• Toxicological Research
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• 제31권3호
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• pp.299-305
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• 2015

An HPLC analytical method was validated for the quantitative determination of biogenic amines in agricultural products. Four agricultural foods, including apple juice, Juk, corn oil and peanut butter, were selected as food matrices based on their water and fat contents (i.e., non-fatty liquid, non-fatty solid, fatty liquid and fatty solid, respectively). The precision, accuracy, recovery, limit of detection (LOD) and quantification (LOQ) were determined to test the validity of an HPLC procedure for the determination of biogenic amines, including tryptamine, ${\beta}$-phenylethylamine, putrescine, cadaverine, histamine, tyramine, spermidine and spermine, in each matrix. The LODs and LOQs for the biogenic amines were within the range of 0.01~0.10 mg/kg and 0.02~0.31 mg/kg, respectively. The relative standard deviation (RSD) of intraday for biogenic amine concentrations ranged from 1.86 to 5.95%, whereas the RSD of interday ranged from 2.08 to 5.96%. Of the matrices spiked with biogenic amines, corn oil with tyramine and Juk with putrescine exhibited the least accuracy of 84.85% and recovery rate of 89.63%, respectively, at the lowest concentration (10 mg/kg). Therefore, the validation results fulfilled AOAC criteria and recommendations. Subsequently, the method was applied to the analysis of biogenic amines in fermented agricultural products for a total dietary survey in Korea. Although the results revealed that Korean traditional soy sauce and Doenjang contained relatively high levels of histamine, the amounts are of no concern if these fermented agricultural products serve as condiments.

• Journal of Dairy Science and Biotechnology
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• 제34권3호
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• pp.187-191
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• 2016

본 연구는 국내산 숙성치즈의 바이오제닉 아민 함량 분석을 위한 기초연구로 HPLC 분석법을 이용한 숙성치즈의 바이오제닉 아민 함량 분석법을 검토하였다. 본 연구에서 사용된 바이오제닉 아민의 종류는 Histamine dihydrochloride, Tyramine hydrochloride, ${\beta}$-phenylethylamine hydrochloride, Putrescine dihydrochloride, Cadaverine, Spermidine, Tryptamine hydrochloride, Ethanolamine hydrochloride 및 Butylamine로 총 9종이었으며, 분석항목은 직선성, 검출한계, 정량한계 및 회수율을 측정하였다. 각각의 바이오제닉 아민의 직선성은 모두 r = 0.99 이상으로 측정되어 양호하게 분석되었고, 검출한계는 각각 3.7, 3.4, 3.4, 4.0, 3.4, 3.4, 3.5, 4.1 및 3.4 ppm, 정량한계는 11.3, 10.4, 10.3, 12.2, 10.4, 10.5, 10.7, 12.5 및 10.4 ppm으로 나타났으며, 회수율은 112, 104, 93, 108, 91, 102, 101 및 92%로 나타났다. 따라서 본 연구를 통하여 바이오제닉 아민 9종에 대한 직선성, 검출한계, 정량한계 및 회수율을 측정한 결과, 모두 만족스러운 결과를 나타냈으며, 숙성치즈의 바이오제닉 아민에 대한 기초자료로 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

• 약학회지
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• 제35권4호
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• pp.288-294
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• 1991

A new fluorescent derivatizing reagent was developed to be used in HPLC for the trace determination of primary and secondary amines. This new reagent, 1-(N,N-dimethylamino)pyrene-6-sulfonyl chloride, was synthesized by the chlorination of sodium 1-(N,N-dimethylamino)pyrene-6-sulfonate which was obtained from 1-(N,N-dimethylamino)pyrene after sulfonation. Ephedrine and norephedrine were derivatized quantitatively by this reagent. The optimum conditions for the derivatization such as pH, reagent concentration, reaction time and reaction temperature ware examined. The structures of derivatives were identified by IR, $^{1}$H-NMR and MS methods. The fluorescence properties and the stability of the derivatives were examined. The derivatives were separated on silica column with an isocratic elution using the mixture of n-hexane and ethylacetate and monitored by fluorescene detector. Linear calibration curves were obtained and detection limits in a 10 $\mu$l injection volume were 5 picomole for ephedrine and norephedrine.

• 분석과학
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• 제20권2호
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• pp.115-123
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• 2007

헤테로싸이클릭 아민류(heterocyclic amines, HAs)는 소고기, 돼지고기, 닭고기 그리고 생선과 같은 근육질의 육류를 조리 할 때 생겨나는 돌연변이원성/발암성 화학물질로 잘 알려져 있다. 식품으로부터 HAs의 분석에 있어 가장 큰 어려움은 HAs가 식품 중에 극히 미량(수 ng/g)으로 존재한다는 것과 많은 방해물질이 존재한다는 것이다. 식품으로부터 HAs를 추출하고 정제하기 위해 고체-상 추출(solid-phase extraction, SPE)이 많이 사용되고 있다. HAs 분석을 위해 여러 단계의 SPE 과정을 수행하였다. HAs의 회수율은 표준물질이 녹여져 있는 메탄올 수용액과 조리되지 않은 돼지고기에 표준용액을 스파이크하여 서로를 비교하여 얻었다. 회수율은 25.0 ng/g에서 25.3~93.0%의 값을 얻을 수 있었다. 확립된 감도 좋고 재현성있는 시료전처리방법을 통해서 ${\mu}$-LC/ESI-MS에 주입함으로써 조리된 육류로부터 HAs를 분석하는데 응용될 수 있을 것이다. 다른 방법으로는 freezing filtration 방법으로써 보다 좋은 추출 효율과 재현성을 나타내었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권3호
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• pp.491-496
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• 2001

A modification of decarboxylating agar medium as described by niven was performed to improve the detection method of biogenic amine-producing bacteria and to eliminate the false-positive. A total of 120 bacterial strains isolated from kimchi were used to evaluate different dicarboxylating agar media and for screening biogenic amines. Potential false-positives ranged from approximately 66 to 79% of the strains tested in the already well-known media. In our improved medium, none of the 120 strains showed the potential false-positives. There was a good agreement (81.7%-87.5%) between the results obtained by the improved medium and by HPLC analysis. Consequently, this medium was greatly improved in screening biogenic amine-producing bacteria and discarding false-positives. Of the 120 kimchi isolates, 14.2, 18.3, 37.5, and 0.8% were found by HPLC to be the producers of histamine, tyramine, putrescine (as a form of spermine), and cadaverine, respectively. The proportion of biogenic amine producer during kimchi fermentation increased to a maximum at an immature period and decreased thereafter.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제13권5호
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• pp.692-699
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• 2003

The changes of physicochemical and microbiological states of Myeolchi-jeot, a Korean salted and fermented anchovy, were investigated during 20 days of storage at $4^{\circ}C,\;15^{\circ}C,\;and\;30^{\circ}C$. A total of 314 bacterial strains isolated from Myeolchi-jeot samples at different time intervals were identified, and their abilities to produce biogenic amines were determined by both decarboxylating agar media and HPLC analysis. The salinity and water activity of Myeolchi-jeot changed little, while the pH increased slightly over 20 days at the tested temperatures. A significant increase of total plate count was observed in the sample stored at $30^{\circ}C$. Staphylococcus spp. were dominant in Myeolchi-jeot, and its amine productivity was very weak. Bacillus spp. appeared increasingly with the progress of storage at all temperatures tested, and the increase was considerably dependent on the increase of storage temperature. Also, 58-73%, 83-90%, 81-90%, and 83-93% of Bacillus strains had the ability to produce histamine, tyramine, putrescine, and cadaverine, respectively. Therefore, the main amine producer in Myeolchi-jeot stored for a long period seems to be the genus Bacillus, especially B. licheniformis.

• 한국식품과학회지
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• 제38권6호
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• pp.730-737
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• 2006

국내 유통발효식품 중 BAs 함량을 분석하고자 HPLC를 이용한 최적 분석방법을 확립하고, 유통 발효식품 중 BAs 함량을 조사하였다. BAs의 분석에는 0.1N 염산으로 추출한 후 dansyl 유도체를 사용하는 방법이 최적 분석방법으로 선택이 되었고, 검출한계가 0.10 ${\mu}g/mL$ 이하로 나타났다. 식품별 BAs의 함유량은 장류의 경우 한식된장에서 HIS 및 TYR의 함량이 높게 나타났고, 청국장의 경우도 유사하였다. 특히 전통적으로 생산한 된장과 청국장에서 BAs함량이 높게 나타나 종국 및 제조공정의 개선이 필요한 것으로 사료되었다. 간장의 경우 양조간장과 전통간장의 차이가 크지 않았으나, 젓갈류 중에서는 멸치액젓과 까나리 액젓에서 PUT, CAD, TRY, HIS, 및 TYR의 함량이 높게 나타났다. 과실주와 맥주에서는 보통 발효에 관여하는 효모가 BAs 생성능이 없기 때문에 낮은 HIS 수치를 보여주었고, 치즈에서는 TYR의 농도가 약간 높게 나왔을 뿐 전체적인 BAs의 함량은 낮은 수준이었다. 배추김치의 경우 PUT, HIS 및 TYR의 함량이 높게 나타났으나, 김치 제조에 부재료로 들어가는 멸치액젓과 까나리 액젓이 BAs의 함량을 높이는 것으로 추정되었다. 각 식품의 BAs의 함량 결과를 국민건강${\cdot}$영양조사의 일일섭취량에 대입하여 일일섭취량을 조사한 결과 매우 적은 수준으로 나타났으나 TYR의 MAOIs를 복용하는 환자의 경우 BAs가 많이 함유한 식품의 섭취는 가급적 피하는 것이 좋을 것으로 사료된다.

• 한국식품과학회지
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• 제44권2호
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• pp.196-201
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• 2012

본 연구에서는 청국장 및 볏짚에서 분리한 미생물중 decarboxylase 배지에서 탈탄산효소 활성이 낮은 균주로 $B.$ $subtilis$ HH12, $B.$ $subtilis$ HR254, $P.$ $barcinonensis$ KR97을 선발하였다. 이들 선발 미생물들의 histidine decarboxylase($hdc$) gene 과 tyrosine decarboxylase($tdc$) gene을 조사한 결과, $hdc$ gene은 HH12, HR254, KR97 균주에서는 검출되지 않았으나, $tdc$ gene은 HH12, HR254, KR110 균주에서 검출되었다. 또한 HPLC를 통해 선발 균주들의 배양상등액 중 amines 생성량을 분석한 결과, HH12, HR254, KR110 균주는 histamine이 검출되지 않았고 tyramine은 HH12, HR254, KR110 균주는 각각 6.09, 3.68, 6.30 mg/L로 검출되었다. 선발한 biogenic amines 저감화 균주들의 BAs 생성량을 decarboxylase 고생산 미생물로 사료되는 $B.$ $subtilis$ MC138 균주와 비교해보면 현저히 낮은 수준으로 나타났다.

• 한국물환경학회지
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• 제25권2호
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• pp.227-234
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• 2009

In this research, a retrofitting process, which consists of a pretreatment system (coagulation) for dye wastewater combined with a biological nutrient system (MLE process using media), for a sewage treatment plant that has to treat dye wastewater efficiently with domestic wastewater were developed and a pilot plant was operated for verifying adoptability and performance of the developed advanced process for dye wastewater. From the results of the pilot plant operation, BOD 52.9%, $COD_{Cr}$ 55.9%, and color 71.3% were removed in pretreatment of coagulation process and the biodegradability of dye wastewater was improved to $0.32{\sim}0.59BOD/COD_{Cr}$ of the coagulated wastewater from $0.29{\sim}0.43BOD/COD_{Cr}$ of the raw dye wastewater. The final effluent concentrations were BOD of 8 mg/L, $COD_{Cr}$ of 43 mg/L, $COD_{Mn}$ of 18 mg/L, T-N of 8 mg/L, and T-P of 1.3 mg/L, respectively. Color was removed from 1655 to 468 unit by coagulation and then to 123 unit by MLE process. The HPLC analysis of aromatic amines in wastewater showed that decolorization was achieved by cometabolism while aromatic amines were produced by cleavage of azo bonds under anaerobic conditions and these products were removed in an aerobic tank subsequently. Nitrification rates of attached and suspended microorganisms were evaluated comparatively and the acclimating conditions of bacteria on media were validated by the scanning electron microscope.

• 한국축산식품학회지
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• 제29권6호
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• pp.719-725
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• 2009

헤테로고리 아민은 높은 돌연변이성과 발암 가능성을 가진 물질로, 단백질이 높게 함유된 식품의 가열 중 발생한다. 본 실험에서는 $220^{\circ}C$에서 양면을 10분씩 가열 조리한 쇠고기 패티를 microwave를 이용하여 예열처리를 하였을 때 나타나는 HCAs의 생성량에 대한 영향을 분석하였다. 헤테로고리 화합물의 분석을 위해 전처리 과정에서 solidphase extraction 방법을 이용하였고, LC/MS로 정량과 정성분석을 하였다. 시료에서는 9개의 HCAs(Trp-P-2, Trp-P-1, Glu-P-1, Glu-P-2, Norharman, Harman, $A{\alpha}C$, MeIQx, PhIP)가 검출되었으며 이 중 Norharman, Harman, PhIP가 상대적으로 높은 함량이었다. 1분 동안의 microwave 예열 처리는 검출된 대부분의 HCAs 생성을 무처리 대조군에 비해 90% 이상 감소시켰다. Amino-carbolines류의 HCAs 경우, 1분의 microwave preheating 처리가 가장 효과적이었고 PhIP가 대부분의 함량을 차지하는 amino-imidazoazaarens류는 microwave preheating 시간이 증가할수록 뛰어난 HCAs 감소효과를 나타내었다.