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한국에 산재하는 사람 Caliciviruses의 다양한 유전자군: 1987-1994년 (Genotypic Variations among Human Caliciviruses in Korea: 1987-1994)

  • 남기범;김지애;양재명;김경희
    • 대한바이러스학회지
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    • 제27권2호
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    • pp.185-195
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    • 1997
  • Sequence comparison of the RNA-dependent RNA polymerase of human caliciviruses (HuCVs) from Korean children with gastroenteritis revealed significant genetic variation among them. cDNA clones were produced from the HuCVs collected from pediatric population during a period of 1987-1994. The application of reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) using primers directed to the RNA-dependent RNA polymerase region within ORF1 of Norwalk virus (NV) showed that 13.7% of HuCVs yielded PCR products of similar size to the NV prototype, NV8FIIa/68/US, with exceptions of HuCV 185/87/Korea and HuCV 1115/90/Korea. Computer analyses showed that the PCR products had a continuous protein encoding frame on the positive strand, and contained GLPSG and YGDD amino acid motifs at the predicted distance from primers. Alignment of the amino acid sequences of HuCVs with previously published sequences for Snow Mountain agent (SMA), NV, and Sapporo/82/Japan indicated that these strains can be divided into four major genogroups. There were 10 (45%) SMA-like CVs, one (4.5%) NV-like HuCVs, two (9%) Sapporo-like HuCVs, and nine (41%) unidentified HuCVs. This fourth genogroup should be investigated further. HuCV 185/87/Korea and HuCV 1115/90/Korea, Sapporo-like CVs, were genetically distinct from previously characterized HuCVs and more closely related to known animal CVs. One of the animal CV-like strain, HuCV 185/87/Korea, showed nucleotide and amino acid homology of only 67% and 73% with the prototype Sapporo/82/Japan. Further characterization of animal and human CV genomes and studies of possible cross-transmission of CVs from animals to humans are likely to be beneficial in understanding the epidemiology of HuCVs.

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계란의 유통 중 품질예측을 위한 품질지표 선정 (Choosing quality indicators for quality prediction of egg in circulation)

  • 이혜옥;김지영;김병삼
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제21권5호
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    • pp.609-617
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    • 2014
  • 본 연구는 국내에서 유통되고 있는 계란의 유통 중 신선도를 예측하기 위하여 적정 품질지표를 선정하고자 수행되었다. 산란 직후 0, 10, 20 및 $30^{\circ}C$에서 저장하면서 중량감모율, 비중, 색도, 난황계수, 난백계수, Haugh unit(HU), pH 및 관능특성 변화를 조사한 후 각 품질특성과 관능적 기호도와의 상관관계를 분석하였다. 저장온도에 따른 중량감모율, 비중, 난황계수, 난백계수 및 HU와 기호도와의 상관관계는 모든 온도 조건에서 유의적인 상관관계를 나타내었다(p<0.05). 특히 중량감모율과 기호도와의 상관관계는 0, 10, 20 및 $30^{\circ}C$에서 각각 r = -0.78, r = -0.93, r = -0.95 및 r = -0.99로 난백계수와 기호도와의 상관관계는 r = 0.66, r = 0.89, r = 0.89 및 r = 0.93으로 그리고 HU와 기호도와의 상관계수는 r = 0.64, r = 0.92, r = 0.96 및 r = 0.98로 유의적으로 온도가 높을수록 높은 상관계수를 보였다(p<0.01). 반면에 색도와 pH는 각기 상이한 결과를 나타내어 품질평가 자료로 이용하기에는 추가 연구가 필요한 것으로 여겨진다. 따라서 모든 저장온도에서 관능적 기호도와 높은 상관관계를 나타낸 중량감모율, 비중, 난황계수, 난백계수 및 HU의 변화를 계란의 유통 중 신선도 예측을 위한 품질지표로 선정하여 적용하는 것이 적절한 것으로 판단되었다.

토양 휴민(Humin)의 분자구조 특성과 Phenanthrene 흡착상수와의 상관관계에 대한 연구 (A Study on the Correlations between Molecular Structures of Soil Humins and Sorption Properties of Phenanthrene)

  • 이두희;엄원숙;신현상
    • 대한환경공학회지
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    • 제35권12호
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    • pp.897-905
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    • 2013
  • 본 연구에서는 불용성 토양 휴믹물질(HS)인 토양 휴민(Hu)을 대상으로 페난트린(PHE)과의 흡착상수($K_{OC}$, n)를 조사하였고, 각 휴민 분자의 물질특성과 흡착상수와의 상관관계를 조사하였다. 토양 휴민은 한라산 토양을 포함한 국내 5개 지역의 토양과 국제휴믹학회(IHSS) 표준토양 및 이탄토(Peat)에서 분리한 7종을 사용하였으며, 원소성분비 및 고체 $^{13}C$ NMR을 이용한 탄소형태별 분포(%) 등을 조사하였다. 토양 휴민은 알킬탄소를 주요 성분으로 하는 높은 지방족 탄소함량(57.1~72.3%)을 가진 분자구조 특성을 보였으며, 추출원별 알킬탄소의 함량($C_{Al-H,C}$, %)은 화강암 기원의 토양 Hu (26~42) > 화산재토양 기원의 HL Hu (23.9) > Peat Hu (14.0)의 순으로 나타났다. 토양 휴민의 물질특성과 PHE 흡착상수의 상관성 해석결과, 유기탄소 표준화분배계수($K_{OC}$, mL/g) 값은 알킬탄소 함량(%)과 높은 상관성($r^2$ = 0.77, p < 0.05)을 보인 반면, Freundlich plot을 통해 얻은 비선형 흡착상수(n)는 H,C-치환 방향족탄소 함량($C_{Ar-H,C}$, %)과 높은 상관성($r^2$ = (-)0.74, p < 0.05)을 보였다. $K_{OC}$ 값은 분자 극성도(PI, N+O)/C)와도 높은 상관성($r^2$ = (-)0.74, p < 0.1)을 보여, 분자극성도 값도 소수성유기물의 흡착능 예측에 유용한 물질특성 인자임을 확인하였다. 이상의 결과로 부터 토양휴민 분자 내 알킬탄소의 함량이 높거나, 분자극성도가 낮을수록 PHE의 흡착능이 증가하며, 방향족탄소 함량이 높을수록 흡착의 비선형성(nonlinear sorption)이 증가하는 경향이 있음을 알 수 있었으며, 이러한 토양 휴민의 PHE 흡착특성은 dual reactive mode 흡착모델에 적용하여 해석하였다.

Development of diagnostic method for human Astrovirus with rapid, specific and high sensitivity using loop-mediated isothermal amplification method

  • Lee, Jin-Young;Rho, Jae Young
    • 농업과학연구
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    • 제47권1호
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    • pp.173-182
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    • 2020
  • Human Astrovirus (HuAstV), known as a waterborne virus, is a group IV positive-sense single-stranded RNA that belongs to Astroviridae. The first outbreak of HuAstV was reported in England in 1975. HuAstV can exist not only among clinical patients but also in various water environments, such as water for agriculture and vegetables. For diagnosis of HuAstV from water samples, a polymerase chain reaction (PCR) system has been developed. However, the PCR-based diagnostic method has problems in field application, such as reaction time, sensitivity and specificity. For this reason, in this study we developed the loop-mediated isothermal amplification assay (LAMP) system, aimed specifically at HuAstV. Three prepared LAMP primer sets were tested by specificity, non-specificity and sensitivity; one LAMP primer set was selected with optimum reaction temperature. The developed LAMP primer set reaction conditions were confirmed at 62℃, and detection sensitivity was 1 fg/μL. In addition, restriction enzyme HaeIII (GG/CC) was introduced to confirm that the LAMP reaction was positive. As a result, selected LAMP primer set was 100 - 1000 times more specific, rapid, and sensitive than conventional-nested PCR methods. For verification of the developed LAMP assay, twenty samples of cDNA from groundwater samples were tested. We expect that the developed LAMP assay will be used to diagnose HuAstV from various samples.

재조합 사람 과립구 콜로니 자극인자인 C,J50001의 중합체의 생물학적 활성과 급성독성에 관한 연구 (Biological Activity and Acute Toxicity of the Multimers of CJ500011 Recombinant Human Granulocyte Colony-stimulating Factor (rHuG-CSF), Produced in E. coli)

  • 하석훈;이현수;김기완;정종상;김달현
    • Biomolecules & Therapeutics
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    • 제6권1호
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    • pp.89-94
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    • 1998
  • CJ50001 is a recombinant human granulocyte colony-stimulating facto, (rHuG-CSF) that stimulates the formation of neutrophils from bone marrow stem cells. It was produced in E. colt and purified through refolding and several processes. We produced CS970125(300) using purified C150001 and additives in order to test the stability of CJ50001. When CS970125(300) was stored at 50'S for more than 1 week, high molecular weight proteins were formed and those proteins were detected by non-reducing SDS-PAGE, gel filtration HPLC, and Western blot. Those proteins showed single band at the same position of CJ50001 in reducing SDS-PAGE. These data indicated that those high molecular weight proteins were the multimers of C150001. In biological assays, iu viro and in viro, the multimers did not have biological activity and inhibitory action to that of CJ 50001. The mutimers did not induce toxicity in mice and rats in acute toxicity test. These results suggest that if Cs970125(300) containing CJ50001 is stored at 5$0^{\circ}C$, CJ50001 will be the multimers that do not have biological activity and inhibitory effect to CJ50001 and do not induce acute toxicity.

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신생 백서의 저산소성 허혈성 뇌손상에서 NMDA receptor 조절을 통한 유전자 재조합 인 에리스로포이에틴의 신경보호 (Neuroprotection of Recombinant Human Erythropoietin Via Modulation of N-methyl-D-aspartate Receptors in Neonatal Rats with Hypoxic-ischemic Brain Injury)

  • 장윤정;서억수;김우택
    • Neonatal Medicine
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    • 제16권2호
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    • pp.221-233
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    • 2009
  • 목 적 : 신장에서 분비되어 적혈구를 생산하는 빈혈제로 알려진 에리스로포이에틴(Erythropoietin, EPO)은 단순히 피를 만드는 조혈기능 뿐 아니라 최근 신경계 보호 및 신경강화 효과가 있다고 발표되고 있지만 주산기 가사로 인한 저산소성 허혈성 뇌병증의 치료제로서 그 기전이 명확하게 밝혀지지 않았다. 저자들은 유전자 재조합 인 에리스로포이에틴(recombinant Human EPO, rHuEPO)을 이용하여 주산기 저산소성 허혈성 뇌병증의 치료제로서 N-methyl-D-aspartate (NMDA) 수용체와 관련된 흥분성 독성작용을 통한 조절 등 그 기전을 알아보고자 하였다. 방 법 : 재태기간 19일된 태아 백서의 대뇌피질 세포를 배양하여 정상산소군은 5% $CO_2$ 배양기(95% air, 5% $CO_2$)에 두었고, 저산소군과 농도별 뇌손상 전 rHuEPO 투여군(1, 10, 100 IU/mL)은 1% $O_2$ 배양기(94% $N_2$, 5% $CO_2$)에서 6시간 동안 뇌세포손상을 유도하였다. 세포성장과 생존력을 평가하기 위해 MTT 실험을 시행하였다. 동물 모델에서는 생후 7일된 신생백서의 좌측 총 경동맥을 결찰한 후 6개 군; 정상산소군, sham-operated군, 저산소-허헐성군, 저산소-허헐성+vehicle군, 저산소-허헐성 손상 전 rHuEPO 투여군, 저산소-허헐성 손상 후 rHuEPO 투여군으로 나누었고, 저산소-허헐성 손상은 특별히 제작한 통속에서 2시간 동안 8% $O_2$ (8% $O_2$, 92% $N_2$)에 노출시켰다. rHuEPO은 뇌손상 전후 30분에 체중 kg당 1000 IU를 투여하였고, 저산소-허헐성 손상 후 7일째 조직을 실험하였다. 적출한 조직으로 H&E 염색을 하여 뇌손상을 형태학적으로 관찰하였다. 세포배양 및 동물실험에서 NMDA 수용체의 아단위인 NR1, NR2A, NR2B, NR2C, NR2D를 이용하여 실시간 중합효소연쇄반응을 실시하였다. 결 과 : 저산소군에서 세포 생존률은 정상산소군보다 60% 감소하였으며, rHuEPO 투여군(1, 10 IU/mL)은 80% 증가하였다. rHuEPO 투여군(100 IU/mL)은 회복되지 않았다. 우측 반구 대비 좌측 반구의 범위는 정상산소군 98.9%, sham-operated군 99.1%, 저산소-허헐성군 57.1%, 저산소-허헐성+vehicle군 57.0%, 저산소-허헐성 손상 전 rHuEPO 투여군 87.6%, 저산소-허헐성 손상 후 rHuEPO 투여군 91.6%으로 나타났다. NMDA 수용체의 아단위 생체외 실험에서 실시간 중합효소연쇄반응의 결과 NMDA 수용체 아단위 mRNA의 발현은 rHuEPO 투여군에서 저산소군보다 모두 증가하였다. 결 론 : 본 연구에서 rHuEPO은 흥분성 독성작용과 관련되어 NMDA 수용체를 조절하면서 저산소성 허헐성 뇌손상을 보호하는 것을 알 수 있었다.

심장 CT 검사시 ASIR 적용에 따른 선량 평가 (Radiation dose Assesment according to the Adaptive Statistical Iterative Reconstruction Technique of Cardiac Computed Tomography(CT))

  • 장현철;김현주;조재환
    • 한국콘텐츠학회논문지
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    • 제11권5호
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    • pp.252-259
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    • 2011
  • 심장 CT 검사시 적응식 통계적 반복 재구성법을 이용하여 체질량 지수에 따른 관전압 변화에 대한 방사선 피폭선량에 대하여 알아보고자 하였다. 심장 CT 검사를 시행 받은 환자를 BMI에 따른 관전압에 따라 네 개의 군으로 나누어[A군(n=20), Non-ASIR, BMI < 25, 100 kVp; B군(n=20), Non-ASIR, BMI > 25, 120 kVp; C군(n=20), 40% ASIR BMI < 25, 100 kVp; D군(n=20), 40% ASIR, BMI > 25, 120 kVp] 대동맥 중심부와 우관상동맥, 좌전하행동맥에 관심영역을 설정 한 후 CT값(number)측정하여 평균값과 표준편차를 분석하였다. 영상 잡음은 A군과 C군 사이에는 통계적으로 유의한 차이가 있었으며, A군이 C군보다 노이즈가 유의하게 높았다(group A, 494 ${\pm}$ 32 HU; group C, 482 ${\pm}$ 48 HU: P<0.05). 또한, B군과 D군 사이에는 통계적으로 유의한 차이가 있었으며, B군이 D군보다 노이즈가 유의하게 높았다(group B, 510 ${\pm}$ 45 HU; group D, 480 ${\pm}$ 82 HU: P<0.05). 영상의 정성적 분석에서 관상동맥 분절별로 임상평가 한 결과 평균값은 A군은 4.13${\pm}$0.2, B군은4.18${\pm}$0.1, C군은 4.1${\pm}$0.2, D군은 4.15${\pm}$0.1로 A군, B군, C군, D군 모두 통계적으로 유의한 차이가 없었으며(P>0.05), 모든 군에서 진단에 적절한 영상을 보였다. 피폭선량은 A군은 8.6${\pm}$0.9, B군은 14.9${\pm}$0.4, C군은 5.8${\pm}$0.5, D군은 10.1${\pm}$0.6 mSv 로 나타났다.

한국형 사람 Caliciviruses의 RNA-Dependent RNA Polymerase Diversity (Human Caliciviruses in Korea: A New Prevalent Group Defined by RNA-Dependent RNA Polymerase Diversity)

  • 한동표;김지애;양재명;김경희
    • 대한바이러스학회지
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    • 제27권1호
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    • pp.1-8
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    • 1997
  • Human caliciviruses (HuCVs) cause sporadic cases and outbreaks of acute gastroenteritis (AGE). Three major genogroups of HuCVs have been described including the Norwalk virus (NV)-, the Snow Mountain virus (SMA)-, and the Sapporo-genogroups. This study describes the detection and genetic variation of HuCVs from hospitalized infants with AGE in Korea by RT-PCR and sequencing. The cDNA fragments of 206 to 470bp corresponding to the region of 3 primer pairs (36/35, 35/51 or 3/51) in the polymerase region of NV were generated. Of 185 stools screened, 8% were positive by RT-PCR and their sequences showed that all strains contained the GLPSG and YGDD motifs which are conserved for HuCVs. Amino acid (aa) sequence analysis showed that these strains can be divided into 3 major genogroups. High conservation was observed in that one strain shares 100% of aa sequence with Southampton virus, another shares 99% with the Sapporo virus, and six strains share 90 to 95% with Snow Mountain virus. However, significant sequence variation was also found in other strains. This study indicates that all major genogroups of HuCVs are circulating in Korea.

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사람 선유아세포 인터페론(Hu IFN-$\beta$)에 대한 단 Clone성 항체생산세포의 조작과 그 성질에 관한 연구 (Preparation and Characterization of Cell Hybrids Producing a Monoclonal Antibody to Human Fibroblast Interferon (Hu IFN-$\beta$))

  • 김현수;현형환;최경희;문홍모;유무영
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제14권3호
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    • pp.219-223
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    • 1986
  • 사람 선유아세포 인터페론의 정제에 사용되는 단 clone성 항체생산 세포주를 조작하기 위하여 BA-LB/C mouse의 복강과 꼬리정맥을 통하여 HuIFN-$\beta$를 면역화시키고 그 비장세포(spleen cells) 와 NS-O 세포주를 세포융합 시켰다. 융합된 1300 hybrids를 ELISA방법으로 선별하고 soft agarose 방법과 limiting dilution방법으로 subcloning하여 높은 항체를 생성하는 것으로 판명된 11 hybrids를 재선별 하였다. 재선별된 11 hybrids 각각의 항체형 (Ig type)을 조사하고 최종 Protein A-sepharose와 친화성이 높은 IgG 2a/형의 clone # 4-1-19와 clone # 551-4-1을 선별하여 배양된 세포를 각각 nude(nu/nu) mouse 및 BALB/c mouse 복강에 접종배양 하였다. 이들 mouse복강액으로 부터 얻은 ascites fluid를 protein A-sepharose를 이용한 affinity column분획으로 항체를 정제하였으며 ascites fluid $m{\ell}$당 약 4mg의 정제된 항체를 얻을 수 있었고 SDS-polyacrylamide gel상에서 전기영동 시킨 결과 분자량 14-16만 dalton으로 추정되는 항체를 확인할 수 있었다.

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Triterpenoid Saponins from Elsholtzia bodinieri

  • Hu, Hao-Bin;Zheng, Xu-Dong;Hu, Huai-Sheng;Jian, Yu-Feng
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제28권9호
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    • pp.1519-1522
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    • 2007
  • A new oleanane-type triterpenoid estersaponin, bodinierin C (1), along with two known saponins, mazusaponin I (2) and ciwujianoside C (3), were isolated from the water-soluble part of the root barks of Elsholtzia bodinieri. The structure of bodinierin C was characterized by spectroscopic means and chemical hydrolysis as 3β -Ocaffeoyl- 23-hydroxylechinocystic acid 28-O-α -L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β- D-glucopyranosyl ester. The known compounds were identified by comparing their spectral data with those of authentic samples or data reported in the literature. All compounds were firstly isolated from Elsholtzia bodinieri family.