1}$). The shoots showed good rooting on half-strength MS medium containing $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ IBA and $15-20g{\cdot}L^{-1}$ sucrose. The rooting rate (100%), number of roots (10.45 ~ 13.60 roots per explant), root length (7.41 ~ 8.33 cm), and shoot length (4.93 ~ 5.38 cm) were good on this medium. Fifteen SSR primers were detected in a total of 30 alleles in 20 micro-propagated plantlets, all SSR profiles from micro-propagated plantlets were monomorphic and similar to greenhouse grown control plantlet M.26 plant. The results indicated that M.26 micro-propagated plantlets were genetically stable.
Morphogenetic responses were investigated by culturing embryo and leaf explants of Korean wild type tea plant, Camellia sinensis (L.) O. Kuntze. Induction of direct somatic embryogenesis as well as adventitious and/or axillary shoots was obtained from mature zygotic embryo cultures on Murashige and Skoog (MS) basal medium having 5 to $20\mu\textrm{M}$cytokinin a lone. Morphogenetic response was decreased dramatically by the addition of auxins tested. One hundred percent of induced and isolated shoots formed roots after four weeks of culture on half-strength MS or quarter-strength Schenk and Hildebrandt (SH) media supplemented with $10\mu\textrm{M}$indole-3-butyric acid (IBA). Immature zygotic embryos were shown to be a suitable explant for embryogenic callus formation in the presence of 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid(2, 4-D) in basal medium. Mature zygotic embryo originated leaves were used to test their ability for mophogenesis by incorporating plant growth regulators such as IBA, naphthyl-1-acetic acid (NAA), and 6-benzylaminopurine (BAP). Apparently, the morphogenetic responses of the cultured explant sources on the types and/or levels of plant growth regulators tested were observed visually.
This study was carried out to optimize the embryogenic callus induction and plant regeneration from mature seeds of Sorghum bicolor. The effect of growth regulators was investigated on formation of embryogenic callus. The highest frequency of embryogenic callus was observed when the mature seeds were cultured on B5 medium supplemented with 2 mg/L 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). The highest frequency of plant regeneration from embryogenic callus was observed on MS medium with 0.5 $mg\;l^{-1}$ 6-benzyl amino purine (BAP) and 0.25 $mg\;l^{-1}$ indole-3-butyric acid (IBA) to optimize the shoot regeneration. High concentration of BAP (1 $mg\;l^{-1}$) supplemented with IBA (0.25 $mg\;l^{-1}$) was effective combination for shoot multiplication. MS medium supplemented with 1 $mg\;l^{-1}$ IBA was found to be the most effective for inducing roots. Normal rooted plantlets were transferred to the greenhouse for hardening with over 90% survival rate. Hence, this reproducible protocol could be useful for mass propagation and genetic transformation of S. bicolor.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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