Listeria (L.) monocytogenes in samples could not be detected occasioally by faster growth of other Listeria spp. especially L. innocua. The aim of this study was to develop the differential media and multiplex polymerase chain reaction (PCR) assays for the rapid detection of L. monocytogenes. L. monocytogenes colonies were characterized by their ${\beta}$-hemolysis with fluorescence under 366 nm UV light on the Listeria hemolysis agar (LHA). L. innocua, a species commonly present in foods, did not produce ${\beta}$-hemolysis on LHA. Therefore, one or more colonies of L. monocytogenes were easily distinguished from large populations of L. innocua. The multiplex PCR assays were developed to distinguish from L. monocytogenes and other Listeria spp. with two pairs of primers. The primers were designed in 16S rRNA and listeriolysin O gene for specific amplification of all members of the genus Listeria and L. monocytogenes, respectively. The multiplex PCR assays produced 560 and 938 bp products in L. monocytogenes; only 938 bp products in the genus Listeria. The multiplex PCR assays could detect as little as 50 pg of L monocytogenes DNA. These results indicated that the differential media and multiplex PCR assays might be useful diagnostic tools for the rapid detection of L. monocytogenes.
The Present study was conducted to investigate the effects of Ginseng extract on the tension-area curve for stearic acid monolayer. At the same time, the effects of Ginseng extract on osmotic and mechanical fragility of human red cells and histamine release from rabbit leukocytes were studied, The results are summarized as follows. 1. The Ginseng alcohol extract was found to expand liquid expanded phase of stearic acid monolayer, thus it is speculated that this agent may be acting as a surface active substance. 2. Osmotic hemolysis was inhibited by the Ginseng alcohol extract and the same effect was also observed in the presence of Ginseng saponin. However, the Ginseng alcohol extract was found to decrease hematocrit ratio of the RBC suspension, therefore, the inhibition of the osmotic hemolysis by this agent may be secondary effect to the reduced cell volume. 3. The mechanical hemolysis was also inhibited by the Ginseng alcohol extract but the inhibition was independent of changes in hematocrit ratio. 4. Histamine release from rabbit leukocytes was significantly increased in vitro in the presence of the Ginseng alcohol extract.(p<0.05)
Ten college women were treated with either corn oil(CO< as a source of C18:2, $\omega$6) or fish oil concentrates(FO, as a source of C20:5+C22:6, $\omega$3) with experimental diet for 7 days and then returned to normal home made diet. Kinetic changes of plasma and RBC lipids, tocopherol, MDA levels and hemolysis were observed at day-0, -3, -7, -8, -10, -14 and -21 of experimental periods. Plasma and RBC tocopherol contents were significantly increased at day-3 and -7 by tocopherol tocopherol supplement in dietary oil, but there was no significant difference between CO and FO diet with large dose of tocopherol supplement. After stop experimental regimen at day-7, plasma tocopherol content was sustained at high level until day-10 but drastically decreased at day-14 and remained at low level at day-21. However, RBC tocopherol level was not greatly responded to the dietary intake of tocopherol and was varied in the very narrow range. MDa levels of plasma and RBC were not responded in the same way as tocopherol content of plasma. MDa content of RBC was very low compared to that of plasma. RBC hemolysis by incubation in hypotonic solution was negatively correlated to plasma tocopherol level and was not correlated to the level of MDa in either plasma or RBC. There were no significant change in the levels of plasma cholesterol, HDL-chol, triglyceride, phospholipid, and lipoprotein pattern throught experimental periods.
The effects of Gypsophila saponin, sodium dodecylsulfate (SDS) and Triton X-100 on volume changes and fragility of red blood cells were compared to ginseng saponin to elucidate whether there are any difference in their action on membrane lipid. Cell volume was decreased to about 38% in 1M NaCl and increased to about 20% in 1/10M NaCl. Hematocrit value was decreased by Gypsophila saponin, SDS, and Triton X-100 which caused hemolysis in isotonic NaCl solution. These detergents also inhibited increase of cell volume and accelerated hemolysis in hypotonic solution. However, ginseng saponin did not influence to osmotic volume changes and hemolysis of red blood cells. These results suggest that the disruptive effect of plant saponin on membrane barriers induced by removing membrane lipid is different from their source and ginseng saponin has very low affinity to membrane lipid.
Drug delivery by red cells was established to maintain the release of drugs in the blood. The entrapment method by amphotericin B was re-examined and evaluated for obtaining the suitable entrapping conditions without hemolysis. The amphotericin B treatment below $10{\mu}g/ml$ induced the non-hemolysis to entrap daunorubicin into red cells within 10min. Under these conditions intracellular ATP level was decreased as $18\%$. Membrane fluidity and the shape factor of red cells were maintained. To maintain intracellular ATP, ATP and sodium pyruvate were added during the entrapment procedure because hemolysis during the release test would reflect the loss of intracellular ATP that would be postulate the decrease of the viability invivo. Consequently, the addition of ATP in the reaction solution can raise the intracellular level of ATP.
This study was undertaken to identify and characterize hemolytic Bacillus cereus isolated from commercial ssam-jang. The physiological and biochemical properties of isolate were first examined. Using the BIOLOG system, the isolate was identified and assigned to B. cereus MH-2. Phylogenetic tree of MH-2 was plotted based on 16S rRNA sequence comparisons. Hemolytic activity was observed around wells of sheep blood agar plates seeded with MH-2 cultures; the zone of hemolysis gradually increased with increasing incubation time of the cultures. Zymographic analysis estimated the molecular weight of the presumed hemolysis-causing molecule to be about 30 kDa. Survival rates of MH-2 cells decreased with increasing NaCl concentrations in the media. The stress shock proteins (e.g., DnaK and GroEL) induced by NaCl were reduced in proportion to the NaCl concentration and exposure period to B. cereus MH-2. Analysis of SDS-PAGE and Western blot revealed that the stress shock proteins, 70-kDa DnaK and 60-kDa GroEL were decreased proportionate to the NaCl concentrations as well as exposure period in exponentially growing cultures. Scanning electron microscopy demonstrated the presence of perforations and irregular rod forms with wrinkled surfaces in cells treated with NaCl.
Water and alcohol extracts were prepared from dried and powdered leaves of Thuja orientalis (T. orientalis). The reducing power, total phenolic content, the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl scavenging activity, inhibitory effect on Fe (II)-EDTA-$H_{2}O_{2}$ (Fenton reaction system) induced DNA damage and inhibitory effect on human red blood cell (RBC) hemolysis were evaluated in the present study. At a concentration of 200 mg, water and alcohol extracts of T. orientalis inhibited the hydrolysis of DNA by 72.859% and 65.312%, respectively. Water and alcohol extracts of T. orientalis also inhibited 2,2'-Azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride induced RBC hemolysis to the extent of 69.30% and 54.55%, respectively. The reducing power and antioxidative activity of water extract was found to be more than that of alcohol extract. This is attributable to the presence of higher amount of phenolic compounds in water extract. The present results indicate that the T. orientalis extracts are rich sources of natural antioxidants and can protect DNA and human red blood cells against free radical induced oxidative damage.
Inhibitory effects of tannic acid on the lipid peroxidation induced by UVB were investigated. Tannic acid was administered either topically or orally for 3 days to hairless mice, which were previously irradiated with UVB, and inhibitory effects of tannic acid were measured. The UVB was found to cause skin erythema and hemolysis. When tannic acid was administered either topically or orally, hemolysis was decreased. After the skin was irradiated by UVB, the production of malondialdehyde was significantly decreased in erythrocyte and skin tissue, and the activities of SOD and catalase were significantly increased in plasma and skin tissue. In case of oral treatment, catalase activity was not significantly increased. The inhibitory effects of tannic acid on malondialdehyde production, SOD inhibition and catalase inhibition were more prominent in orally administerd groups than in topically administerri groups. However, the difference between two groups was not statistically significant. In conclusion, tannic acid decreased lipid peroxidation possibly by free radical scavenger action. The route of administrations, topical or oral, did not affect the antioxidative activity of tannic acid.
This study was observed the effect of n6 and n3 polyunsaturated fatty acids of dietary corn oil and fish oil which was supplemented with similar levels of tocopherol in high fat diet on the levels of tocopherol, malondialdehyde ( MDA) productions of plasma and tissues of rats. Also RBC hemolysis, superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH Px) activities In liver were determined. Male Sprague Dawley rats were fed high fat (40%Cal) diet which was different only In fatty acid composition for 6 weeks. Dietary (arts were beef tallow(BT) as a source of saturated fatty acid, corn oil(CO) for n6 linoleic acid (LA) and fish oil(FO) for n3 eicosapentaenoic acid(EPA) + docosahexaenoic acid (DHA). Plasma and liver tocopherol levels were lowered by n3 PUy4 but there was no difference in malondialdehyde(MDA) level by different dietary PUFA. However, MDA content of RBC and hemolysis were increased by n3 PUFA. MDA content, superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) activities in liver were increased in more unsaturated dietary fat groups. Especially, SOD activity was increased in proportion to the degree of fat unsaturation.
This study aimed to find out the effect of freeze-drying leek against cholesterol feeding rats on the cholesterol and lipid in serum, hemolysis in erythrocyte and blood pressure in rats tall. In this experiment, male rats of Wistar strain were used. The rats were divided into 3 groups in 8 weeks : basal diet, 1% cholesterol and 1% cholesterol and 1% leek. The followings are the results of this experiment. 1. In vitro, leek-ext, reduced the hemolysis. 2. Leek reduced VLDL, LDL/HDL-cholesterol in serum. 3. Leek reduced the blood pressure in rat's tail. 4. Leek reduced the fatty change in liver caused by cholesterol treatment. This experiment showed that leek-addition group had portective effect against cholesterol fed and decresed VLDL, LDL/HDL-cholesterol in serum, Leek alleviated hemolysis in erythrocyte, blood pressure in rat's tail and fatty change in liver. Therefore, this experiment concluded that leek has defensive power against cholesterol.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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