Heterosigma akashiwo cyst의 경우 1C상태 일 것으로 추정되며 유영세포 때에는 보통 관찰되어지는 핵형에 비해 4배 정도 높은 DNA content를 가진 cell들이 관찰 되었다. Heterosigma akashiwo의 경우 이번 해에는 큰 문제가 되지 않았지만 마산만 저니층에 계속적으로 cyst가 존재하기 때문에 적조를 발생시킬 수 있는 가능성이 충분하므로 지속적인 monitoring이 필요 할 것으로 추정된다.
Heterosigma akashiwo의 대발생 기작을 규명하기 위하여 환경 요인들에 따른 성장률을 각각 비교하였다. 환경요인, 염분, N:P ratio, 철 (Fe), 셀레늄 (Se)을 대상으로 국내 배양주 2종과 국외 배양주 1종의 성장 특성을 확인하였다. 그 결과, H. akashiwo 배양주는 염분과 철의 농도에 따른 최대 성장률의 특성을 기반으로 지리학적 특이성을 찾기는 힘들었으나, 염분에 대한 내성은 강하여 10 psu에서 40 psu에서 생존이 가능한 것으로 나타났다. N:P ratio와 셀레늄은 국내 배양주와 국외 배양주의 차이를 보였다. 이와 같은 생리학적 특성에 대한 결과를 보았을 때, H. akashiwo가 염분에 대한 높은 내성을 기반으로 우점할 수 있으며, 풍부한 영양염을 이용하여 더욱 빠른 성장으로 대발생을 가능하게 할 수 있을 것이라고 판단된다.
Heterosigma akashiwo는 전세계적으로 분포된 침편모조류이며, 대발생을 형성하여 많은 나라의 양식산업에 커다란 손실을 유발시킨다. 따라서 빠르고 민감한 검출방법을 개발하는 것은 유해조류 대발생에 대한 적절한 경보를 위해서 필요하다. 이 연구에서는 H. akashiwo를 정성 및 정량적으로 검출하기 위하여 뉴클레아제 보호 분석이 통합된 샌드위치 혼성(NPA-SH)을 개발하였다. NPA-SH 프로브는 여섯 종의 미세조류 핵산 서열을 이용하여 디자인 후, 특이성을 확인하여 capture 프로브와 signal 프로브를 선정하였다. 배양시료와 현장시료를 이용하여 NPA-SH의 적용성을 평가한 결과, NPA-SH의 좋은 적용성과 효과를 확인하였다. H.akashiwo의 정량분석을 위한 선형회귀식을 확인하였으며, 최소 검출한계는 1×104 cells/ml이었다. NPA-SH를 사용하여 얻은 H. akashiwo의 정량결과와 현미경을 사용하여 얻은 결과 사이에는 통계학적으로 유의한 차이는 없었다. NPA-SH 분석은 환경시료에 잘 적용되었다. 이러한 결과는 NPA-SH가 H. akashiwo의 모니터링에 사용되어 왔던 전통적인 현미경적 방법에 대한 좋은 대안이 될 수 있음을 보여준다.
본 연구는 남해안 북만 해역을 대상으로 조류성장잠재력(AGP) 시험을 통하여 H. akashiwo의 성장제한요인을 평가하였다. 영양물질의 첨가 및 미생물과의 동시배양에 의하면 적조발생 단계별 H. akashiwo의 성장은 서로 다른 제한요인에 의하여 영향을 받는 것으로 나타났다. 적조발생 전의 H. akashiwo 성장은 질산질소 $50{\mu}M$과 연산인 $5{\mu}M$을 복합첨가하면 크게 증가하였지만 인산인을 단독 첨가하거나 미생물과 동시 배양하여도 전혀 영향이 없었다. 적조발생 전의 H. akashiwo 성장제한요인은 질산질소로 나타났다. 적조발생시기의 H. akashiwo 성장은 질산질소 $50{\mu}M$ 또는 인산인 $5{\mu}M$을 단독첨가하면 증가하였지만 미량영양물질이나 $vitamin\;B_{12}$을 첨가해도 전혀 영향이 없었다. 적조발생 시기의 H. akashiwo 성장제한요인은 질산질소와 인산인이 동시에 작용하는 것으로 나타났다. 반면에 적조소멸시기의 H. akashiwo 성장은 질산질소와 인산인을 첨가하면 약간 증가하였지만 미생물과 동시 배양하면 현저히 감소하였다. 그러므로 적조 소멸시기의 H. akashiwo 성장제한은 미생물요인에 의한 것으로 평가되었다.
The goals of this study is to elucidate life cycle and to detect genetic differences within a single species of Heterosigma akashiwo. To elucidate life cycle of H. akashiwo, have to study of benthic stage and vegetative cell. So we studied identification of H. akashiwo cyst. The relative contents of DNA in nuclei were determined in Heterosigma akashiwo. Different stages of the life history were obtained from culture and natural sediments, and examined by microfluorometry after staining with the DNA-specific fluorochrome 4'-6-dianudubi-2-phenylindole(DAPI). Large cells mainly in exponensial stage, while small cell, pre-encystment cells(\ulcorner\ulcorner), showed in the end of the late growth stage. Type of DNA content showed the different with growth stage. Usually the small cell has the high level of IOD.
휴안포자를 형성하는 과편모조류중 우리나라 남해동부와 동해남부의 연안수역 특히 진해만에서 1982년 이래 3월부터 9월에 걸쳐 적조를 일으킨 종은 8종이었으며 이들은 6종의 과편모조류와 2종의 녹색편모조류로 구성되었다. 계절별로는 이른 봄철에 Scrippsiella trochoidea와 Heterocapsa triquetra종이, 늦봄에 Heterosigma akashiwo가 그리고 여름철에는 Gyrodinium instriatum과 Pheopolykrikos hartmannii가 적조를 일으켰다. 한편 Cochlodinium sp.와 Alexandrium affine는 늦여름부터 가을철에 적조를 일으켰다. 이중 Heterosigma akashiwo는 매년 같은 곳에서 같은 시기에 발생하는 경향을 뚜렷히 나타냈으며 Cochlodinium sp.에서도 이와 같은 특성을 발견할 수 있었다. 한편 적조발생시의 밀도는 $10^3\~10^5\;cells/ml$ 수준이었으며, 밀도변화는 환경특성 보다는 오히려 세포의 크기에 따라 변화하고 있었다.
Heterosigma akashiwo has been reported as red-tide causing phytoplankton in the Korean coastal area during summer when they are exposed to high light. It also shows photosynthetic adaptability to strong light during culture in the laboratory. On the basis of these observations, we tried to find out some genes specifically expressed in Heterosimga akashiwo during exposure to high light, assuming that they might have some resistant mechanisms associated with light adaptation. For this purpose, we carried out DD-PCR to detect differentially expressed mRNAs from cells that had been illuminated under high light for 3 days. We found eight cDNA clones that had been expressed specificically for high light. When they were further screened by reverse Northern hybridization, three of them were identified to be positive cDNA clones. When these cDNA fragments were subjected to DNA sequencing and then their base sequences were compared to GenBank database, one of them showed sequence homology 86% identical to the partial sequence of 16S rRNA gene of eubacterium CRO-18.
Kim, Junseong;Choi, Youn Kyung;Lee, Ji-Hyeok;Kim, Seo-Young;Kim, Hyun-Soo;Jeon, You-Jin;Heo, Soo-Jin
한국키틴키토산학회지
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제22권3호
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pp.185-193
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2017
Red tide Heterosigma akashiwo (H. akashiwo), a microscopic alga of the class Raphidophyceae, causes extensive damage to all marine ecosystems. It is essential to reduce the damage to marine ecosystems for them to be used as a resource. In this study, we used organic solvent fractionation to obtain an ethyl acetate-methanol extract from H. akashiwo (HAEM80) and then evaluated its anti-inflammatory activity in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cells and a zebrafish model. HAME80 markedly inhibited the production of nitric oxide (NO) and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$). It also down-regulated the protein expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) and decreased the secretion of interleukin-$1{\beta}$ ($IL-1{\beta}$) in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. HAME80 reduced yolk edema and improved the survival rate of LPS-stimulated zebrafish embryos; in addition, the extract significantly reduced the production of ROS and NO and attenuated cell death in this model. Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) of the extract was used to confirm the identity of peaks 1-20. Taken together, our data suggest that H. akashiwo is a beneficial anti-inflammatory agent.
전세계적으로 연안해역에서 확산되고 있는 유해유독성 식물플랑크톤의 대발생은 수산자원생물자원에 심각한 피해를 입힌다. 본 연구에서는 유해성 미세조류 대발생을 제어하기 위해 개발된 신물질 Thiazolidinedione 유도체(TD49)의 살조능을 유해성 미세조류 성장단계(초기성장기, 대수증식기, 안정기)에 따라 조사하였다. TD49는 $Heterosigma$$akashiwo$, $Chattonella$$marina$ 그리고 $Chattonella$ sp.의 세포를 사멸시켰으며, 특히 낮은 농도($0.02{\mu}M$)의 TD49는 대수증식기와 안정기보다 초기 성장기에서 우수한 살조효과를 보였다. 또한 모든 성장단계에서 유해생물을 제어 할 수 있는 TD49의 농도는 $2{\mu}M$로 측정되었다. 무각 편모조류인 $Heterosigma$$akashiwo$, $Chattonella$$marina$ 그리고 $Chattonella$ sp.은 세포벽이 약하여 TD49물질에 의해 세포가 쉽게 파괴되어 우수한 살조효과를 보였다. 결과적으로 본 연구에서 개발된 Thiazolidinedione 유도체(TD49)는 유해적조생물 $H.$$akashiwo$, $C.$$marina$ 그리고 $Chattonella$ sp.를 제어할 수 있는 우수한 물질로 판단되었으나, 추후 현장 실용을 위해 메소코즘과 같은 인공생태계를 이용한 해양생태계 위해성 평가가 체계적으로 추진되어야 한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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