• Title/Summary/Keyword: Hybridoma

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폐디스토마에 대한 Mmonoclonal Antibody생산 세포주개발에 대한 연구 (Characterization of Mouse Hybridoma Producing Monoclonal Antibody Paragonimus westermani)

  • 고광삼;이숙영;이근배
    • 미생물학회지
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    • 제23권1호
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    • pp.64-68
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    • 1985
  • 페디스토마 성충의 단백질을 정제하여 이를 항원으로 면역시킨 mouse의 spleen cell과 myeloma cell을 세포융합 시킨 결과 융합율은 56% 이었고. 3차 cloning한 후의 항체생산율은 89% 이였으며, 이들 융합세포로 부터 IgM을 생산하는 hybridoma clone과 IgG을 생산하는 hybridoma clone을 얻었다. IgM을 생산하는 hybridoma clone의 supernate는 antibody titer가 희석농도 1 : 64까지 양성이었고. IgG을 생산하는 hybridoma clone의 supernate는 1 : 256까지 양성이었다.

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T 세포 하이브리도마에 의한 ${\alpha}2-Macroglobulin$의 생산 (Production of ${\alpha}2-Macroglobulin$ by a T Cell Hybridoma)

  • 이종길;한성순
    • 약학회지
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    • 제38권6호
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    • pp.715-720
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    • 1994
  • ${\alpha}2-macroglobulin$ $({\alpha}2-M)$ has been shown to have a variety of activities. One of those activities is the suppression of immune response. Characterization of the immunosuppressive factor secreted by a T cell hybridoma showed that ${\alpha}2-M$ was produced and secreted from the T cell hybridoma. ${\alpha}2-M$ was produced abundantly from the T cell hybridoma when cultured as ascites. The isolation and identification of the ${\alpha}2-M$ were studied using affinity chromatography and N-terminal amino acid sequencing. The extended observations were that the ${\alpha}2-M$ produced by the T cell hybridoma suppresses mixed lymphocyte reaction.

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쥐 하이브리도마 세포배양을 위한 무혈청 배지개발(II) -각 성분의 역할과 최소배지의 결정- (Development of Serum-free Media for the Culture of Mouse Hybridoma (II) ; Determination of the Role of Each Component and a Minimum Composition Media)

  • 곽원재;조보연;최태부
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제17권5호
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    • pp.489-493
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    • 1989
  • 쥐 하이브리도마 Alps 25-3를 이용하여 무혈청 배지 KM3의 각 성분이 세포증식과 항체생성에 미치는 영향을 조사하여 무혈청 배지를 최소화한 KMS를 결정하였다. Alps 25-3에 영향을 미치는 것으로 조사된 transferrin, ethanolamine 그리고 BSA만을 혼합하여 결정한 KMS를 다른 쥐 하이브리도마인 A4W, KW 그리고 HCGK에 적용시켰다. KM5를 KM3와 비교하였을 때 세포증식과 항체생산이 거의 동일한 양상을 보였다. 그러나 혈청배지와 비교하여 보면 최고 세포농도는 50-90%, 최종 단일클론항체의 농도는 85-100%의 수준을 보였다. 본 연구의 결과로 쥐 하이브리도마 세포를 무혈청 배지에서 배양시킬 때 필수적으로 첨가기어야 하는 성분들이 조사되었으므로 대량배양에 응용하거나 대사를 연구하는데 유용하게 이용되어지리라 본다.

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소나무재선충[Bursaphelenchus xylophilus (Steiner and Buhrer) Nickle]의 GaLectin에 대한 특이적인 단클론 항체 제작과 진단에의 활용 (Development of Monoclonal Antibodies Specific to Galectin of Pine Wood Nematode, Bursaphelenchus xylophilus (Steiner and Buhrer) Nickle and Their Utilization for Detection of Pine Wood Nematodes)

  • 김아영;김영하;최보혜;트랑뉴겐;윤경재;이시혁;한혜림;고영호
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제57권1호
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    • pp.7-13
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    • 2018
  • 소나무재선충(pine wood nematode, PWN) 감염 소나무를 현장에서 신속하게 진단을 할 수 있는 방법은 현재 없다. 본 연구에서는 PWN특이적인 항원으로 알려진 PWN-GaLectin을 baculovirus발현체계로 발현시켜서 총 1,464개의 fusion hybridoma 세포 주 라이브러리를 제작 하는 항원으로 이용하였다. 총 1,464개의 fusion hybridoma 세포 주 중, PWN-GaLectin에 대한 높은 반응을 보이는 62개의 fusion hybridoma 세포 주를 선별했다. 이들 중, 표준 PWN 감염소나무 PBS추출물과 PWN 단백질 추출물에 강한 반응을 보이는 세포 주 12개를 선별하여 단클론 항체(monoclonal antibody, Mab) 분비세포 주 확립을 위한 limited dilution을 실시하였다. Mab분비세포 주 확립을 위해서 표준 PWN 감염소나무 추출물에 대한 반응이 표준 정상 소나무 추출물 보다 높은 세포 주들을 선별했다. 그리고 추가로 PWN 단백질 추출물에 대해서 3종의 비 병원성 선충 단백질 추출물 보다 높은 반응을 보이는 세포 주들도 선별, 확립했다. 본 연구에서 확립된 Mab들을 우리는 현장과 실험실에서 사용할 수 있는 신속진단키트의 개발에 이용할 수 있을 것이다.

Prevalence of Listeria monocytogenes and Related Species in Minimally Processed Vegetables

  • Cho, Sun-Young;Park, Boo-Kil;Moon, Kwang-Deog;Oh, Deog-Hwan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제14권3호
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    • pp.515-519
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    • 2004
  • Listeria spp. were isolated from a total of 402 naturally contaminated domestic ready-to-eat (RTE) vegetable samples by the conventional Food and Drug Administration protocol and confinned by API-Listeria kit. Also, the susceptibility to 12 antibiotics, polymerase chain reaction (PCR) assay for virulence gene of pathogenic Listeria monocytogenes isolates, and in vitro virulence assay using myeloma and hybridoma cells from murine and human sources were tested. Among the samples, 17 samples (4.2%) were found to be contaminated with Listeria species. Among the 17 strains of Listeria spp. isolates, only 2 strains (11.8%) of L. monocytogenes and 15 strains (88.2%) of L. innocua were identified. Antibiotic susceptibility test showed that the Listeria spp. isolates were very susceptible to the antibiotics tested, except for nalidixic acid. Among 17 strains of Listeria spp., PCR analysis showed that 2 strains of L. monocytogenes isolates proved to have a virulence hly gene, but none of L. innocua had the hly gene. Also, hybridoma Ped-2E9 cells assay showed that only L. monocytogenes isolates killed approximately 95-99% hybridoma cells after 6 h, but L. innocua isolates had about 0-5% lethal effect. These results indicate that PCR assay with hly primer or hybridoma Ped-2E9 cells assay could be used as a good monitoring tool or in vitro virulence test for L. monocytogenes.

Kinetic Analysis of the Effect of Cell Density on Hybridoma Cell Growth in Batch Culture

  • Lee, Eun-Yeol
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제7권2호
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    • pp.117-120
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    • 2002
  • The effect of cell density on cell growth was investigated in a suspension batch culture of hybridoma cells. The specific growth rate was found to increase with increasing initial cell density and then to decrease with further increases in initial cell density. In order to quantitatively describe the dependence of specific growth rate on cell density, a kinetic model is proposed, which satisfactorily represents the experimental data.

하이브리도마 세포배양에서 암모늄 이온의 영향 및 고정화 흡착제에 의한 암모늄 이온의 동시제거 (Ammonium Ion Effects and Its In Situ Removal by Using Immobilized Adsorbent in Hybridoma Cell Culture)

  • 정연호;이해익
    • KSBB Journal
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    • 제11권3호
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    • pp.329-339
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    • 1996
  • The effects of ammonium ion on cell growth kinetics, monoclonal antibody productivity, and cell metabolism of hybridoma cells were investigated. The mouse-mouse hybridoma cell line VlIIH-8 producing mouse IgG2a was used as a model system. Ammonium ion showed an inhibitory effect on cell growth and monoclonal antibody production. New immobilized adsorbents were developed for the reduction of the inhibitory effect of ammonium ion. The ammonium ion selective zeolite, Phillipsite-Gismondine was entrapped in calcium alginate bead or in dialysis membrane and applied to the hybridoma cell culture system for the in situ removal of ammonium ion from culture media. The effects of ammonium the both serum supplemented and serum free media on the cell growth were studied by applying immobilized adsorbents of calcium alginate bead type. The results demonstrated a substantial enhancement in cell growth. Applying immobilized adsorbents of dialysis membrane type to serum supplemented media also resulted in the stimulation of cell growth, cell viability and monoclonal antibody production.

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Monoclonal antibody의 대량 생산을 위한 hybridoma cell의 생존능 증가에 관한 연구

  • 하성진;임선하;이종원;조무환
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XII)
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    • pp.561-562
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    • 2003
  • Monoclonal antibody를 대량으로 생산하기 위한 hybridoma cell의 생존능 개선을 위한 실험에서 각각의 항생제에 대해서 G418은 10ug/ml(figure 1), ciprofloxacin 은 lug/ml 또는10ug/ml 그리고 minocycline은 1ug/ml정도에서 가장 효과가 높아보였다. 다양한 산소 농도에서 실험과 각각 항생제의 monoclonal antibody 생산에 미치는 영향을 실험하여서monoclonal antibody를 가장 경제적으로 대 량 생산할 수 있는 조건을 찾을 수 있을 것으로 사료된다.

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