Park, Ji-Young;Kim, Min-Jung;Shon, Ji-Hong;Shin, Jae-Gook
한국독성학회:학술대회논문집
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한국독성학회 2001년도 International Symposium on Dietary and Medicinal Antimutgens and Anticarcinogens
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pp.195-195
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2001
The inhibitory potentials of TCAs (imipramine, desipramine, amitriptyline, and nortriptyline) on phenytoin p-hydroxylation and probe metabolic pathways of each CYP isoforms were evaluated from incubation studies of human liver microsomes and cDNA-expressed cytochrome P450s in vitro in order to understand the mechanism of drug interaction between TCAs and phenytoin, a substrate of CYP2C9 and CYP2C19. (omitted)
Water dissociation on oxide surface has been researched in many fields because of its importance as fundamental phenomenas. MgO(001) is a good model system to understand heterogeneous catalysis, gas sensors, ground-water contaminants, and atmosphere chemistry. Over decades, ultrathin film of MgO on Ag(100) have attracted research activities thanks to its enhanced catalytic property. Correlation of the oxide and the metal, potential screening, charge fluctuation from interface reconstruction makes different energetics of hydroxylation of waters on film. We calculate the water-spliting energetics under the vacuum system.
Progestrone bioconversion by immobilized Aspergillus phoenicis was studied. Progesterone was converted into 11$\alpha$-hydroxyprogesterone and 3-minor byproducts. Whole cells of A. phoenicis were immobillized by enreappment with calcium-alginate, K-carrageenan, or polyacrylamide. Of these materials tested, cell immobilized in $Ca^{2+}$ -alginate gels showed the highest activity for 11$\alpha$-hydroxylation of progesterone. In the case of mycelia immobilized in $Ca^{2+}$-alginate, futher progressing hydroxylation of 11$\alpha$-hydroxyprogesterone was greatly reduced. Spores of A. phoenicis which were immobillized with $Ca^{2+}$-alginate and germinatedin situ for 25 hours showed higher 11$\alpha$-hydroxylase activity than those of entrapped whole mycelia and maintained initial enzyme activity for all 8 times of repeated use. After 16 times of reuse, the activity was declined 30% or more. When culture media and $Zn^{2+}$ were introduced into the reaction media, the activity of the immobilized mycelia which had been lowered due to many times of reuse was effectively reactivated.
Cytochrome P450 hydroxylase (CYP) in actinomycetes plays an important role in the biosynthesis and bioconversion of various secondary metabolites. Two unique CYPs named CYP-sb21 and CYP-pa1, which were identified from Sebekia benihana and Pseudonocardia autotrophica, respectively, were proven to transfer a hydroxyl group at the 4th or 9th N-methyl leucine position of immunosuppressive agent cyclosporin A (CsA). Interestingly, these two homologous CYPs showed different CsA regio-selectivities. CYP-sb21 exhibited preferential hydroxylation activity at the 4th position over the 9th position, whereas CYP-pa1 showed the opposite preference. To narrow down the CYP domain critical for CsA regio-selectivity, each CYP was divided into four domains, and each domain was swapped with its counterpart from the other CYP. A total of 18 hybrid CYPs were then individually tested for CsA regio-selectivity. Although most of the hybrid CYPs failed to exhibit a significant change in regio-selectivity in the context of CsA hydroxylation, hybrid CYP-pa1 swapped with the second domain of CYP-sb21 showed a higher preference for the 9th position. Moreover, hybrid CYPsb21 containing seven amino acids from the 2nd domain of CYP-pa1 showed higher preference for the 4th position. These results imply that the 2nd domain of CsA-specific CYP plays a critical role in CsA regio-selectivity, thereby setting the stage for biotechnological application of CsA regio-selective hydroxylation.
나노구조를 갖는 중공구형(CNS) 및 중공반구형(NBC) 다공성 탄소 담체에 각각 약 1.0 wt%의 구리를 담지시켜 두 종류의 촉매를 제조하였고 과산화수소수에 의한 페놀의 수산화 반응에서 촉매의 성능을 두 종류의 서로 다른 용매(물, 아세토니트릴)에 대하여 비교 분석하였다. 촉매에 담지된 구리의 양은 EDS 분석으로 확인하였고 비표면적, 기공 부피, 기공 분포도 등을 비교 분석하였다. 두 종류의 촉매에서 모두 아세토니트릴보다 물에서 더 높은 전환율과 과산화수소 유효도 및 카테콜과 하이드로퀴논의 생성율을 얻을 수 있었고, 물을 용매로 사용했을 때 1.0 Cu/CNS 촉매가 1.0 Cu/NBC 촉매보다 50% 이상의 전환율과 과산화수소 유효도를 보였다.
The metabolism of [$^{14}\textrm{C}$] $\textrm{GA}_{12}$ in the Chinese yam (Dioscorea opposita Thunb. var. Tsukune) was examined to determine the identification of endogenous gibberellins. [$^{14}\textrm{C}$] $\textrm{GA}_{12}$ was metabolized to $\textrm{GA}_{53}$, $\textrm{GA}_{44}$, $\textrm{GA}_{19}$, $\textrm{GA}_{20}$, $\textrm{GA}_1$, $\textrm{GA}_8$, $\textrm{GA}_{15}$, $\textrm{GA}_{24}$, $\textrm{GA}_9$, $\textrm{GA}_{36}$ and $\textrm{GA}_4$. Radioactivity of GAs in non C-13 hydroxylation route was five-fold higher than that of early C-13 hydroxylation in analyzed GA-metabolites. Radioactivity of $\textrm{GA}_4$ was always four times higher than that of $\textrm{GA}_1$ at every feeding time. $\textrm{GA}_1$ radioactivity has always a lower level to below 200 DPM. The major pathway of endogenous GA metabolism in seedlings of the Chinese yam might be the non C-13 hydroxylation pathway.
Objectives : Achyranthes bidentata radix (Usul) has been used as anti-arthritic, antiallergic, antidiuretic, and so on. Recently extracts of Achyranthes bidentata radix have shown anti-inflammatory and cancer preventive effects in vitro and in vivo. Methods : We therefore evaluated the inhibitory potential of ethanol extracts of Achyranthes bidentata radix on cytochrome P450 (CYP) isoforms-catalyzed reactions, which relate to causes of cancer and inflammation, including CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2E1, CYP2D6, CYP2C8, and CYP3A4, using human liver microsomal preparations. Results : The extracts showed weak or negligible inhibitory effects on CYP2C9-catalyzed (S)-warfarin 7-hydroxylation, CYP2C19-catalyzed S-mephenytoin 4-hydroxylation, and CYP2D6-catalyzed dextromethorphan O-demethylation with each IC50 over 1750 g/ml, respectively. However, it showed relatively significant inhibitory effect on CYP1A2-catalyzed phenacetin O-deethylation and CYP2E1-catalyzed chlorzoxazone 6-hydroxylation with IC50s of 970.5 g/ml and 821.4 g/ml, respectively. Conclusions : These results suggest that extracts of Achyranthes bidentata radix have inhibitory effects on CYP-catalyzed reactions, especiallyCYP1A2 and CYP2E1, in human liver microsomes. These effects appear to relate to anti-inflammatory and cancer prevention following decrease of reactive oxygen species formed by CYP, especially CYP1A2 and CYP2E1, by Achyranthes bidentata radix. However, further evaluation is necessary to demonstrate and to confirm its effects in human.
Rimal, Hemraj;Subedi, Pradeep;Kim, Ki -Hwa;Park, Hyun;Lee, Jun Hyuck;Oh, Tae-Jin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권11호
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pp.1750-1759
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2020
The characterization of cytochrome P450 CYP125A13 from Streptomyces peucetius was conducted using cholesterol as the sole substrate. The in vitro enzymatic assay utilizing putidaredoxin and putidaredoxin reductase from Pseudomonas putida revealed that CYP125A13 bound cholesterol and hydroxylated it. The calculated KD value, catalytic conversion rates, and Km value were 56.92 ± 11.28 μM, 1.95 nmol min-1 nmol-1, and 11.3 ± 2.8 μM, respectively. Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) analysis showed that carbon 27 of the cholesterol side-chain was hydroxylated, characterizing CYP125A13 as steroid C27-hydroxylase. The homology modeling and docking results also revealed the binding of cholesterol to the active site, facilitated by the hydrophobic amino acids and position of the C27-methyl group near heme. This orientation was favorable for the hydroxylation of the C27-methyl group, supporting the in vitro analysis. This was the first reported case of the hydroxylation of cholesterol at the C-27 position by Streptomyces P450. This study also established the catalytic function of CYP125A13 and provides a solid basis for further studies related to the catabolic potential of Streptomyces species.
실리카계 메조 물질인 MCM-41의 합성시 $Fe^{3+}$ 염을 합성 기질에 직접 도입하여 구조 내의 Si를 Fe로 일부 치환시킨 Fe-MCM-41(4 mol% Fe)을 합성하였다. XRD, $N_2$ 흡착법, TEM 등으로 합성한 메조 세공 물질의 구조적 특성을 조사하였으며, UV-Vis 및 FT-IR 등의 분광분석을 통하여 철의 상태를 확인하였다. 촉매적 활성 연구를 위하여 과산화수소를 산화제로 이용한 phenol hydroxylation을 수행하였으며, 물을용매로 반응 온도 $50^{\circ}C$, phenol:$H_2O_2$=1:1 조건에서 ca. 60%의 전화율을 얻었다. 또한, 구조 중 Fe 활성점을 이용한 탄소 나노 튜브의 성장 가능성을 확인하기 위하여, 아세틸렌가스를 탄소원으로 사용한 thermal-CVD 반응기를 이용하였으며, 다중벽 탄소 나노 튜브를 제조할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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