The experiments were conducted to provide information on the chemical concentrations and cultural characteristics in the periods of hyphal incubation, primordial formation, and fruiting bodies yield of winter mushroom, Flammulina velutipes at the mixture ratio of the raw materials. Substrates were analyzed for pH, total carbon (T-C), total nitrogen (T-N), and C/N ratio. In case of Flammulina velutipes, yield of fruiting bodies were 190.5 g/850 ml in the substrates, [Corn-cob + Rice bran + Soybean curd residue (75:20:5)], which was increased 20.4% more than the control, [Douglas fir sawdust + Rice bran (75:25)]. But the periods of hyphal incubation took 28 days, which was 7 days longer than the control. Also, in the substrates [Douglas fir sawdust + Rice bran + Soybean curd residue (75:20:5)], the yields was 172.7 g/850 ml and the periods of hyphal incubation was 21 days.
Hong, In-Pyo;Kang, Pil-Don;Kim, Ki-Young;Nam, Sung-Hee;Lee, Man-Young;Choi, Yong-Soo;Kim, Nam-Suk;Kim, Hye-Kyung;Lee, Kwang-Gill;Humber, Richard A.
Mycobiology
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v.38
no.2
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pp.128-132
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2010
Injection inoculation protocols for fruit body formation of Cordyceps militaris (C. militaris) were investigated to improve the incidence of infection in the silkworm species Bombyx mori (B. mori). Injection, with suspensions of C. militaris hyphal bodies into living silkworm pupae, was used to test for fruit body production. Use of Daeseungjam rather than Baegokjam or Keumokjam varieties of B. mori is thought to be suitable for infection by C. militaris. From mounting, nine-day-old to 11-day-old pupae showed the best incidence of infection with a $100\;{\mu}L$ injection volume. Silkworm pupae injected with a hyphal suspension concentration of more than $2\;{\times}\;10^5$ colony-forming unit (cfu) recorded a greater than 96% incidence of infection. Also, fruit bodies of C. militaris were induced and produced at a light intensity between 500 and 1,000 lx.
Nuclear distribution within the extra-radical fungal structures and during spore production in the arbuscular mycorrhizae fungus Glomus intraradices was examined using an in vitro monoxenic culture system. A di-compartmental monoxenic culture system was modified using a nitrocellulose membrane and a coverglass slip for detailed observations. Nuclear distribution was observed using the fluorescent DNA binding probes SYBR Green I and DAPI. Both septate and non-septate mycelial regions were observed, but cytoplasmic contents were only found within non-septate mycelia. Nuclear fluorescent staining revealed that the non-septate hyphal region contained nuclei only with cytoplasm, and that nuclear distribution was limited by septa. Swollen hyphal bodies were often associated with septate and empty-looking hyphae. Cytoplasmic contents filled the swollen hyphal body from the non-septate hyphal region following removal of the septa. As a consequence, the swollen body developed into a new spore. These observations provide understanding about the distribution of AM fungal nuclei within extra-radical mycelia and during spore formation. The results suggest a mechanism by which the development of a cytoplasm-containing mycelium is controlled by the formation or removal of septa to efficiently maintain and proliferate essential contents. This mechanism may provide a survival strategy to the fungus.
Ichthyophonus disease had broken out among rock bream in Dec. 1989. Diseased-fish showed markedly stunted growth and darkish coloration, and anatomically the liver with small white nodules, tumefied spleen with its granulous surface, and the markedly tumefied kidney. Microscopic examination of liver, kidney, spleen and gill from 10 rock bream revealed cyst of the fungus Ichthyophonus sp. Rock bream were heavily infected with the highest concentrations of spherical multinucleate bodies in the liver, the spleen, the kidney and the gills. In heavily infected sectors of tissue a common necrotic zone was formed around spore aggregates. Spherical multinucleate hyphal terminal bodies developed thin hyphae longer than 1mm which divided into many branches.
Cellular aspects of sooty mold on walnut leaves were investigated by using light and electron microscopy. A black coating developed on the adaxial leaf surface of a walnut tree. No infestations were found on the abaxial leaf surface with peltate glandular trichomes. Light microscopy showed that fungal complexes from the leaf surface were composed of brown conidia and hyphae. Conidia, with longitudinal and transverse septa, were variable in length ranging from 10 to $30{\mu}m$, and commonly found in clusters, forming microsclerotia. Neither epidermal penetration nor hyphal entrance to host tissues was observed. Based on their morphological characteristics, the fungal complexes were assumed to be Capnodium species. An electron-dense melanized layer was present on the cell wall of multi-celled conidia. Concentric bodies in the fungal cytoplasm had an electron-translucent core surrounded by an electron-dense margin with a fibrillar sheath. Chloroplasts without starch granules in the palisade mesophyll cells of sooty leaves had electron-dense stromata and swollen plastoglobuli. These results suggest that the epiphytic growth of fungal complexes can be attributed to the melanized layer and concentric bodies against a water-deficient environment on the leaf surface. Ultrastructural characteristics of the sooty leaves indicate typical features of dark-adapted and non-photosynthetic shade leaves.
Chemical mutagenesis of basidiospores of Hypsizygus marmoreus generated new mushroom strains. The basidospores were treated with methanesulfonate methylester, an alkylating agent, to yield 400 mutant monokaryotic mycelia. Twenty fast-growing mycelia were selected and mated each other by hyphal fusion. Fifty out of the 190 matings were successful (mating rate of 26.3%), judged by the formation of clamp connections. The mutant dikaryons were cultivated to investigate their morphological and cultivation characteristics. Mutant strains No. 3 and No. 5 showed 10% and 6% increase in fruiting body production, respectively. Eight mutant strains showed delayed and reduced primordia formation, resulting in the reduced production yield with prolonged cultivation period. The number of the fruiting bodies of mutant No. 31, which displayed reduced primordial formation, was only 15, compared to the parental number of 65. Another interesting phenotype was a fruiting body with a flattened stipe and pileus. Dikaryons generated by mating with the mutant spore No. 14 produced flat fruiting bodies. Further molecular biological studies will provide details of the mechanism. This work shows that the chemical mutagenesis approach is highly utilizable in the development of mushroom strains as well as in the generation of resources for molecular genetic studies.
Use of nanoparticles (NPs) in several commercial products has led to emergence of novel contaminants of air, soil and water bodies. The NPs may exhibit greater ecotoxicity due to nano-scale dependent properties over their bulk counterparts. The present investigation explores the effect of in vitro supplementation of TiO2, silica and silver NPs on radial growth and ultrastructural changes in the hyphae and spores of two mushroom genera, Ganoderma lucidum and Volvariella volvaceae. A concentration dependent decrease in radial growth on NP amended potato dextrose agar medium was recorded. However, in comparison to control, there was decrease in radial diameter on supplementation with TiO2 NPs while an increase was recorded for silica and silver NPs amendments as compared to their bulk salts at same concentrations after 48 h of incubation. Optical microscopy studies showed decrease in the number of spores while increase in spore diameter and thinning of hyphal diameter on NPs supplementation. Scanning electron microscopy analysis of fungal growth showed presence of deflated and oblong spores in two fruiting strains of Ganoderma while Volvariella exhibited decreased sporulation. Further, hyphal thinning and branching was recorded in response to NP amendments in both the test mushrooms. Enhancement of protein content was observed on NP compared to bulk supplementation for all cultures, concentrations and hours of incubation except for TiO2 NPs. Likewise, bulk and NP supplementations (at 100 mg L-1) resulted in enhanced laccase activity with occurrence of laccase specific protein bands on SDS-PAGE analysis.
Comparison of fruit bodies of Pleurotus ostreatus cultivar chunchu No .2 grown on the sawdust, rice straw and cotton waste substrates revealed differences in the pattern of differentiation of hyphal compartments. Required period for primordium induction of fruit bodies grown on sawdust substrate was 13 days. Physical structure shown as hardness of stipes grown on the sawdust substrate, fruit bodies were harden than control. Pileocystidia were well developed on the surface of pileus in the fruit body cultivated on rice straw. Microstructures of fruit body grown on the sawdust and cotton wastes substrates shown fast-discharge of basidiospore and sytoms ageing. Hyphae of fruit bodies formed on sawdust substrate had less stainable cytoplasmic material and many more vacuoles than hyphae of fruit bodies formed on synthetic substrate with 50% of pine sawdust, 30% of cotton seed hull and 20 of beet pulp(control).
Oyster mushroom, Pleurotus ostreatus is bifactorial heterothallism. Single basidiospore isolates from fruiting bodies are homokaryotic and self-sterile. However, we found that homokaryons derived from some strains of P. ostreatus could develop fruiting bodies with two different types. One hundred and two isolates out of 155 monospore isolates formed fruiting bodies (65.8%). First group did not have only mature or sporulating fruiting bodies but also clamp connections, which initial isolate also did not present clamp connections (Abortive homokaryotic fruiting, AHF). Second group had developed fruiting bodies with clamp connections even though initial homokaryotic colony did not form clamp connections (Pseudo- homokaryotic fruiting, PHF). The mycelial colonies derived from PHF by tissue culture formed clamp connections, while mycelial colonies of AHF lacked them. We obtained 535 PHF and 79 AHF inter-strain hybrids among 8 strains of P. ostreatus by hyphal anastomosis. The fruiting body yield of PHF group is higher than that of AHF group in bottle cultivation. A preselection of single spore isolates for fertility would save labour in strain improvement of P. ostreatus.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.119.1-119
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2003
The glyoxysomal nature of microbodies was determined in Botryosphaeria dothidea hyphae based on morphology and in situ enzyme characteristics by transmission electron microscopy and cytochemistry. Bound by a single membrane, microbodies had a homogeneous matrix and varied in size ranging from 200 to 400 m in diameter. Microbodies had crystalline inclusion(s) which consisted of parallel arrays of fine tubules in their matrices. Microbodies and lipid globules were frequently placed in close association with each other, forming microbody-lipid globule complexes in hyphae. The cytochemical activities of catalase and malate synthase were localized in matrices of microbodies, showing intense electron-density of the organelle. In addition, the immunogold labeling detected the presence of catalase in multivesicular bodies and hyphal cell walls as well as in matrices and crystalline inclusions of microbodies, supporting the enzyme secretion through cell walls. Meanwhile, isocitrate Iyase was localized only in matrices of microbodies. These results suggest that microbodies, particularly complexed with lipid globules, in the fungal hyphae are functionally defined as glyoxysomes, where glyoxysomal enzymes are biochemically active for the glyoxylate cycle to be a metabolic pathway in gluconeogenesis. (Mycology and Fugus Diseases)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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