The Osaeg hotspring (long. $128^{\circ}$ 56'E, tat. $37^{\circ}$ 06'N) located in the northester part of Kangwon-do, Korea. The pH value of the hot spring water is 8.31, and the EC, $SO_4$, F and Na are 196 ${\mu}\textrm{s}$/cm, 10.88 mg/L, 8.19 mg/L, and 37.07 mg/L, respectively. The ocherous precipitates are precipitated on the stream bottom of Osaeg hot spring drainage. X-ray diffraction analysis (XRD), scanning electron microscopy (SEM) and stereo-microscope were used to analyze the precipitates. X-ray diffraction analysis shows that the precipitates consist mainly of poorly crystalline materials and messelite. Many spherical and rod-shaped bacteria-like forms were observed in the precipitates.
In the present study, the isolation of selenium (Se)-enriched bacteria from rumen fluid and hot spring water was carried out. Rumen fluid samples were taken from cannulated goats fed a basal diet and the water samples were collected from Selayang hot spring, Selangor-Malaysia. A total number of 140 Se-tolerant isolates were obtained aerobically using an Se-enriched medium and spread plate technique. All the isolates were initially screened for the ability to transform the Se-containing medium to a red-orange culture using a spectrophotometer. Twenty isolates of dark red-orange medium were selected for a screening of the highest Se-containing protein accumulating strains using the dialysis technique and icp.ms to measure the Se content. Four isolates, identified as Enterobacter cloacae (ADS1, ADS7, and ADS11), and Klebsiella pneumoniae (ADS2) from rumen fluid origin, as well as, one isolate from hot spring water (Stenotrophomonas maltophilia (ADS18)), were associated with the highest biomass organic Se-containing protein when grown in a medium enriched with $10{\mu}g/ml$ sodium selenite. In addition, around $50{\mu}g/100{\mu}g$ of the absorbed inorganic Se was accumulated as an organic form. Organic Se-containing protein in all the selected strains showed antioxidant properties in the range of 0.306 to 0.353 Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) mg/ml. Therefore, these strains may offer a potential source of organic Se due to their Se-tolerant nature and higher biomass organic to inorganic Se ratio.
Observed trends in climate change, globalization and an aging population have an effect on public health conditions in Korea, prompting a reevaluation of current environmental regulations. In this study, we evaluated the performance of the total coliform (TC) standard, which is the only microbiological standard in the current regulation regime for hot spring water, by estimating correlation with the presence/absence of Legionella, a non-fecal opportunistic pathogen with heat-tolerance. Microbiological data in 7 studies that surveyed Legionella in hot spring waters were subjected to meta-analyses with the odds ratio (OR) as the effect size. The presence/absence of Legionella was significantly correlated to TC levels [OR = 3.1(1.5–6.4, 95% CI), p = 0.002]. Due to there being no direct explanation as to the reason for the occurrence of TC, mesophilic fecal bacteria, being coupled with Legionella presence, the mechanism of the correlation between the two kinds of bacteria was further investigated. Legionella presence was more prevalent with a high heterotrophic plate count [HPC; 4.0(2.2–7.2); p < 0.001] and water temperature [4.3(1.4–13.6), p = 0.011] when the temperature range was <40℃. However, it was reverse-correlated with water temperature when the temperature was >50℃ [0.2(0.1–0.4), p < 0.001]. Therefore, bacterial standing crops in hot spring waters appear to be determined by water temperature in general, and this forces TC and Legionella levels be correlated. In accordance with this relationship, HPC rather than TC reflect the levels of non-fecal contamination better. Therefore, employing HPC as the sole microbiological standard, or adding HPC into the current standard of hot spring water assessment, is suggested as a proactive measure to prevent health issues arising from contamination.
An extracellular agarase was purified from Bacillus sp. BI-3, a thermophilic agar-degrading bacterium isolated from a hot spring in Indonesia. The purified agarase revealed a single band on sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, with an apparent molecular mass of 58 kDa. The optimum pH and temperature of the agarase were 6.4 and $70^{\circ}C$, respectively. The activity of the agarase was stable at high temperatures, and more than 50% activity was retained at $80^{\circ}C$ for 15 min. Furthermore, the enzyme was stable in the pH range of 5.8-8.0, and more than 60% of the residual activity was retained. Significant activation of the agarase was observed in the presence of $K^+$, $Na^+$, $Ca^{2+}$, $Mg^{2+}$, and $Sr^{2+}$; on the other hand, $Ba^{2+}$, $Zn^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Co^{2+}$, $Fe^{2+}$, and EDTA inhibited or inactivated the enzyme activity. The components of the hydrolytic product analyzed by thin-layer chromatography showed that the agarase mainly produced neoagarobiose. This study is the first to present evidence of agarolytic activity in aerobic thermophilic bacteria.
The rapid development of the poultry industry has led to the production of large amounts of manure, which produce substances like hydrogen sulfide ($H_2S$) that contribute to odor pollution. $H_2S$ is a highly undesirable gas component and its removal from the environment is therefore necessary. Sulfur-oxidizing bacteria (SOB) are widely known to remove contaminating $H_2S$ due to their ability to oxidize reduced sulfur compounds. In this study, three potential SOB (designated AH18, AH25, and AH28) that were previously isolated from a hot spring in Malaysia were identified by 16S rRNA gene analysis. Laboratory-scale biological deodorization experiments were conducted to test the performance of the three isolates-in the form of pure or mixed cultures, with the cells immobilized onto alginate as a carrier-in reducing the $H_2S$ from chicken manure. On the basis of 16S rRNA phylogenetic analysis, isolate AH18 was identified as Pseudomonas sp., whereas isolates AH25 and AH28 were identified as Achromobacter sp. The most active deodorizing isolate was AH18, with an $H_2S$ reduction rate of 74.7% (p < 0.05). Meanwhile, the reduction rates for isolates AH25 and AH28 were 54.2% and 60.8% (p > 0.05), respectively. However, the $H_2S$ removal performance was enhanced in the mixed culture, with a reduction rate of 81.9% (p < 0.05). In conclusion, the three potential SOB isolates were capable of reducing the $H_2S$ from chicken manure in the form of a pure culture immobilized on alginate, and the reduction performance was enhanced in the mixed culture.
This study was performed to obtain the thermostable $\beta$-glycosidase producing bacteria from hot spring of volcanic area at Atagawa in Japan. KNOUC 202 was selected because it showed thermostable $\beta$-glycosidase activity in sodium phosphate buffer(pH 6.8) at $70^{\circ}C$ for 4h, and it was identified. The strain was aerobic, asporogenic bacilli, immobile, gram negative, catalase positive, oxidase positive, and pigment-producing. Optimum growth was at $70~72^{\circ}C$, pH 7.0~7.2, and it could grow in the presence of 3% NaCl. The main fatty acids in cell were iso-15:0 and iso-l7:0. 16S rRNA sequence of KNOUC 202 showed 99.9% similarity with that of Thermus thermophilus ATCC 27634(HB8). Based on morphological, physiological, biochemical characteristics, cellular fatty acids profile and 16S rRNA sequence analysis, KNOUC 202 was identified as Thermus thermophilus.
Characteristics of thermophilic bacteria and secondary materials on the pyrrhotite surface were investigated by using scanning electron microscopy (SEM). The thermophilic bacteria from an acid hot spring in Japan were incubated with pyrrhotite at $42^{\circ}C$, $52^{\circ}C$, and $62^{\circ}C$ respectively. SEM analysis of the reacted pyrrhotite showed that indigenous rod-shaped bacteria ranging from $0.4{\times}1.5{\mu}m$ to $0.3{\times}11.9{\mu}m$ in size were attached to the pyrrhotite surface at these temperatures with formation of secondary materials. Extracellular polymer substances were formed on the bacterial surface. We suggest that these polymers functioned as a capsule protecting bacteria from the extreme environment. Secondary materials such as elemental sulfur, Fe-hydroxide, S-Fe and O-P-Fe compounds were found on the pyrrhotite surface.
In order to evaluate the antifungal activity of bacteria against plant pathogenic fungi, 8 bacteria were isolated from mushroom compost hot spring, seaweed, and forest soil and mutants from them were induced by $LD_{95}$ gamma radiation($^{60}Co$). Bacillus circulans K1, Burkholderia gladioli K4 and Bacillus subtilis YS1 showed wide antifungal spectrum against 12 kinds of plant pathogenic fungi. From the radiation sensitivity test, B. gladioli K4 was very sensitive to gamma radiation and its $D_{10}$ value was 0.11 kGy. Antifungal activities of B. circulans Kl-1004 and B. subtilis YS1-1009, which were induced by the radiation of $^{60}Co$ increased against Botryosphaeria dothidea. The mutant strains, B. subtilis YS1-1006 and B. subtilis YS1-1009 were resistant to tebuconazole and copper hydroxide. SAR535, SAR5108, and SAR5118 mutated from Streptomyces sp. SAR01 were antifungal activity deficient mutants against 5 kinds of plant pathogenic fungi compared to wild strain, so that they could be supposed to be model strains far studying antifungal mechanism. It is suggested that various functional types of mutants could be induced by gamma radiation and applied usefully.
The bioleaching experiment under $42^{\circ}C$ was effectively carried out to leach the more valuable element ions from the pyrite in the Gangyang mine waste. Bacteria can survive at this temperature, as indigenous acidophilic bacteria were collected in the Hatchobaru acidic hot spring, in Japan. To enhance the bacterial activity, yeast extract was added to the pyrite-leaching medium. The indigenous acidophilic bacteria appeared to be rod-shaped in the growth-medium which contained elemental sulfur and yeast extract. The rod-shaped bacteria ($0.7\times2.6\;{\mu}m$, $0.6\times7\;{\mu}m$, $0.8\times5\;{\mu}m$ and $0.7\times8.4\;{\mu}m$) were attached to the pyrite surface. The colonies of the rod-shaped bacteria were selectively attached to the surroundings of a hexagonal cavity and the inner wall of the hexagonal cavity, which developed on a pyrite surface. Filament-shaped bacteria ranging from $4.92\;{\mu}m$ to $10.0\;{\mu}m$ in length were subsequently attached to the surrounding cracks and inner wall of the cracks on the pyrite surface. In the XRD analysis, the intensity of (111), (311), (222) and (320) plane on the bacteria pyrite sample relatively decreased in plane on the control pyrite sample, whereas the intensity of (200), (210) and (211) increased in these samples. The microbiological leaching content of Fe ions was found to be 3.4 times higher than that of the chemical leaching content. As for the Zn, microbiological leaching content, it was 2 times higher than the chemical leaching content. The results of XRD analysis for the bioleaching of pyrite indicated that the indigenous acidophilic bacteria are selectively attacked on the pyrite specific plane. It is expected that the more valuable element ions can be leached out from the mine waste, if the temperature is increased in future bioleaching experiments.
The researchers have tried to reduce ruminal methane gas ($CH_4$) and to convert it into beneficial nutrient for several decades. This study was conducted to screen the methane-reducing vegetables among lettuce, hot pepper, spring onion, onion, turmeric, sesame leaf, garlic, radish sprout, leek and ginger nutritiously on the in vitro ruminal fermentation. The heat-treated vegetables at the 10% of substrate (timothy) were used to reduce methane production on the in vitro anaerobic experiment of 0, 6, 12, 24 and 48 h incubation time. Total gas production, pH, ammonia, $H_2$, $CO_2$, $CH_4$, and volatile fatty acid (VFA) were measured as indicators of in vitro fermentation product containing methane gas. All treatments except garlic showed a tendency to increase in total gas production. The result of ammonia showed that garlic and hot pepper affected rumen bacteria concerned protein metabolism and that lettuce and spring onion increased ammonia production. Garlic decreased $CH_4$ production in inverse proportion to $H_2$. Lettuce, spring onion, onion, garlic, radish sprout, leek and ginger increased propionate of VFA. Garlic balanced the ruminal fermentation in the pH, $H_2$, $CH_4$, acetate and propionate. This results showed that methane production at in vitro study was inhibited by heat-treated garlic supplementation. In conclusion, this study suggests that ruminal fermentation covering methane production might be controled by proper vegetables.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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