Pre-harvest sprouting (PHS) in rice (Oryza sativa L.) is one of the main problems associated with seed dormancy. PHS causes yield loss and reduction of grain quality under unpredictable humid conditions at the ripening stage, thus affecting the economic value of the rice crop. To resolve this issue, it is important to understand the molecular mechanism underlying seed dormancy in rice. Recent studies have shown that seed dormancy is affected by a large number of genes associated with plant hormones. However, the effect of heat stress on seed dormancy and plant hormones is not well understood. In this study, we compared the PHS rate as well as the transcriptome and small RNAome of the seed embryo and endosperm of two different accessions of rice, PHS-susceptible rice (low dormancy) and PHS-resistant rice (high dormancy) under three different maturation stages. We identified and verified the candidate genes associated with seed dormancy and heat stress-related responses in rice using quantitative real-time PCR. We newly discovered hormone-related genes, heat shock protein-related genes, and miRNAs potentially involved in PHS. These findings provide a foundation for understanding the dynamics of transcriptome and small RNAome of hormone- and heat stress-related genes, which affect PHS during seed maturation.
Caffeine has both positive and negative effects on physiological functions in a dose-dependent manner. C. elegans has been used as an animal model to investigate the effects of caffeine on development. Caffeine treatment at a high dose (30 mM) showed detrimental effects and caused early larval arrest. We performed a comparative proteomic analysis to investigate the mode of action of high-dose caffeine treatment in C. elegans and found that the stress response proteins, heat shock protein (HSP)-4 (endoplasmic reticulum [ER] chaperone), HSP-6 (mitochondrial chaperone), and HSP-16 (cytosolic chaperone), were induced and their expression was regulated at the transcriptional level. These findings suggest that high-dose caffeine intake causes a strong stress response and activates all three stress-response pathways in the worms, including the ER-, mitochondrial-, and cytosolic pathways. RNA interference of each hsp gene or in triple combination retarded growth. In addition, caffeine treatment stimulated a food-avoidance behavior (aversion phenotype), which was enhanced by RNAi depletion of the hsp-4 gene. Therefore, up-regulation of hsp genes after caffeine treatment appeared to be the major responses to alleviate stress and protect against developmental arrest.
Purpose: There is no clear evidence of the original cause of hypertrophic scar, and the effective method of treatment is not yet established. Recently the steps of searching in gene and molecular level are proceeding. we are trying to recognize the difference between keratinocytes of hypertrophic scar and normal skin. Then we do support the comprehension of the scar formation mechanism and scar management. Methods: Total RNAs were extracted from cultured keratinocytes from 4 hypertrophic scars and normal skins. The cDNA chips were prepared. A total of 3063 cDNAs from human cDNA library were arrayed. And the scanning data were analyzed. Results: On microarray, heat shock protein, pyruvate kinase, tumor rejection antigen were more than 2 fold intensity genes. Among them, heat shock 70 kd protein showed the strongest intensity difference. Conclusion: In this study, it can be concluded that heat shock proteins play an important role in the process of wound healing and scar formation. This study provides basic biologic information for scar research. The new way of the prevention and treatment of scar formation would be introduced with further investigations.
Heat shock proteins (Hsps) play a key role in the cellular defense response to diverse environmental stresses. Here, the role of Hsp genes in the acquisition of thermotolerance in the cyanobacterium Microcystis aeruginosa NIES-298 was investigated. Twelve Hsp-related genes were examined to observe their modulated expression patterns at different temperatures (10, 15, 25, and $35^{\circ}C$) over different exposure periods. HspA and HtpG transcripts showed an up-regulation of expression at low temperatures (10 and $15^{\circ}C$) and high temperature ($35^{\circ}C$), compared with the control ($25^{\circ}C$). To examine their effects upon thermotolerance, we purified recombinant HspA and HtpG proteins. During a thermotolerance study at $54^{\circ}C$, the HspA-transformed bacteria showed increased thermotolerance compared with the control. HtpG also played a role in the defense response to acute heat stress within 30 min. These findings provide a better understanding of cellular protection mechanisms against heat stress in cyanobacteria.
Arsenic (As) is a toxic element that easily taken up by plants root. Several toxic forms of As disrupt plant metabolism by a series of cellular alterations. In this study, we applied annealing control primer (ACP)-based reverse transcriptase PCR (polymerase chain reaction) technique to identify differentially expressed genes (DEGs) in alfalfa roots in response to As stress. Two-week-old alfalfa seedlings were exposed to As treatment for 6 hours. DEGs were screened from As treated samples using the ACP-based technique. A total of six DEGs including heat shock protein, HSP 23, plastocyanin-like domain protein162, thioredoxin H-type 1 protein, protein MKS1, and NAD(P)H dehydrogenase B2 were identified in alfalfa roots under As stress. These genes have putative functions in abiotic stress homeostasis, antioxidant activity, and plant defense. These identified genes would be useful to increase As tolerance in alfalfa plants.
곤충은 변온동물로 육지생태계에서 주로 서식하면서, 식물의 생체량 조절, 종다양성 유지에 중요한 역할을 한다. 주변온도는 변온동물인 곤충의 생리적 반응속도, 뿐만 아니라 생존과 분포를 결정하며, 기후변화에 영향을 준다. 본 연구는 높은 온도에서 곤충의 적응성에 관련있는 유전자를 전사체를 이용하여 동정하였다. 고온에서 사육된 배추좀나방 유충의 지방체로부터 차세대 염기서열 분석법을 이용하여 전사체를 확보하였다. 대사중심인 지방체에서 구조단백질, 열충격단백질, 항산화단백질, 해독효소 들이 동정되었다. 이들 중에서 표피단백질(표피단백질, 키틴합성효소, 엑틴, 카이틴 합성), 스트레스관련단백질(시토크롬 P450), 열충격단백질, 한산화단백질은 발현이 증가되었으나, glutathione S transferase 발현은 오히려 감소되었다. 이상의 결과는 기후변화의 주요인인 온난화에 대한 해충의 생리적 대응과 온도적응을 이해하는데 필요한 기초자료를 제시한다.
배 경 : 최근 결핵에 대한 새로운 백신 개발은 초회 면역 방법 및 추가 면역 방법을 이용하는 방향으로 연구되고 있다. 본 실험은 새로운 백신 후보 물질로서의 가능성을 알아보기 위하여 결핵균 adenylate kinase (AK), nucleoside diphosphate (NdK) 및 heat shock protein 70(Hsp70)의 결핵균에 대한 방어면역효능을 측정하였다. 방 법 : 재조합 단백질들을 정제하기 위하여 중합효소 연쇄반응으로 증폭한 결핵균 유전자 단편들을 E.coli expression vector, pQE30에 클로닝한 후, Ni-NTA resin을 이용하여 정제하였다. DDA와 재조합 단백질들을 마우스에 면역주사하고 면역반응 생성 유무를 확인하기 위하여 항체와 $IFN-{\gamma}$ 생성능을 측정하였다. 면역주사 한 마우스에 결핵균을 공기 감염시킨 후, 폐와 비장을 분리하여 결핵균 생균수 실험을 하였다. 결 과 : 재조합 단백질 AK, NdK 와 Hsp70을 면역보강제인 DDA를 이용하여 면역주사 한 결과에서, 생리식염수 혹은 DDA를 면역주사 한 마우스에 비교하여 재조합 단백질을 면역주사 한 마우스에서는 각 항원에 대해 항체와 $IFN-{\gamma}$ 생성능이 높게 나타났으나 결핵균에 대한 효과적인 방어면역효능은 나타나지 않았다. 결 론 : 마우스를 모델로 한 결핵균에 대한 방어면역효능 실험에서, 면역보강제 DDA를 이용한 재조합 단백질 AK, NdK 및 Hsp70을 면역주사 한 경우에는 결핵균의 성장을 효과적으로 조절하지 못하였다. 혼합 단백질 혹은 다른 T세포 면역보강제의 사용에 의한 추시가 필요하다.
The toxicity of cadmium on Caenorhabditis elegans was investigated to identify sensitive biomarkers for environmental monitoring and risk assessment. Stress-related gene expression were estimated as toxic endpoints Cadmium exposure led to an increase in the expression of most of the genes tested. The degree of increase was more significant in heat shock protein-16.1, metallothionein-2, cytochrome p450 family protein 35A2, glutathione S-transferase-4, superoxide dismutase-1, catalase-2, C. elegans p53-like protein-1, and apoptosis enhancer-1 than in other genes. The overall results indicate that the stress-related gene expressions of C. elegans have considerable potential as sensitive biomarkers for cadmium toxicity monitoring and risk assessment.
We have previously investigated the proteome changes of rice leaves under heat stress (Lee et al. in Proteomics 2007a, 7:3369-3383), wherein a group of antioxidant proteins and heat shock proteins (HSPs) were found to be regulated differently. The present study focuses on the biochemical changes and gene expression profiles of heat shock protein and antioxidant genes in rice leaves in response to heat stress ($42^{\circ}C$) during a wide range of exposure times. The results show that hydrogen peroxide and proline contents increased significantly, suggesting an oxidative burst and osmotic imbalance under heat stress. The mRNA levels of chaperone 60, HSP70, HSP100, chloroplastic HSP26, and mitochondrial small HSP responded rapidly and showed maximum expression after 0.5 or 2 h under heat stress. Transcript levels of ascorbate peroxidase (APX), dehydroascorbate reductase (DHAR) and Cu-Zn superoxide dismutase (Cu-Zn SOD) showed a rapid and marked accumulation upon heat stress. While prolonged exposure to heat stress resulted in increased transcript levels of monodehydroascorbate reductase, peroxidase, glyoxalase 1, glutathione reductase, thioredoxin peroxidase, 2-Cysteine peroxiredoxin, and nucleoside diphosphate kinase 1, while the transcription of catalase was suppressed. Consistent with their changes in gene expression, the enzyme activities of APX and DHAR also increased significantly following exposure to heat stress. These results suggest that oxidative stress is usually caused by heat stress, and plants apply complex HSP- and antioxidant-mediated defense mechanisms to cope with heat stress.
Low-temperature adaptation and protection for environmental stresses were studied in the gram-negative soil bacterium Bradyrhizobium japonicum 61A101c. B. japonicum was more resistant to alcohol, $H_2O_2$, heat and freezing following a pretreatment at $4^{\circ}C$, resulting in approximately 10 to 1,000 folds increased survival compared to mid-exponential-phase cells grown at an optimal temperature at $28^{\circ}C$. This phenomena relate to the cold shock protein expressed when cells are exposed to a downshift in temperature. To confirm the presence of cold shock protein genes in B. japonicum, a PCR strategy was employed using a degenerate primer set, which successfully amplified a putative csp gene fragment. Sequence analysis of the PCR product(200bp) revealed csp-like sequences that were up to 96% identical to csp gene of S. typhimurium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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