Ephedra alkaloids, (-)-ephedrine, (+)-pseudoephedrine, (-)-N-methylephedrine, (+)-N-methylpseudoephedrine, (-)-norephedrine and (+)-norpseudoephedrine, from ephedra herb are sympathomimetic agonists causing an increase of metabolism, blood pressure and perspiration. In this study, we developed the validation method of (+)-pseudoephedrine and (-)-ephedrine, two major ephedra alkaloids in Ephedra spp., by high-performance liquid chromatography-ultraviolet spectrometer (HPLC-UV). HPLC analysis was performed using a HECTOR-M C18 column operating at $35^{\circ}C$, and UV detection at 215nm. The mobile phase used a gradient flow with 25 mM SDS in water (A) and acetonitrile (B).
Many diterpenoids from Siegesbeckia species (Compositae) and their anti-inflammatory actions have been examined. In this research, high-performance liquid chromatography-ultraviolet spectrophotometer (HPLC-UV) method was used to compare the quantitative level of kirenol (ent-pimarane-type diterpenoid) in the aerial parts of Korean S. glabrescens and S. pubescens and the Chinese Siegesbeckiae Herba. Fingerprints of the two HPLC chromatograms of Korean S. glabrescens and S. pubescens were similar, but considerably different from Chinese Siegesbeckiae Herba. The content of kirenol in S. pubescens ($16.51{\pm}0.10$ mg/ml dry weight as mean${\pm}$RSD) was higher than S. glabrescens ($13.48{\pm}0.12$ mg/g dry weight). These values were considerably higher than the Chinese Siegesbeckiae Herba ($1.55{\pm}0.74$ mg/g dry weight). Thin layer chromatography (TLC) analysis demonstrated the containing of kirenol in the three plant materials, but the presence of siegeskaurolic acid (entkaurane-type diterpenoid) only in the Chinese Siegesbeckiae Herba.
A high performance liquid chromatographic method was designed for the quantitative analysis of oxymatrine in Sophora Radix. The separation of oxymatrine was performed by reversed-phase chromatography with a $C_{18}$ column and a buffered aqueous solution containing acetonitrile, and monitored by UV absorption at 215 nm. Extraction of oxymatrine in Sophora Radix was carried out using various solvents and extraction methods. The optimum extraction efficiency for the crushed Sophora Radix was achieved by reflux at $80^{\circ}C$ in 50% ethanol for five hours. Most extraction methods used to complicate pretreatments. In this study, sublimation was employed for a extraction method without going through complicate pretreatments. Sublimation was carried out under high vacuum ($1{\times}10^{-3}$ torr) and at high temperature ($200^{\circ}C$). Extraction efficiency using Sublimation was found to be inferior to other extraction methods.
The enantiomers of higenamine were directly separated by high performance liquid chromatography using a chiral stationary phase and detected by UV. The R- and S-isomers of higenamine were eluted at the retention time of 22 min and 27 min, respectively. Higenamine was determined to be present as R-(+)-enantiomer not only in the embryo of Nelumbo nucifera, from which the separation of R-(+)-higenamine was reported, but also in various Aconite roots, from which higenamine was separated as optically inert racemic mixtures.
Mitsuhashi, T.;Mitsumoto, M.;Yamashita, Y.;Ozawa, S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.1
no.2
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pp.99-106
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1988
A high performance liquid chromatographic procedure is described for the direct determination of the picomole amount of palmitoyl-Coenzyme A and stearoyl-Coenzyme A, using a stainless steel column packed with C-18 derivatized porous silica ($5{\mu}m$), an isocratic elution with a mixture of 33 mM $KH_2PO_4$/acetonitrile as a mobile phase and a UV detector. The long-chain acyl-Coenzyme A esters were determined in incubated microsomal fractions of a bovine liver to demonstrate the utility of this method for monitoring acyl-CoA synthesis in biological samples. The reaction rate of palmitate was higher than that of stearate. After a 60 minute incubation period, the generated amount of palmitoyl-Coenzyme A and stearoyl-Coenzyme A were approximately 70 and 20 n mol/mg micresomal protein, respectively. The advantage of this method are in that no decomposition of the CoA esters is involved, while the constituent molecular species is detected.
A reversed-phase high performance liquid chromatographic method was developed to determine salidroside and tyrosol simultaneously in the Rhodiola rosea. The optimum condition was Nova-pak $C_18$as stationary phase, 6.5% methanol in water as mobile phase and detection at UV 225 nm. The identification was carried out by comparing the retention time and LC/MS spectrum of the relevant peaks with those of isolated standards. The contents of salidroside and tyrosol in the samples gathered from various area in China were ranged over 1.3-11.1 ${m}g/g$ and 0.3-2.2 ${m}g/g$, respectively.
Kim, Hyung-Kook;Lee, Cheol-Kyu;Ko, Geun-Il;Kim, Jae-Back
Journal of Pharmaceutical Investigation
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v.13
no.2
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pp.59-65
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1983
A convenient high performance liquid chromatographic method for the quantitative determination and content uniformity of prednisolone in tablets is described. The prednisolone was chromatographed using a ${\mu}-Bondapak\;C_{18}$ column and the eluent 70% MeOH at a flow rate 1. 0ml/min. Diethylstilbestrol was used as an internal standard. The UV detector response at 254nm was linear over a range of $10{\sim}60{\mu}g/ml$ under conditions of the analysis. Reproducibility studies gave relative standard deviations of $0.3{\sim}0.5%$.
A procedure for the high-performance liquid chromatographic determination of Nebramycin factors in fermentation broth of Streptoalloteichus hindustanus ATCC 31218 mutant was investigated using pre-column derivatization and LTV detection. The method is based on pre-column derivatization of Nebramycin factors with 2,4-dinitrofluorobenzene(DNFB) in the presence of Tris (hydroxymethyl)aminoethane. The chromatographic separation of derivatives of Nebramycin factors and unknown impurities is achieved using reversed-phase column (NOVA-PAK $C_{18}$, Waters Co.) and AcCN : H$_{2}$O : AcOH (53.0:46.5:0.5) as a mobile phase. The mixture of these derivatives were separated within 35 minutes and the optimum wavelength($\lambda_{max}$ ) of the UV detector was 353 nm. The linearity of response for derivatives of Nebramycin factors is demonstrated for concentrations up to 500 $\mu\textrm{g}$/ml and the relative standard deviation is less than 0.79%. Detection limit was 1.67 ng for the 10 $\mu\textrm{l}$ sample volume employed.
Using a reversed-phase high performance liquid chromatography, the separation of 20(S)-, 20(R)-prosapogenin stereo-isomers of ginsenoside-$Rg_2$ and of ginsenoside-$Rg_3$ in ginseng saponins has been carried out with binary solvent system. The optimum conditions for the isomer separation are as following: Nova-$Pak^{(R)}C_{18}$ (Waters, $3.9{\times}150mm$) column, $CH_3CN/CH_3CN$ (100:8, v/v) binary solvent system and the flow rate was 1.7 mL/min. The stereoisomers were separated with change of the mixture ratio of the solvent system, the solvent elution by gradient program, and then detected at 203 nm of UV detector. The simultaneous separation of mixture that were the $Rg_2$, $Rg_3$ isomers was easily performed in nonpolar solvent for $Rg_2$, polar solvent for $Rg_3$ at the same optimum conditions.
Rodriguez, Joyce P.;Quilantang, Norman G.;Lee, Ju Sung;Park, Jun Yeon;Shim, Jae Suk;Kang, Ki Sung;Cho, Eun Ju;Geraldino, Paul John L.;Lee, Sanghyun
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.61
no.3
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pp.227-232
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2018
Simultaneous determination of three methoxyflavones, namely, cirsimarin (1), hispidulin (2), and cirsimaritin (3) in selected Korean thistles was performed via reversed-phase high performance liquid chromatography system. Compound 1 was present in all the thistle species examined, whereas 2 and 3 were only detected in Cirsium japonicum and C. japonicum var. maackii (CJM). The concentration of compounds 1-3 in CJM varied according to the time of harvest. Plants collected in the spring (CJMS) and fall (CJMF) had the highest contents of 3 and 1, respectively. A lower content of 2 was observed in CJMF than in CJMS. This indicates that seasonal variation affects the flavonoid content of CJM. The results of this study show that CJM is an excellent source of compounds 1-3 and it can potentially be cultivated for industrial and pharmaceutical applications involving these compounds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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