In this study, we examined the anti-diabetic activity in vitro by the crude extracts of Tetragonia tetragonioides which has been known to superior plants for the traditional prevention and treatment of stomach-related diseases. $\alpha$-Amylase and $\alpha$-glucosidase, the principal enzymes involved in the metabolism of carbohydrates, and aldose reductase, the key enzyme of the polyol pathway, have been shown to play the important roles in the complications associated with diabetes. A hexane (HX) fraction of T. tetragonioides were shown to inhibit more than 50% of salivary and pancreatin $\alpha$-amylase activity at concentration of 2.882 mg/mL and 2.043 mg/mL, respectively. In addition, the HX and ethylacetate (EA) fraction showed the highest inhibitory activity on yeast $\alpha$-glucosidase at values of $IC_{50}$ of 0.723 mg/mL and 1.356 mg/mL respectively. The HX, dichloromethane (DCM) and EA fraction showed more higher inhibitory activity on yeast $\alpha$-glucosidase than commercial agent such as 1-deoxynorjirimycin and acarbose. Also, the aldose reductase from human muscle cell had been inhibited strongly by the DCM fraction and HX fraction at 51.95% and 47.22% at a concentration of 1 mg/mL, respectively. Our study, for the first time, revealed the anti-diabetic potential of T. tetragonioides and this study could be used to develop medicinal preparations or nutraceutical and functional foods for diabetes and related symptoms.
In order to evaluate estrogenic compounds in brown algae, an in vitro test system for the verification of estrogenic activity was applied. Fractions from ethanol extracts of each brown alga were prepared by a systematic fractionation procedure with solvents such as $H_2O$, hexane, butanol and methanol. Aqueous fractions of brown algae showed the highest estrogenic activities. Estrogenic activities of $500\;{\mu}g/ml$ aqueous fractions of Undaria pinnatifida and Laminaria japonica showed almost the same strength as that of $10^{-7}\;M$ standard solution ($17{\beta}$-estradiol). Furthermore, estrogenic activities of $500\;{\mu}g/ml$ aqueous fractions of Ecklonia stolonifera and Porphyra suborbiculate represented higher activities than that of $10^{-8}\;M$$17{\beta}$-estradiol. These observations suggest that aqueous fractions of all these brown algae are expected to possess estrogenic compounds and could be developed as estrogenic agents for postmenopausal disorder.
In recent years, many agricultural scientists are studying on eco-friendly farming methods. Among of lots of the methods, the natural insecticides are highly motivated and interested due to their safety and biodegradable issues, and readily available source of bioinsecticides. In this study, the crude extract of custard apple (Annona reticulata L.) seed and its three fractions which were separated based on polarity indexes were examined for their insecticidal activities against Myzus persicae Sulzer and Nilaparvata lugens S.. The crude extract (Aceton/MeOH) showed strong insecticidal activities against both insects at 3.00 mg/mL ($LD_{50}$=0.45mg/mL for M. persicae S. and 1.42 mg/mL for N. lugens S.). Furthermore, simple fractionation with hexane, chloroform, and water lead to increase three-folds insecticidal activity on chloroform fraction ($LD_{50}$=0.13mg/mL for M. persicae S. and 1.14 mg/mL for N. lugens S.). The results suggest that A. reticulata extracts might be used to control for M. persicae effectively.
The antimicrobial activity of Orixa japonica Thunb. leaf extract towards 13 microorganism strains was evaluated. Both methanol (MEex) and 70% ethanol extracts showed antimicrobial activity towards Streptococcus mutans, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, and Pseudomonas aeruginosa. MEex showed a higher antimicrobial activity than the 70% ethanol extract. In addition, the dichloromethane fraction (DCMfr) of the MEex also had an antimicrobial effect against the microorganisms examined. The minimum inhibitory concentrations (MICs) towards S. mutans, B. cereus, S. aureus, and P. aeruginosa were 49.22, 24.61, 49.22, and 49.22 mg/mL, respectively. In contrast, the MICs of the DCMfr tpwards S. mutans, B. cereus, S. aureus, and P. aeruginosa were 3.31, 0.21, 1.7, and 1.7 mg/mL, respectively. The MEex antimicrobial activity was not affected by a 3 h exposures to pH in the range of 3-11 or by temperatures were maintained between $80^{\circ}C-100^{\circ}C$ for 6 h. However, the MEex antimicrobial activity decreased at a heat treatment of $121^{\circ}C$ 1 h.
Kustiawan, Paula M;Phuwapraisirisan, Preecha;Puthong, Songchan;Palaga, Tanapat;Arung, Enos T;Chanchao, Chanpen
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.16
no.15
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pp.6581-6589
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2015
Background: Previously, stingless bee (Trigona spp.) products from East Kalimantan, Indonesia, were successfully screened for in vitro antiproliferative activity against human cancer derived cell lines. It was established that propolis from T. incisa presented the highest in vitro cytotoxicity against the SW620 colon cancer cell line (6% cell survival in $20{\mu}g/mL$). Materials and Methods: Propolis from T. incisa was extracted with methanol and further partitioned with n-hexane, ethyl acetate and methanol. The in vitro cytotoxicity of the extracts was assessed by the MTT assay against human colon (SW620), liver (Hep-G2), gastric (KATO-III), lung (Chago) and breast (BT474) cancer derived cell lines. The active fractions were further enriched by silica gel quick column, absorption and size exclusion chromatography. The purity of each fraction was checked by thin layer chromatography. Cytotoxicity in BT-474 cells induced by cardanol compared to doxorubicin were evaluated by MTT assay, induction of cell cycle arrest and cell death by flow cytometric analysis of propidium iodide and annexin-V stained cells. Results: A cardol isomer was found to be the major compound in one active fraction (F45) of T. incisa propolis, with a cytotoxicity against the SW620 ($IC_{50}$ of $4.51{\pm}0.76{\mu}g/mL$), KATO-III (IC50 of $6.06{\pm}0.39{\mu}g/mL$), Hep-G2 ($IC_{50}$ of $0.71{\pm}0.22{\mu}g/mL$), Chago I ($IC_{50}$ of $0.81{\pm}0.18{\mu}g/mL$) and BT474 (IC50 of $4.28{\pm}0.14{\mu}g/mL$) cell lines. Early apoptosis (programmed cell death) of SW620 cells was induced by the cardol containing F45 fraction at the $IC_{50}$ and $IC_{80}$ concentrations, respectively, within 2-6 h of incubation. In addition, the F45 fraction induced cell cycle arrest at the G1 subphase. Conclusions: Indonesian stingless bee (T. incisa) propolis had moderately potent in vitro anticancer activity on human cancer derived cell lines. Cardol or 5-pentadecyl resorcinol was identified as a major active compound and induced apoptosis in SW620 cells in an early period (${\leq}6h$) and cell cycle arrest at the G1 subphase. Thus, cardol is a potential candidate for cancer chemotherapy.
This study was performed to select adequate plant materials for developing a natural ${\alpha}$-glucosidase inhibitor by analyzing ${\alpha}$-glucosidase inhibition activity in fronds and rhizomes of three Dryopteridaceae species: Cyrtomium fortunei, Polystichum polyblepharum, and P. lepidocaulon. The highest ${\alpha}$-glucosidase inhibitor obtained from frond of P. lepidocaulon ($4.16{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$), and rhizome of C. fortunei ($1.84{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$), showed much higher inhibition activity than acarbose ($1413.70{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$). The biomass required to inhibit ${\alpha}$-glucosidase by 50% was 0.04 ~ 0.35mg for frond and 0.03 ~ 0.10mg for rhizome, and P. lepidocaulon required the least amount of fronds and P. lepidocaulon the least rhizomes. In frond, ${\alpha}$-glucosidase inhibition activity was the highest in water fraction of C. fortunei ($20.2{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$), and n-butanol fraction of P. lepidocaulon ($9.33{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$) and P. polyblepharum ($5.10{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$). In rhizome, it was the highest in n-butanol fractions of C. fortunei ($19.76{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$) and P. polyblepharum ($4.47{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$), and ethylacetate fraction of P. lepidocaulon ($5.46{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$). The frond biomass required for 50% ${\alpha}$-glucosidase inhibition was the lowest in the water fraction of C. fortunei (1.43mg), and n-butanol fractions of P. lepidocaulon (1.10mg) and P. polyblepharum (0.66mg). The required biomass of rhizome was the lowest in the water fraction of C. fortunei (1.59mg), and n-hexane fractions of P. lepidocaulon (0.04mg) and P. polyblepharum (0.15mg). The result of this study suggested that the three Dryopteridaceae species had high ${\alpha}$-glucosidase inhibition activity with small biomass, which might have high value as materials for economical anti-diabetic medication.
We investigated several biological activities using the ethanol extract and its fractions from Pimpinella komarovii leaves to evaluate the usefulness of its extract as a functional biomaterial. The ethanol extract showed antioxidant activities, such as DPPH scavenging activity $(IC_{50}=231.8{\mu}g/m{\ell})$. superoxide scavenging activity $(IC_{50}=23.6{\mu}g/m{\ell})$, and xanthine oxidase inhibitory activity $(IC_{50}=587.8{\mu}g/m{\ell})$. Its EtOAc fraction showed the strongest antioxidant activities among several fractions. The inhibitory effect of ethanol extract on tyrosinase activity was higher than water fraction. When $50{\mu}g/m{\ell}$ of EtOAc fraction was applied, the inhibition ratio of tyrosinase activity was much higher (42%) than that of melasolv. The EtOAc fraction also showed higher inhibitory effect on melanogenesis in Melan-a cells. The n-hexane and EtOAc fractions dose-dependently inhibited the NO production in a RAW 264.7 cells. These results suggest that extract of Pimpinella komarovii could be used as functional biomaterial in developing a skin whitening agent having the antioxidant activity.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.35
no.2
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pp.132-138
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2006
Direct thrombin inhibitor, which is effective to prevent or cure the thrombosis, has been investigated in worldwide. In this study, we tried to screen antithrombosis agent from edible or medicinal plant. A strong antithrombin activity was identified from methanol or $95\%$ ethanol extract of buckwheat seeds. The solvent fractionation of buckwheat extracts using hexane, ethylacetate, butanol revealed that the butanol fraction has a prominent antithrombin activity. Thrombin time (blood-clot formation time) exceeded to over $2,000\%$ by addition of the butanol fraction at concentration of $312.5{\mu}g/mL$, whereas thrombin time extended to $336\%$ by addition of aspirin at concentration of $1,500{\mu}g/mL$. The butanol fraction showed anthrone-positive and ninhydrine-negative reaction. The active components were heat-liable, acid-unstable non-proteinous macromolecules (>30 KD). In vivo analysis using ICR male mouse showed that the buckwheat extract was superior than the aspirin in pulmonary thrombosis, KCN-induced coma and death. Our results suggest that the buckwheat is a potential as an antithrombosis agent and medicinal food.
Residual solvents in foods are defined as organic volatile chemicals used or produced in manufacturing of extracts or additives, or functional foods. The solvents are not completely eliminated by practical manufacturing techniques and they also may become contaminated by solvents from packing, transportation or storage in warehouses. Because residual solvents have no nutritional value but may be hazardous to human health, there is a need to remove them from the final products or reduce their amounts to below acceptable levels. The purpose of this study was to develop and evaluate an analytical method for the screening of residual solvents in health functional foods. Furthermore, the aim of this study was to constitute a reasonable management system based on the current state of the market and case studies of foreign countries. Eleven volatile solvents such as MeOH, EtOH, trichloroethylene and hexane were separated depending on their column properties, temp. and time using Gas Chromatography (GC). After determining the GC conditions, a sample preparation method using HSS (Head Space Sampling) was developed. From the results, a method for analyzing residual solvents in health functional foods was developed considering matrix effect and interference from the sample obtained from the solution of solvents-free health functional foods spiked with 11 standards solutions. Validation test using the developed GC/HSS/MS (Mass Spectrometry) method was followed by tests for precision, accuracy, recovery, linearity and adequate sensitivity. Finally, examination of 104 samples grouped in suits was performed by the developed HSS/GC/MS for screening the solvents. The 11 solvents were isolated from health functional foods based on vapor pressure difference, and followed by separation within 15 minutes in a single run. The limt of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), recovery and coefficient of variation (C.V.) of these compounds determined by the HSS/GC/MS were found to be 0.1 pg/mL, 0.1-125 pg/g, 51.0-104.6%, and less than 15%, respectively. Using the developed HSS/GC/MS method, residual solvent from 16 out of 104 health functional products were detected as a EtOH. This method therefore seems t o be a valuable extension ofanalytical method for the identification of residual solvents in health functional food.
To examine the characteristics of the antioxidative property of Buckwheat components, acetone extracts from a buckwheat, Suwon 5, was fractionated using five solvents. Hexane, ethylacetate, ether, butanol and water fractions were obtained. Butanol fraction showed the greatest electron donating ability and inhibitory effect on lipid peroxidation. It also showed the most excellent activity in the superoxide radical scavenging activity by xanthine/xanthine oxidase-cytochrome c reduction system. Spectrophotogram of butanol fraction was similar to that of rutin. Superoxide radical scavenging activity was related to the contents of rutin. Inhibitory effect of each fraction on xanthine oxidase was also measured. Butanol fraction had the strongest inhibitory effect on xanthine oxidase and $IC_{50}\;was\;3.1\;{\mu}g$. The inhibition type of butanol fraction on xanthine oxidase turned out to be a mixture of the uncompetitive and non-competitive modes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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