Oh, Young Sook;Cho, Sang Bum;Baek, Kyung Hoon;Choi, Chang Bon
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.18
no.11
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pp.1589-1593
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2005
The aim of this study was to investigate the effects of testosterone, 17$\beta$-estradiol, and progesterone on the differentiation of bovine intramuscular adipocytes (BIA). Stromal-vascular (SV) cells were obtained from M. longissimus dorsi of 20 months old Korean (Hanwoo) steers, and were cultured in DMEM containing 5% FBS. The proliferated BIA were induced to differentiate with 0.25 $\mu$M dexamethasone, 0.5 mM 1-methyl-3-isobutyl-xanthine and 10 $\mu$g/ml insulin. During differentiation, the cells were treated with testosterone, 17$\beta$-estradiol, and progesterone at concentrations of $10^{-10}$, $10^{-9}$, and $10^{-8}$ M, respectively, for 12 days. Regardless of its concentration, testosterone remarkably reduced lipid droplets in the cytosol of BIA. On the other hand, 17$\beta$-estradiol and progesterone increased the accumulation of lipid droplets in BIA. Testosterone significantly (p<0.05) decreased GPDH activities with a dose-dependent pattern. 17$\beta$-Estradiol treatment onto BIA during differentiation, however, increased GPDH activity showing the highest activity (11.3 nmol/mg protein/min) at $10^{-10}$ M. Treatment of BIA with progesterone also increased (p<0.05) GPDH activity with the highest activity (13.8 nmol/mg protein/min) at $10^{-9}$ M. In conclusion, the results in the current study suggest that testosterone inhibits differentiation of BIA by suppressing GPDH activity while 17$\beta$-estradiol and progesterone have adverse effects.
This study was conducted to evaluate the possible application of 2 D-SDS-PAGE (2 DE)-based proteome analysis techniques to the assessment of extreme proteolysis in postmortem skeletal muscle. Eight Hanwoo longissimus muscles were incubated immediately after slaughter for 24 h at 5$^{\circ}C$, 15$^{\circ}C$ or 36$^{\circ}C$. Warner Bratzler (WB)-shear force and ultrastructural configuration were determined at 24 h, and rate of proteolysis to 24 h was determined by 1 D-SDS-PAGE (1 DE) and 2 DE. In addition, tentative protein identification was performed from peptide mass fingerprints of MALDI-ToF analysis of major protein groups on 2 DE profiles. The result showed that although ultrastructural configuration was similar between the 5$^{\circ}C$ and 36$^{\circ}C$ treatments, meat at 5$^{\circ}C$ had higher WBshear force (approximately 5 kg greater). A higher rate of protein degradation at 36$^{\circ}C$ was observed based on Troponin-T degradation, 1 DE, and 2 DE analysis. This indicates that proteolysis during the early postmortem period was a significant determinant of shear force at 24 h. Little difference in proteolysis between 5$^{\circ}C$ and 15$^{\circ}C$ treatments was found based on classic 1 DE profile assessment. Meanwhile, considerable differences in the 2 DE profiles between the two treatments were revealed, with substantially higher rate of proteolysis at 15$^{\circ}C$ compared to 5$^{\circ}C$. Nuclease treatment improved 2 DE profile resolution. 400 ${\mu}$g and 600 ${\mu}$g of sample loading appeared to be appropriate for 24 cm pH 3-10 and pH 5-7 IPG strips, respectively. Protein detection and quantification of the 5$^{\circ}C$, 15$^{\circ}C$ and 36$^{\circ}C$ 2 DE profiles revealed 78, 163 and 232 protein spots respectively that were differentially modified in terms of their electrophoretic properties between approximately pI 5.3-7.7 with the molecular weight range of approximately 71-12 kDa. The current results demonstrated that 2 DE was a superior tool to 1 DE for characterising proteolysis in postmortem skeletal muscle.
Effects of recombinant bovine somatotropin (bST) on plasma hormonal concentration, embryo quality, and pregnancy rate were examined during the superovulation and synchronization treatment in donor and recipient cows. Hanwoos (Korean native beef cattle) were treated with controlled internal drug release (CIDR) combined with bST (CIDR+bST) or without bST (CIDR) as donor cows. The embryos recovered from donors were transferred into Holstein recipient heifers treated with bST (CIDR+bST) or without bST (CIDR) for synchronization. The correlation between IGF-I and P4 showed a positive pattern in the CIDR+bST group (r=0.44, p<0.01), but a negative pattern was shown in the CIDR group (r = -0.59, p<0.02) at day 7 of estrous cycles. Although the number of recovered, transferable, and degenerated embryos was not different, quantities of grade 1 (excellent) embryos in CIDR+bST group were significantly higher than those of the CIDR group (p<0.01). The pregnancy rate was higher in the CIDR+bST recipient group compared to CIDR group (p<0.05), when the embryos were recovered from the donors treated with CIDR. However, the pregnancy was maintained highly in both recipient groups, when the embryos were produced by CIDR+bST treated donors. It can be concluded that bST administration combined with CIDR is an effective method for superovulation and synchronization treatment to stabilize plasma hormonal levels, to obtain excellent quality of embryos, and to get higher pregnancy rate.
The insulin-like growth factors (IGFs), their receptors, and their binding proteins play key roles in regulating cell proliferation and apoptosis. Insulin-like growth factor binding protein-3 (IGFBP3, OMIM #146732) is one of the proteins that bind to the IGFs. IGFBP3 is a modulator of IGF bioactivity, and direct growth inhibitor in the extravascular tissue compartment. We identified twenty-two novel single nucleotide polymorphisms (SNPs) in IGFBP3 gene in Korean cattle (Hanwoo, Bos taurus coreanae) by direct sequencing of full gene including -1,500 bp promoter region. Among the identified SNPs, five common SNPs were screened in 650 Korean cattle; one SNP in promoter (IGFBP3 G-854C), one in 5'UTR region (IGFBP3 G-100A), two in intron 1 (IGFBP3 G+421T, IGFBP3 T+1636A), and one in intron 2 (IGFBP3 C+3863A). The frequencies of each SNP were 0.357 (IGFBP3 G-854C), 0.472 (IGFBP3 G-100A), 0.418 (IGFBP3 G+421T), 0.363 (IGFBP3 T+1636A) and 0.226 (IGFBP3 C+3863A), respectively. Haplotypes and their frequencies were estimated by EM algorithm. Six haplotypes were constructed with five SNPs and linkage disequilibrium coefficients (|D'|) between SNP pairs were also calculated. The information on SNPs and haplotypes in IGFBP3 gene could be useful for genetic studies of this gene.
Many studies have reported the frequency and distribution of haplogroups among various cattle breeds for verification of their origins and genetic diversity. In this study, 318 complete sequences of the mtDNA control region from four Korean cattle breeds were used for haplogroup classification. 71 polymorphic sites and 66 haplotypes were found in these sequences. Consistent with the genetic patterns in previous reports, four haplogroups (T1, T2, T3, and T4) were identified in Korean cattle breeds. In addition, T1a, T3a, and T3b sub-haplogroups were classified. In the phylogenetic tree, each haplogroup formed an independent cluster. The frequencies of T3, T4, T1 (containing T1a), and T2 were 66%, 16%, 10%, and 8%, respectively. Especially, the T1 haplogroup contained only one haplotype and a sample. All four haplogroups were found in Chikso, Jeju black and Hanwoo. However, only the T3 and T4 haplogroups appeared in Heugu, and most Chikso populations showed a partial of four haplogroups. These results will be useful for stable conservation and efficient management of Korean cattle breeds.
The high mobility group AT-hook1 (HMGA1) proteins are known to be related to the regulation of gene transcription, replication and promotion of metastatic progression in cancer cells. The loss of expression by disrupting the HMGA1 gene affects insulin signaling and causes diabetes in the mouse. Previously identified single nucleotide polymorphism (SNP) of HMGA1 was significantly associated with fat deposition traits in the pig. In this study, we identified 3,935 bp nucleotide sequences from exon 5 to exon 8 of the bovine HMGA1 gene and its mRNA expression was observed by quantitative real-time PCR. Six single nucleotide polymorphisms in the bovine HMGA1 gene were detected and the allele frequencies of these SNPs were investigated using the PCR-RFLP method in nine cattle breeds including Limousin, Simmental, Brown Swiss, Hereford, Angus, Charolais, Hanwoo, Brahman and Red Chittagong cattle. The map location showed that the bovine HMGA1 gene was also closely located with a previously identified meat quality QTL region indicating this gene is the most likely positional candidate for meat quality traits in cattle.
Smith, Stephen B.;Gill, Clare A.;Lunt, David K.;Brooks, Matthew A.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.22
no.9
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pp.1225-1233
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2009
Fat composition of beef, taken here to mean marbling, can be manipulated by time on feed, finishing diet, and breed type. These three factors also strongly influence the fatty acid composition of beef. Both the amount of marbling and the concentration of monounsaturated fatty acids (MUFA) increase with time on feed in grain-fed and pasture-fed cattle, but much more dramatically in grain-fed cattle. High-concentrate diets stimulate the activity of adipose tissue stearoyl-CoA desaturase (SCD), which is responsible for the conversion of saturated fatty acids (SFA) to their $\Delta{9}$ desaturated counterparts. Also, grain feeding causes a depression in ruminal pH, which decreases those populations of ruminal microorganisms responsible for the isomerization and hydrogenation of polyunsaturated fatty acids (PUFA). The net result of elevated SCD activity in marbling adipose tissue and depressed ruminal isomerization/hydrogenation of dietary PUFA is a large increase in MUFA in beef over time. Conversely, pasture depresses both the accumulation of marbling and SCD activity, so that even though pasture feeding increases the relative concentration of PUFA in beef, it also increases SFA at the expense of MUFA. Wagyu and Hanwoo cattle accumulate large amounts of marbling and MUFA, and Wagyu cattle appear to be less sensitive to the effects of pastures in depressing overall rates of adipogenesis and the synthesis of MUFA in adipose tissues. There are small differences in fatty acid composition of beef from Bos indicus and Bos taurus cattle, but diet and time on feed are much more important determinants of beef fat content and fatty acid composition than breed type.
Korean native chickens are a very valuable chicken population in Korea and their prices are higher than that of commercial broilers. In order to discriminate two commercial Korean native chicken populations (CCP1 and CCP2), single nucleotide polymorphisms (SNPs) from mitochondrial (mt) DNA D-loop sequences and LEI0258 marker polymorphisms in the major histocompatibility complex (MHC) region were investigated. A total of 718 birds from nine populations were sampled and 432 mtDNA sequences were obtained. Of these, two commercial Korean native chicken populations (363 birds) were used for investigation of their genetic relationship and breed differentiation. The sequence data classified the chickens into 20 clades, with the largest number of birds represented in clade 1. Analysis of the clade distribution indicated the genetic diversity and relation among the populations. Based on the mtDNA sequence analysis, three selected SNPs from mtDNA polymorphisms were used for the breed identification. The combination of identification probability (Pi) between CCP1 and CCP2 using SNPs from mtDNA and LEI0258 marker polymorphisms was 86.9% and 86.1%, respectively, indicating the utility of these markers for breed identification. The results will be applicable in designing breeding and conservation strategies for the Korean native chicken populations and also used for the development of breed identification markers.
The population sizes of three Korean indigenous cattle populations have been drastically reduced over the past decades. In this study, we examined the extent to which reduction in populations influenced genetic diversity, population structure and demographic history using complete mitochondrial DNA (mtDNA) control region sequences. The complete mtDNA control region was sequenced in 56 individuals from Korean Black (KB), Jeju Black (JEB) and Korean Brindle (BRI) cattle populations. We included 27 mtDNA sequences of Korean Brown (BRO) from the GenBank database. Haplotype diversity estimate for the total population was high (0.870) while nucleotide diversity was low (0.004). The KB showed considerably low nucleotide (${\pi}$ = 0.001) and haplotype (h = 0.368) diversities. Analysis of molecular variance revealed a low level of genetic differentiation but this was highly significant (p<0.001) among the cattle populations. Of the total genetic diversity, 7.6% was attributable to among cattle populations diversity and the rest (92.4%) to differences within populations. The mismatch distribution analysis and neutrality tests revealed that KB population was in genetic equilibrium or decline. Indeed, unless an appropriate breeding management practice is developed, inbreeding and genetic drift will further impoverish genetic diversity of these cattle populations. Rational breed development and conservation strategy is needed to safeguard these cattle population.
Mamvura, Chiedza Isabel;Cho, Sangbuem;Mbiriri, David Tinotenda;Lee, Hong-Gu;Choi, Nag-Jin
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.27
no.11
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pp.1577-1583
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2014
Encapsulation is a method used to protect material from certain undesirable environments, for controlled release at a more favorable time and place. Animal productivity would be enhanced if feed additives are delivered to be utilized at their site of action, bypassing the rumen where they are likely to be degraded by microbial action. A novel method of encapsulation with sesame gum was used to coat nitrate, a known enteric methane mitigating agent, and tested for the effect on methane reduction and other in vitro fermentation parameters using rumen fluid from cannulated Hanwoo steers. Orchard grass was used as basal diet for fermentation. The treatments were matrix (1.1 g sesame gum+0.4 g sesame oil cake) only, encapsulated nitrate (matrix+nitrate [21 mM]), free nitrate (21 mM), and a control that contained no additive. Analyses of fermentation parameters were done at 0, 3, 6, 9, 12, 24, and 48 h time periods. In comparison to control, both free and encapsulated nitrate produced significantly reduced (p<0.01) methane (76% less) and also the total volatile fatty acids were reduced. A significantly higher (p<0.01) concentration of ammonia nitrogen was obtained with the encapsulated nitrate treatment (44%) compared to the free form (28%) and matrix only (20%) (p = 0.014). This might suggest slow release of encapsulated nitrate so that it is fully reduced to ammonia. Thus, this pioneering study found a significant reduction in methane production following the use of sesame gum encapsulated nitrate that shows the potential of a controlled release system in enhancing sustainability of ruminant production while reducing/eliminating the risk of nitrite toxicity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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