In previous our studies, we have reported that eugenol derived from Eugenia caryophyllata(Myrtaceace) exhibits acute N-methyl-D-aspartate(NMDA)- and oxygen/glucose deprivation-induced neurotoxicity in primary cortical cultures and protects hippocampal neurons from global ischemia. In this study, we investigated whether the extracts and fractions of E. caryophyllata or eugenol shows the neuroprotective effects against delayed neuronal injury evoked by NMDA or ${\alpha}$-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole propionate(AMPA), and oxidative damage induced by arachidonic acid-, hydrogen peroxide-, $FeCl_2$/ascorbic acid-, and buthionine sulfoximine(BSO) in primary cortical cultures. We examined the neurotoxicity of eugenol itself in cultures and inhibitory effect of eugenol on NMDA- or kainate(KA)-induced convulsion in BALB/c mice. Each water, methanol extract and methanol fraction of E. caryophyllata was significantly attenuated NMDA-induced delayed neurotoxicity, respectively. Eugenol exhibited a significant inhibitory action against the convulsion evoked by NMDA and KA, and reduced delayed or brief neurotoxicity induced by NMDA, AMPA, and various oxidative injuries. These results suggest that eugenol derived from E. caryophyllata may contribute the neuroprotection against delayed-type excitotoxicity and excitotoxins-mediated convulsion through the amelioration of oxidative stress.
Kim, Sung-Chul;Seo, Geun-Young;Lee, Sung-Won;Park, Sung-Joo;Kim, Jae-Hyo;Ahn, Seong-Hun;Hwang, Sung-Yeoun
Journal of Pharmacopuncture
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v.13
no.3
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pp.5-13
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2010
Reactive Oxygen Species(ROS) are continuously produced at a high rate as a by-product of aerobic metabolism. Since tissue damage by free radical increases with age, the reactive oxygen species(ROS) such as hydrogen peroxide($H_2O_2$), nitric oxide(NO). Several lines of evidence provided that ROS appears to cause to develop aging-related various diseases such as cancer, arthritis, cardiovascular disease. Our reserch objective was to examine the in vitro biological activity of Scolopendrid Pharmacopuncture, including the total poly-phenol content, DPPH radical scavenging, ABTS radical scavenging, Superoxide dismutase(SOD)-like activity, Nitrite scavenging ability. The total poly-phenol contents of Scolopendrid Pharmacopuncture was 35.859mg/L. Elctron donation ability on DPPH was 36.82%. The 2,2'-azinobis-3-ehtlbezothiazoline-6-sulfonic acid radical decolorization (ABTS) was 84.7%. The superoxide dismutase (SOD)-like activities of Scolopendrid Pharmacopuncture was 44.33%. The nitrite scavenging effects were pH dependent, and were highest at pH 1.5(45.2%) and lowest at pH 6.0(11.3%). We conclude that Scolopendrid Pharmacopuncture may be useful as potential sources of antioxidant.
The purpose of the present study was to investigate the effect of ethanol extracts from red pepper seeds on the antioxidative defense system and oxidative stress in rats fed a high fat high cholesterol diet. Rats were divided into four experimental groups which were composed of high fat high cholesterol diet group (HF), high fat high cholesterol diet with 0.1% ethanol extracts from red pepper seeds supplemented group (HEA), high fat high cholesterol diet with 0.2% ethanol extracts from red pepper seeds supplemented group (HEB) and high fat high cholesterol diet with 0.5% ethanol extracts from red pepper seeds supplemented group (HEC). Supplementation of ethanol extracts from red pepper seeds groups (HEA, HEB and HEC) resulted in significantly increased activities of hepatic glutathione peroxidase and catalase. Hepatic superoxide radical contents in microsome and mitochondria were significantly reduced in the groups supplemented with red pepper seeds ethanol extracts. Hepatic hydrogen peroxide content in the mitochondria was reduced in ethanol extracts from red pepper seeds supplemented groups. TBARS values in the liver were reduced in red pepper seeds ethanol extracts supplemented groups. Especially, HEB and HEC groups were significantly decreased compared to the HF group. Hepatic carbonyl values were significantly reduced in mitochondria in these supplemented groups. These results suggest that red pepper seeds ethanol extracts may reduce oxidative damage, by activation of antioxidative defense system in rats fed high fat high cholesterol diets.
Objectives : The present study was under taken to characterize chemical composition, antioxidant and cyto-protecting capacity of essential oil obtained from leaves of Liriodendron tulipifera L. Methods : Essential oil from the leafof L. tulipifera L. (EOLL) was extracted by hydro-distillation process and further its chemical composition was evaluated by GC-MS analysis. The in vitro antioxidant potential of the EOLL was determined by DPPH ●, ABTS ●+, superoxide and nitric oxide free radical scavenging activity using different concentrations in the range of 50-800 μg/mL. In addition, cyto-protecting property of the EOLLwas determined by MTT assay on Raw 264.7 macrophage cells challenged with hydrogen peroxide (H 2 O 2 ). Results : The result of GC-MS analysis showed presence of 34 volatile compounds, principally germacrene D, spathulenol, and α -cadinol in EOLL. The in vitro antioxidant assays of EOLL at the highest used concentration of 800 μg/mL showed 81.62, 84.29, 83.59 and 58.59% inhibition of DPPH ●, ABTS ●+, superoxide, and nitric oxide radicals, respectively. It also showed ferric reducing ability with 1310.04 mM Fe (II)/g of essential oil. The EOLL at three different concentrations (200, 400 and 800 μg/mL) protected the cells from H 2 O 2 -induced cell damage through scavenging intracellular ROS. Conclusion : The findings from the study suggest that essential oil isolated from leaves of L tulipifera L. is a potent sources of natural antioxidants, which could be used to treat the diseases associated with oxidative stress condition.
Background: The human protein methyl-transferase DOT1L catalyzes the methylation of histone H3 on lysine 79 (H3K79) at homeobox genes and is also involved in a number of significant processes ranging from gene expression to DNA-damage response and cell cycle progression. Inhibition of DOT1L activity by shRNA or small-molecule inhibitors has been established to prevent proliferation of various MLL-rearranged leukemia cells in vitro, establishing DOT1L an attractive therapeutic target for mixed lineage leukemia (MLL). Most of the drugs currently in use for the MLL treatment are reported to have low efficacy, hence this study focused on various natural compounds which exhibit minimal toxic effects and high efficacy for the target receptor. Materials and Methods: Structures of human protein methyl-transferase DOT1L and natural compound databases were downloaded from various sources. Virtual screening, molecular docking, dynamics simulation and drug likeness studies were performed for those natural compounds to evaluate and analyze their anti-cancer activity. Results: The top five screened compounds possessing good binding affinity were identified as potential high affinity inhibitors against DOT1L's active site. The top ranking molecule amongst the screened ligands had a Glide g-score of -10.940 kcal/mol and Glide e-model score of -86.011 with 5 hydrogen bonds and 12 hydrophobic contacts. This ligand's behaviour also showed consistency during the simulation of protein-ligand complex for 20000 ps, which is indicative of its stability in the receptor pocket. Conclusions: The ligand obtained out of this screening study can be considered as a potential inhibitor for DOT1L and further can be treated as a lead for the drug designing pipeline.
The participation of superoxide in initiating tissue damage derived from xenobiotics is best illustrated by paraquat intoxication. In the present study, the roles of superoxide dismutase and catalase on paraquat-induced cell injury were investigated using primary cultured rat skin fibroblast. The degree of cell injury was assassed by the conversion of reduced MTT to a blue formazan. Paraquat produced concentration-and time-related cell injury in cultured rat skin fibroblast. Paraquat induced-cell injury was aggravated by pretreatment of aminotriazol (AT: 10 mM), an catalase inhibitor, and attenuated by addition of catalase (100∼500 unit/ml). However, the effects of diethyldithiocarbamate (DDC : 10 mM), copper- and zinc-containing superoxide dismutase (Cu, Zn-SOD) inhibitor, and Cu, Zn-SOD on paraquat-induced injury were not significant. These results suggest that hydrogen peroxide might be more responsible factor than superoxide in the pathogenesis of paraquat-induced cell injury.
Objectives: This study was conducted to identify the protective effects of Chongmyunggongjin-dan (CMGJD) on Hydrogen peroxide (H2O2)-induced apoptosis mechanisms in C6 glial cells. Method: We used CMGJD after distilled water extraction, filtration, and lyophilization. The ROS scavenging effect was examined by fluorescence microscopy. Expression levels of proteins related to ROS generation were investigated by western blotting. Functional changes in organelles related to Reactive oxygen species (ROS) generation were investigated by immunoblotting and by verifying expression level of relevant enzymes. Results: The CMGJD extract protected the cells against H2O2-induced morphological changes and DNA fragmentation, inhibited the increase of Heme_oxygenase-1(HO-1) and the decrease in catalase, protected against the loss of mitochondrial membrane potential, inhibited disturbances of lysosomal function, and induced an increase in peroxisomes. Conclusion: CMGJD was confirmed to have a protective effect on H2O2-induced C6 glial cell death possibly by blocking the pathways causing damage to subcellular organelles, such as mitochondria, lysosomes, and peroxisomes. We assume that CMGJD will be effective for the prevention and treatment of ischemic stroke in a clinical environment.
To study the effects of Ramulus et Uncus Uncariae (REUU) on oxygen free radical-mediated damage by hydrogen peroxide $(H_{2}O_{2})$ on cultured spinal sensory neurons, in vitro assays such as MTT assay, NR assay, neurofilament enzymeimmuno assay (EIA), sulforhodamine B (SRB) assay, assay for lactate dehydrogenase (LDH) activity and assay for lipid peroxidation were used in cultured spinal dorsal root ganglion neurons derived from mice, Spinal dorsal root ganglion neurons were cultured in media containing various concentrations of $H_{2}O_{2}$ for 5 hours, after which the neurotoxic effect of $H_{2}O_{2}$ was measured by in vitro assay. The protective effect of the herb extract, Ramulus et Uncus Uncariae (REUU) against H2O2-induced neurotoxicity was also examined. The results are as follows. 1. In NR assay and MTT assay, $H_{2}O_{2}$ significantly decreased the cell viability of cultured mouse spinal dorsal root ganglion neurons according to exposure concentration in these cultures. An additional time course study was done on these cultures. 2. Cultured spinal dorsal root ganglion neurons which were exposed to various concentrations of $H_{2}O_{2}$ showed a quantitative decrease of neuronal cells by EIA and of total protein by sulforhodamine B (SRB) assay, while they showed an increase of both lipid peroxidation and LDH activity. 3. The effect of Ramulus et Uncus Uncariae (REUU) on $H_{2}O_{2}$ induced neurotoxicity showed a quantitative increase in both neurofilament and total protein, but showed a decrease of lipid peroxidation and LDH activity. These results suggest that $H_{2}O_{2}$ has a neurotoxic effect on cultured spinal dorsal root ganglion neurons from mice and that the herb extract, Ramulus et Uncus Uncariae (REUU), was very effective in protecting $H_{2}O_{2}$ induced neurotoxicity by decreasing lipid peroxidation and LDH activity.
Tall fescue (Festuca arundinacea Schreb.) is an important cool season forage plant that is not well suited to extreme heat, salts, or heavy metals. To develop transgenic tall fescue plants with enhanced tolerance to abiotic stress, we introduced an alfalfa Hsp23 gene expression vector construct through Agrobacterium-mediated transformation. Integration and expression of the transgene were confirmed by polymerase chain reaction, northern blot, and western blot analyses. Under normal growth conditions, there was no significant difference in the growth of the transgenic plants and the non-transgenic controls. However, when exposed to various stresses such as salt or arsenic, transgenic plants showed a significantly lower accumulation of hydrogen peroxide and thiobarbituric acid reactive substances than control plants. The reduced accumulation of thiobarbituric acid reactive substances indicates that the transgenic plants possessed a more efficient reactive oxygen species-scavenging system. We speculate that the high levels of MsHsp23 proteins in the transgenic plants protect leaves from oxidative damage through chaperon and antioxidant activities. These results suggest that MsHsp23 confers abiotic stress tolerance in transgenic tall fescue and may be useful in developing stress tolerance in other crops.
Objectives : Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) has been used as a prescription for stroke, senile and vascular dementia, ischemic brain and heart damage in Oriental traditional medicine. However, there is little known about the mechanism by which the water extracts of Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) rescue cells fromthese damages, and little is known about the protective mechanisms of Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) on oxidative stress in neuronal cells. Therefore, we have investigated the role of Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) on serum and glucose deprived apoptosis in PC12 cells. Methods : PC12 Cells have been used extensively as a model for studying the cellular and molecular effects of neuronal cells. The viability of cells was measured by MIT assay. We used DNA fragmentation and caspase 1, 2, 3, 6, 9-likeproteases activation assay. Transcriptional activation of NF-kB was assessed by using electrophoretic mobility shift assay. Results : Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) rescued PC12 cells from apoptotic death by serum and glucose deprivation in a dose-dependent manner. The nuclear staining of PC12 cells clearly showed that Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) attenuated nuclear condensation and fragmentation, which represent typical neuronal apoptotic characteristics. Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) also prevents fragmentation of genomic DNA and activation of caspase 3-like protease in serum and glucose deprived PC12 cells. Furthermore, Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) reduced the activation of NF-kB by serum and glucose-deprived apoptosis. Conclusions : These findings suggest that serum and glucose deprivation induces reduced glutathione (GSH) depletion, and consequently, apoptosis through endogenously produced reactive oxygen species in PC12 cells. Also, our data indicated that Boyanghwanoh-tang (Buyanhaiwu-tang) has protective effects against the serum and glucose deprived deaths of PC12 cells, which are mediated by the generation of GSH that, in turn, can reduce oxidative stress caused by reactive oxygen species (ROS) such as hydrogen peroxide.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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